RP—HPLC法测定神曲胃痛胶囊中大黄素、大黄酚的含量

RP—HPLC法测定神曲胃痛胶囊中大黄素、大黄酚的含量 RP—HPLC法测定神曲胃痛胶囊中大黄素、 大黄酚的含量 RP—HPLC法测定神曲胃痛胶囊中大黄素,大黄酚的含量 许世霞(广东众生药业股份有限公司,东莞市523325) 中图分类号R283.65;R927.2文献标识码A文章编号1001-0408(2008)18—1411—03 摘要目的:建立以反相高效液相色谱法测定神曲胃痛胶囊中大黄素,大黄酚含量的方法.方法:色谱柱为PhenomenexBDS, C18(250mm×4.6mm,5m),流动相为乙腈一水一冰醋酸(55:45:0.5),流速为1.0mL?min,,检测波长为254nm.结果:大 黄素,大黄酚的检测浓度分别在2.188--54.700,4.312,107.800g?mL范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r均 为0.9999);二者平均回收率分别为96.52%,98.45%,RSD分别为0.59%,0.43%.结论:本方法简便,可靠,重现性好,可用于神 曲胃痛胶囊的质量控制. 关键词大黄素;大黄酚;神曲胃痛胶囊;含量测定;反相高效液相色谱法 DeterminationofEmodinandChrysOphanOlinShenquWeitongCapsulesbyRP—HPLC XUShi—xia(GuangdongZhongshengPharmaceuticalCo.Ltd.,Dongguan523325,Chin a) ABSTRACTOBJECTIVE:TodeterminethecontentsofEmodinandChrysophanolinShe nquweitongcapsulebyRr, HPLC.METHODS:ThesampleswereseparatedonPhenomenexBDS—C18(250mm×4.6mm,5m).ThemobilephaseCO1”1 sistedofacetonitrile—water—glacialaceticacid(55:45:0.5)ataflowrateof1.0mL?min 一.Thedetectionwavelength wassetat254nm.RESULTS:TheI~nearrangeforEmodinwas2.188,54.700g?mL.(r=0.9999)and4.312,107.800 g?mL.forChrysophanol(r=0.9999).TheaveragerecoveryofEmodinwas96.52%(RSD:0 .59%)versus98.45% (RSD=0.43%)ofChrysophano1.CONCLUSION:ThismethodiSconvenient,accurate,r eproducibleandapplicableforthe qualitycontrotofShenquweitongcapsule. KEYW0RDSEmodin;Chrysophanol;Shenquweitongcapsule;Contentdetermination; RP—HPIC 定.以进样量(x,g)为横坐标,峰面积积分值(y)为纵坐标绘 制标准曲线,得回归方程为Y:3.2316×10X+52(r= 0.9998).结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,天麻素进样量在0.1264--3.1600g范 围内与峰面积积分值呈良好线性关系. 2.5稳定性试验 精密吸取供试品溶液10L,每隔2h进样测定一次,共测 定8次.结果,天麻素峰面积的RSD=0-8%,表明供试品溶液 在16h内稳定性较好. 2.6重现性试验 取同一批样品,平行试验6次,每份吸取供试品溶液10 L注入液相色谱仪,按上述色谱条件进样测定.结果,天麻素 )为0.128%,RSD=1.5%,表明方法重现 的平均含量(标示量 性较好. 2.7精密度试验 精密吸取同一份对照品溶液,重复进样测定5次.结果,天 麻素峰面积的RSD=1.8%,表明仪器精密度良好. 2.8加样回收率试验 精密称取已知含量(标示量为0.128%)的样品6份,分别 加入对照品溶液(浓度为0.632mg?mL)2.0mL,按 “2.2.2”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件进样10 L,测定,计算加样回收率,结果见表1. 2.9样品含量测定 取6批样品,分别按”2.2.2”项下方法制备供试品溶液,按 女助理工程师.研究方向:新药的研发与申报,药品质量标准.电 话:0769—86188201.E—mail:xsxldl@163.COITI 中国药房2008年第19卷第18期 c 表1加样回收率试验结果(n=6) Tab1Resultsofrecoverytest(n6) 上述色谱条件进样10L,测定,按外标峰面积法计算样品含 量.结果,6批样品(批号分别为070510,070605,070612, 070430,070512,070805)的含量(标示量)分别为0.128%, 0.136,0.1330.150彩,0.148,0.155 3讨论 天麻是强力天麻杜仲胶囊的主药,具有平肝,息风,止痉的 功能,与该中药制剂的功能主治相似.由于原标准在采用薄层 扫描法测定天麻素的含量时背景干扰比较严重,扫描数据往往 不准确,不能很好地控制药品质量,故本试验采用HPLC法来 测定,方法简便,快速,准确,可用于该制剂的质量控制. 参考文献 [1】卫生部药典委员会编.中华人民共和国卫生部药品标准 中药成方制剂(第16册)[S】.1998:170. 【2】国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)Is】.2005 年版.北京:化学工业出版社,2005:39. (收稿日期:2008—03—13修回日期:2008—05—22) ChinaPharmacy2008Vo1.19No.18?1411? 神曲胃痛胶囊作为中药复方制剂,具有止痛生肌,理气和胃, 健脾消食的功效,可用于胃酸过多,胃痛,食欲不振,消化不良等 症的治疗”.本品自生产以来一直以氢氧化铝,碳酸氢钠2种成 分的含量测定作为定量依据.本试验采用反相高效液相色谱 HPLC)法对本品中大黄素,大黄酚的含量进行测定”, (RP— 结果表明,方法简便,可靠,重现性好,可用于神曲胃痛胶囊的 质量控制. 1仪器与试药 600型高效液相色谱仪,2487型紫外检测器(美国Waters 公司);N2000型色谱工作站(浙江大学).大黄素对照品(批号: 110756—200110),大黄酚对照品(批号:110796—200310)均由 中国药品生物制品检定所提供;神曲胃痛胶囊(广东众生药业 股份有限公司,批号:060704);乙腈为色谱纯,水为纯化水,其 它试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:PhenomenexBDg—C18(250mmX4.6mm,5 ptm);流动相:乙腈一水一冰醋酸(55:45:0.5);流速:1.0 mL?min一;柱温:20?;检测波长:254nm.理论塔板数按大 黄素峰计算应不低于5000;分离度>1.5.色谱见图1. 2 B 图1高效液相色谱 A.供试品;B.混合对照品;1.大黄素;2.大黄酚 Fig1HPLC A.sample;B.mixedcontrolarticle;1.Emodin;2.Chrysophanol 2.2对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品,大黄酚对照品各适量,加乙酸乙 酯一无水乙醇(1:2)溶液制成每1mL含大黄素5g,大黄酚 10g的混合溶液,即得. 2.3供试品溶液的制备 取本品内容物,研磨,混匀,取约0.32g,精密称定,置于 100mL锥形瓶中,精密加入盐酸一乙醇(1:24)溶液25mL, 称定重量,加热回流1h,放冷,再称定重量,用盐酸一乙醇(1: 24)溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10mL, 置于分液漏斗中,加10mL水,混匀,再用三氯甲烷提取4次, 每次20mL,合并三氯甲烷提取液,加水提取2次,每次30 mL,取三氯甲烷层,回收三氯甲烷至干,残渣用甲醇溶解并转 移至10mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤 液,即得. 2.4线性关系考察 精密吸取大黄素(54.7g?mL),大黄酚(107.8g? mL’)对照品混合溶液2,3,5,10,15,25,50mL,分别置于50 mL量瓶中,加乙酸乙酯一无水乙醇(1:2)溶液稀释至刻度, 摇匀,按上述色谱条件进样10L,记录色谱图.以相应峰面积 积分值(y)为纵坐标,对照品浓度(X)为横坐标绘制标准曲 线,得大黄素回归方程为y72122.64X+5312.86(r: 0.9999);大黄酚回归方程为Y=118363.72X-13110.92 (r一0.9999).结果表明,大黄素,大黄酚的检测浓度分别在 54.700,4.312--107.800g?mL.范围内与各自峰 2.188-- 面积积分值呈良好的线性关系. 2.5重现性试验 . 1412.ChinaPharmacy2008Vo1.19No.18 精密称取神曲胄痛胶囊(批号:060704)适量,按”2.3”项下 方法制备6份供试品溶液,分别进样10”L,测定峰面积并计算 大黄素及大黄酚的含量.结果,大黄酚的RSD=0.18%,大黄 素的RSD=0.49%,表明方法重现性良好. 2.6稳定性试验 精密吸取新配制的供试品溶液,每隔1h进样测定1次, 共测定7次.结果,大黄酚的RSD=1.72%,大黄素的 RSD=0.54%,表明供试品溶液在6h内稳定. 2.7精密度试验 精密称取大黄素对照品0.01028g,大黄酚对照品0.01986 g,加乙酸乙酯一无水乙醇(1:2)溶液制成每1mL含大黄素5 g,大黄酚10g的混合溶液.精密吸取此混合溶液10L,按 上述色谱条件测定5次.结果,大黄酚的RSD一0.62%,大黄 素的RSD=0.51%,表明仪器精密度良好. 2.8加样回收率试验 精密称取大黄素对照品0.02272g,置于100mL量瓶中, 加乙酸乙酯一无水乙醇(1:2)溶液稀释至刻度;另精密称取大 黄酚对照品0.01071g,置于50mL量瓶中,加乙酸乙酯一无 水乙醇(1:2)溶液稀释至刻度.分别精密量取以上2种溶液各 5mL,置于250mL量瓶中,加盐酸一乙醇(1:24)溶液稀释至 刻度,作为对照品贮备液. 精密称取已知含量的样品(批号:060704)0.16g各6份, 置于锥形瓶中,精密加入对照品贮备液25mL,按上述色谱条 件进样10L,计算加样回收率,结果见表1,表2. 表1大黄素的加样回收率试验结果【n=6) Tab1ResultsofrecoverytestofEmodin【,l=6) 表2大黄酚的加样回收率试验结果【,l=6) Tab2ResultsofrecoverytestChrysophanol(,l=6) 2.9样品含量测定 取6批样品,按”2.3’’项下方法制备供试品溶液,照上述方 法测定大黄素,大黄酚的含量,结果见表3. 表3样品的含量测定结果(,l=6) Tab3Resultsofcontentdeterminationofsamples(,l=6) 中国药房2008年第19卷第18期 一 一 , HPLC法测定开胸顺气丸中橙皮苷的含量 王福霞H,彭柳2康红英(1.湖北宜昌市第一人民医院,宜昌市443003;2.湖北宜昌 市药品检验所,宜昌 市443003) 中图分类号R283.64;R927.2文献标识码A文章编号lOOi一 0408(2008)18—1413—02 摘要目的:建立以高效液相色谱法测定开胸顺气丸中橙皮苷含量的方法.方法:色 谱柱为NucleosilCs(250mm×4.6mm,10 um),流动相为甲醇一冰醋酸一水(35:4:61),流速为1.0mL?min-I,检测波长为 283nm.结果:橙皮苷检测浓度在0.432, 5.184gg?mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均加样回收率 为100.9%,RSD=0.9%(:6).结 论:本方法简便,准确,重现性好,精密度高,可用于开胸顺气丸的质量控制. ;含量测定 关键词高效液相色谱法;开胸顺气丸;橙皮苷 DeterminationofHesperidininKaixiongShunqiPillsbyHPLC WANGFu—xia(HubeiProvinceYichangFirstPeople’SHospital,Yichang443003,China) PENGLiu,TANGHong—ying(HubeiProvinceYichangInstituteforDrugControl,Yichang443003,China) ABSTRACTOBfECTIVE:ToestablishanHPLCmethodforthecontentdeterminationof HesperidininKaixiongshunqi pills.METH0DS:TheanalyticalcolumnwasNucleosilC18(250mm×4.6mm,10m)andth emobilephaseconsistedof methanol—glacialaceticacid—water(35:4:61)asaflowrateof1.0mL?min1.Thedetectionwavelengthwas283nm. RESULTS:ThelinearrangeofHesperidinwas0.432,5.184肚 g.mLI1(r=0.9999).Theaveragerecoverywasi00.9% (RSD=0.9%,=6).CONCLUSION:Themethodissimple,accurate,reproducibleandpreci se,andapplicableforthede— terminationofhesperidininKaixiongshunqipills. KEYWORDSHPLC;Kaixiongshunqipills;Hesperidin;Contentdetermination 开胸顺气丸由槟榔,牵牛子(炒),陈皮,木香,厚朴(姜制), 三棱(醋制),莪术(醋制),猪牙皂等药味经加工制成,是2005 年版《中国药典》(一部)收载品种”.其具有消积化滞,行气止 痛等功效,用于治疗饮食内停,气郁不舒导致的胸胁胀满,胃脘 疼痛.为有效控制该制剂质量,确保疗效,在参考其他文献 的基础上,笔者以处方中主药陈皮的有效成分橙皮苷为定量控 制指标,采用高效液相色谱(HPLC)法测定其含量. 1仪器与试药 1i00系列高效液相色谱仪(美国Agilent公司);ALl04 型电子分析天平(瑞士MettlerTodelo公司);SB3200型超声 波清洗器(上海超声波仪器厂);HH一4型数显恒温水浴锅(江 苏金坛市荣华仪器制造有限公司).橙皮苷对照品(中国药品生 物制品检定所,批号:721—9909,供含量测定用):流动相所用 试剂为色谱纯,水为纯化水,其它试剂均为分析纯;开胸顺气丸 3批(湖北黄石A药业有限公司,批号:060602;河南B药业有 限公司,批号:060402;北京C药业有限公司,批号:5081324), 均为市售品. 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:NucleosilCl8(250mm×4.6mm,10肚m);流动 相:甲醇一冰醋酸水(35:4:61);检测波长:283nm;柱温: 25?;流速:1.0mL?min:进样量:10肚L. 2.2溶液的制备与测定 2.2.1对照品溶液的制备:精密称取橙皮苷对照品18.02 3讨论 在上述色谱条件下,大黄素,大黄酚能与样品中其它组分 较好地分离,因此该色谱方法能够同时对神曲胃痛胶囊中大黄 素,大黄酚进行含量测定. 大黄是神曲胃痛胶囊的主药,故对大黄的有效成分大黄 素,大黄酚进行定量可以控制本制剂的质量.根据对6批样品 的含量测定结果,可将本品含量限度定为每粒含大黄以大黄素 (C5H00)和大黄酚(C5H00)总量计,不得少于0.50mg. 参考文献 ?副主任药师.研究方向:中药鉴定及中药化学成分研究.E mail:wfx一01@tom.corn 中国药房2008年第19卷第18期 [1】肖培根.新编中药志[M】.第1版.北京:化学工业出版 社,2002:23. 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