【word】 不同工艺的茵栀黄注射液的指纹图谱研究

【word】 不同工艺的茵栀黄注射液的指纹图谱研究 不同工艺的茵栀黄注射液的指纹图谱研究 中国医药工业杂志ChineseJournalofPharmaceuticals2009,40(6) .’’’’’’’’’’’’’’’’’’J i中药与天然药物;rC’’’’’’’’’’’’’’’’’’ 不同工艺的茵栀黄注射液的指纹图谱研究 ,徐莲英,季申 毛秀红,张彤,刘云 (1.上海市食品药品检验所;2.上海中医药大学,上海201203;3.中国人民解放军总后勤部卫生部药品仪器检验所,北京100071) 摘要用色谱指纹图谱技术研究了不同生产工艺茵栀黄注射液.色谱条件为C.色谱柱,流动相为甲醇一0.05%磷酸水溶液, 梯度洗脱,波长238nm,柱温3O?,运行时间80min.对比分析了8家企业按不同工艺生产的茵栀黄注射液的指纹图谱. 结果显示,生产工艺对茵栀黄注射液指纹图谱的影响较大. 关键词:茵栀黄注射液;生产工艺;指纹图谱;高效液相色谱 中图分类号:TQ460.72;0657.72文献标志码:A文章编号:1001—8255(2009)06—0417-04 StudyonHPLCFingerprintsofYinzhihuangInjectionPreparedbyDifferent Processes MAOXiu.hong,ZHANGTong,LIUYun,XULian-ying2 , JIShen (.ShanghaiInstituteforFoodandDrugControl,”2.ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203 3.InstituteforDrugandInstrumentControlHealthDepartmentGLDofPLA.Beijing100071, ABSTRACT:YinzhihuanginjectionpreparedbydifferenttechnologicalprocesseswasinvestigatedbyHPLC fingerprints.ACl8columnwasused,withthemobilephaseofmethanol一 0.05%phosphoricacidbygradientelution,atthe detectionwavelengthof238nmandthecolumntemperatureof30?.withther unningtimeof80min.Thefingerprints ofYinzhihuanginjectionofeightbrandswerecompared.Theresultsshowedthatthepreparationprocesshadsignificant influenceonthefingerprintsof~nzhihuanginjection. KeyWords:Hnzhihuanginjection;technologicalprocess;fingerprint;HPLC 茵栀黄注射液收载于卫生部药品 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 中药成方 制剂第十四册,处方由茵陈提取物,栀子提取物, 黄芩苷(1),金银花提取物组成.茵陈提取物含绿 原酸(2)和对羟基苯乙酮,为利胆的主要活性成 分栀子提取物含环烯醚萜类成分,包括栀子苷(3), 收稿日期:2008.09.24;修回日期:2009.03.27 基金项目:国家十五重大科技专项课题”7O种中药注射剂指纹图谱 研究及其技术平台的建立”(2001BA701701A56)子课题 作者简介:毛秀红(1971一),女.副主任药师,从事中药质量标准 研究. Tel:021.388399OO×266O6 E—mail:Maoxh71@y~oo.cn 通信联系人:季申(1963一),女,主任药师,从事中药质量标准 研究及中药安全性控制方法研究. Tel(Fax):021.50798l95 E-mail:ishen2006@yahoo.com.cn 京尼平苷等,具有较强的利胆作用;1具有较强的 清热燥湿,清热解毒的功能;金银花提取物含绿原 酸类物质,具有较强的清热解毒作用.故本方具清 热解毒,利湿退黄的功效. 原标准的生产工艺规定:茵陈提取物由茵陈药 材用90%乙醇渗漉后水沉去杂制得(即醇提水沉). 栀子提取物为栀子药材用70%的乙醇回流后再用 95%乙醇沉淀及水沉淀制得(即醇提水沉).1为 黄芩药材的水煎液,经盐酸酸化后反复酸析精制而 得.金银花提取物由金银花药材经水提,石硫醇法 去杂制得(即水提石硫醇法).配制茵栀黄注射液 时,上述4种提取物均以固体投料. 但以往的实际生产中,多家企业生产工艺均不 相同,未按部版标准规定,具体见表l. 中国医药工业杂志ChineseJoumalofPharmaceuticals2009,40(6) 表18家生产企业各提取物生产工艺 注射剂的配制过程中,8家企业的生产工艺也 不尽相同,仅有2家采用固体提取物投料.其余6 家企业,茵陈,栀子,金银花3味提取物均未浓缩 干燥,而是制成液体提取物,经测定固体物含量折 算后投料.因此,8家企业虽然生产的是同一名称 的茵栀黄注射液,但工艺不同,内在质量差异很大, 要建立统一的注射液指纹图谱,必须先统一生产工 艺. 本研究根据《中药注射剂指纹图谱研究的技术 要求(暂行)》,《中药注射剂色谱指纹图谱实验 研究技术指南(试行)》,用色谱指纹图谱比较 研究了不同工艺条件所生产的茵栀黄注射液,并建 立了专属性强,重现性好的茵栀黄注射液指纹图谱. 注射液中1,2,3等成分在指纹图谱中均能体现, 可评价生产工艺对茵栀黄注射液质量的影响. 1仪器与试药 1100型高效液相色谱仪(Agilent公司). 1对照品(批号),2对照品(批号 0753—200111),3对照品(批号0749.200007)均由中国药品 生物制品检定所提供,供含量测定用. 茵栀黄注射液(8家企业生产,编号依次为1,8). 甲醇(色谱纯),重蒸水(自制),磷酸(分析纯). 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性试验 色谱柱Kromasil100—5Cl8柱(4.6mmx250rnlTl, 5”m);流动相甲醇一0.05磷酸溶液,梯度洗脱 (见表2);流速1.0ml/min;检测波长238nlTl;柱 温30?,进样量l0ul.理论板数按1峰计算不低 于1×l0. 表2梯度洗脱表/% 2.2溶液制备 参照物溶液:精密称取1对照品适量,加甲醇 溶解稀释制成0.4mg/ml的溶液. 供试品溶液:取本品注射液2ml,置10ml量 瓶中,加水定容,摇匀,即得. 2.3对照指纹图谱及评价方法 本研究采用2种模式3种方法评价指纹图谱. 其中相似度计算采用国家药典委员会推荐的中药色 谱指纹图谱相似度评价系统(2品溶液指纹图谱 中与1参照物溶液色谱峰相应的峰为S峰,计算各 峰的相对保留时间.供试品指纹图谱应与标准指纹 图谱相似,必须有11个共有峰,相对保留时间分 别为0.227(峰1),0.364(峰2,2),0.406(峰3), 0.420(峰4),0.496(峰5,3),0.785(峰6),0.889(峰 7),1.000(S峰,1),1.101(峰8),1.125(峰9), 1.151(峰l0),其相对偏差不得大于士10%.非共 有峰面积不得大于总峰面积的10%. 方法2(相似度模式)(全谱):供试品指纹图 谱与质量标准所附的对照指纹图谱经计算机模拟相 似度软件计算,相似度应大于0.95. 方法3(相似度模式)(不含1):供试品指纹 图谱与质量标准所附的对照指纹图谱(不含1) 经计算机模拟相似度软件计算,相似度应大于 0.80. ? 4l9? 2.4工艺影响 统一生产工艺前,8家生产企业中部分企业未 按部颁标准工艺生产,指纹图谱差异较大(见表2), 主要表现在共有峰缺失,相对峰面积和相似度偏差 较大. 2.4.1对共有峰数目的影响 如表2所示,统一生产工艺前,8家生产企业 的样品的指纹图谱中,有11个共有峰的只有2家 企业的产品,3家企业样品的指纹图谱中缺峰较多. 统一生产工艺后,8家生产企业的61批样品指纹 图谱均能达到11个共有峰. 2.4.2对共有峰相对峰面积的影响 统一生产工艺前,各企业注射液共有峰相对峰 面积差异较大,样品指纹图谱中色谱峰相对峰面积 RSD最高达221.8%,而统一生产工艺后明显下降 (表2),指纹图谱见图2. 表2统一工艺前后各厂注射液共有峰的相对峰面积” 注:”括号内外分别为工艺改进前和改进后的数据 2.5对指纹图谱相似度的影响 如表2所示,茵栀黄注射液指纹图谱中,1峰 面积占总峰面积的80%以上,占很大的权重.统 一 生产工艺前后样品的相似度均达到0.90以上, 差异不明显.故以方法3进行比较.由表3可见, 统一生产工艺前,8家企业中只有2家企业的样品 的相似度在0.8以上,2家在O.7以上,最低的2 家仅为0.5.统一生产工艺后,8家企业产品的相 中国医药工业杂志ChineseJournal影响 似度均有很大提高,其中有4家企业的样品在O.9 以上,3家在0.8以上,仅1家企业生产样品指纹 图谱的相似度为0.77.经分析,是由于该企业未按 部颁标准工艺生产,采用提取物液体投料,导致指 纹图谱中杂质峰较多所致. 4讨论 波长选择:研究中使用DAD二极管阵列检测 器,可获取不同波长的色谱图.1,2(及类似物), 3的最大吸收波长分别为274,327和238nm.研 究中考察了220,238,254,274,327和360nm 波长下的指纹图谱.结果表明,在220nnl波长下, 基线略漂移,274和360nm波长下色谱峰吸收较 弱,238和327nm波长下色谱峰较多.由于3在 327llm吸收较弱,在以327nm为检测波长的指纹 图谱中不出峰,而以238nm为检测波长的指纹图 谱中1类各个成分皆可出峰,且分离情况良好.因 此,选用238nm作为检测波长,可以较完全表达 注射液中各类成分的出峰情况. 中药制剂成分复杂,目前由于研究技术水平的 限制,量效难以一一对应.中药注射剂指纹图谱具 有整体性和模糊性,它能全面反映中药注射剂内在 化学成分的种类与含量,与活性成分研究密切相关, 是现阶段控制中药注射剂的有效手段之一.以往同 一 名称的中药制剂,因工艺不同,产品内在质量差 异很大.要建立统一的注射液指纹图谱,必须先统 一 生产工艺,并严格遵守执行. 参考文献: [1]卫生部药品标准.中药成方制剂第十四册[s]. [2]国家药品监督管理局.中药指纹图谱研究的技术要求(暂 行)[J].中国药品标准,2000,4:3-7. [3]国家药典委员会.中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术 指南(试行)[S].2002.