47例血细胞分析仪血小板计数假性减少原因分析
[摘要] 血细胞分析仪以其高效、快捷、重复性好等优点，已得到广泛应用，但应用中血小板计数时常出现假性血小板减少，令操作者真假难辨。本文通过 47例假性血小板减少原因分析，认为血细胞分析仪
检测
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血小板只能是一种筛查手段，一旦出现血小板凝集、巨大血小板、血小板卫星等现象，将影响血小板计数结果，应根据全国血液学复检专家小组制定的复检标准，进行复片及相关
方法
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给予纠正。
[关键词] 血小板;血细胞计数仪;散点图;直方图;假性血小板减少
[中图分类号]R446.11+1[文献标识码]B[文章编号]1673-7210(2008)11(b)-063-02
血细胞分析仪具有高效、快捷、重复性好等优点，已被各家临床医院广泛应用，但应用中血小板计数时常出现假性血小板减少，令操作者真假难辨，相关报道甚少，本文就我院2006年中47例假性血小板减少原因分析如下:
1 对象与方法
1.1 研究对象
本院2006年门诊及住院患者中47例血小板假性减少者，男27例，女20例。末梢血标本17例， EDTA-K2抗凝静脉血标本30例。
1.2 仪器
美国库尔特HMX血细胞分析仪及配套试剂。日本希森美康KX-21血细胞分析仪及配套试剂。日本OLYMPUS显微镜及草酸铵法血小板稀释液。
1.3 方法
对47例假性血小板减少患者，根据全国血液学复检专家小组指定的复检标准，对于仪器计数血小板偏低、仪器有报警提示、散点图及直方图异常时，推片镜检血小板形态及分布情况;重新采血按《全国临床检验
操作规程
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》第3版要求进行显微镜下草酸铵法血小板复检，计数3次取均值;末梢血预稀释后，EDTA-K2抗凝静脉血标本应放置室温30 min充分混匀后进行血细胞分析。
2 结果
10例患者的末梢血标本，经显微镜下草酸铵法血小板计数结果得以纠正，同时血涂片瑞氏染色后镜检观察血小板形态及分布未见异常。
7例末梢血标本，10例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析及草酸铵法血小板计数结果均得以纠正，血涂片瑞氏染色后镜检观察血小板形态及分布未见异常。
8例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析结果仍然减少，草酸铵法血小板计数结果得以纠正，血涂片瑞氏染色后镜检观察发现血小板大小不等聚集团块。
5例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析血小板计数结果仍然减少，草酸铵法血小板计数结果纠正，血涂片瑞氏染色后显微镜下观察发现“血小板卫星现象”。
7例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析结果仍然减少，草酸铵法血小板计数结果得以纠正，血涂片瑞氏染色后镜检观察发现巨大血小板体积。
3 讨论
10例末梢血标本假性血小板减少患者，多因穿刺组织损伤、组织凝血因子混入血标本中产生肉眼无法见到的凝块[1]，是造成血细胞分析仪计数血小板假性减少的直接原因，对此类末梢血标本假性血小板减少患者，应该予以阅片，必须重新采血。
7例末梢血标本，10例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析得以纠
正的患者，考虑血液离体后血小板产生可逆性聚集，使血小板计数结果偏低。末梢血标本经过预稀释随着与稀释液作用时间延长血小板均匀离散，抗凝静脉血标本中的EDTA-K2随着放置时间延长亦能使血小板逐渐离散[2]，因此采取经室温放置30 min充分混匀后进行血细胞分析可避免血小板假性减少的发生[3]。
8例血涂片瑞氏染色后显微镜下观察发现血小板呈大小不等聚集团块。此类患者多见于肿瘤、自身免疫病、肺心病、晚期孕妇、肝病、毒血症等一些不明原因产生凝集素，使EDTA-K2抗凝血中血小板聚集呈大小不等团块，血细胞计数仪会把这些凝集团块当作白细胞来计数，这样血小板计数结果将假性减少，而白细胞数量增加;对于此类血小板减少一般仪器可有警报提示和散点图、直方图异常，库尔特HMX血细胞分析仪会在WBC结果后面做出[*R]提示，WBC散点图DF1、DF2图像下方血小板区细胞分布密度向右延伸[4]，提示有血小板凝集的存在;希森美康KX-21血细胞分析仪会在WBC结果后面做出WL提示，WBC直方图上Ghost区和SCR之间的鉴别线与直方图交点抬高，提示有大颗粒存在。对此类患者采用草酸铵法血小板计数。
5例血涂片瑞氏染色后发现“血小板卫星现象”。“血小板卫星现象”是偶见于EDTA-K2抗凝血中，血小板黏附、围绕于中性粒细胞(或偶尔黏附于单核细胞)的现象，系EDTA和白细胞表面的IgG或Fc片段相互作用、非特异性结合血小板表面的GP?b/?s所致，虽与疾病和药物无关，这些黏附、围绕于中性粒细胞的血小板被误计为白细胞，造成血小板假性减少[5]，由于“血小板卫星现象”造成血小板减少，可造成仪器对白细胞分类不确切，应采取草酸铵法血小板计数纠正，有文献报道用枸橼酸盐抗凝可消除此现象。
7例血涂片瑞氏染色后发现血小板体积偏大。这类患者多见于肿瘤、白血病、肝病。一般血细胞分析仪计数血小板阈值在2,30 fl，因此血小板体积大于30 fl时，超过仪器计数血小板阈值，不被纳入血小板计数范围，被误认为是小红细胞，因此是血小板计数结果偏低[6，7]，对此库尔特HMX血细胞分析仪WBC散点图DF1、DF2图像下方血小板区细胞分布密度向右延伸[4]，MPV值增高，PLT直方图底部分布较宽，提示有血小板凝集的存在;希森美康KX-21血细胞分析仪RBC结果后面出现RL、MPV值增高，PLT直方图底部分布较宽，鉴别线与直方图的交点抬高。此时应采用草酸胺法血小板计数纠正其结果。
综上所述，根据全国血液学复检专家小组制定的复检标准，对于仪器计数患者血小板偏低时，仪器有报警提示、散点图及直方图异常，应及时推片镜检及采取草酸胺法血小板计数纠正其结果，避免假性血小板减少现象发生，以提高检验结果的准确性。
[参考文献]
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[6]熊立凡,刘成玉.临床检验基础[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2007.69.
[7]赵红燕.血细胞分析仪测定血小板计数结果的分析[J].上海医学检验杂志,1998,13(2):127.
(收稿日期:2008-04-24)
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