小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量测定

小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量测定 第23卷 Vd.23 第2期 No.2 微?元素与健康研究 StudiesofTrneeElemeatsandHealtll 2006年3月 Mar.2OO6 总之,食品安全需要消费者,食品生产者,公共 卫生人员和政府的共同努力,建立"从农田到餐桌" 的全过程管理模式,才能有效地预防控制食品的重 金属污染,保证人类的食品安全和身体健康. 参考文献: [1]扬惠芬.邹宗_富,全传玉.等.六省市食品中镉含量的调 壹[J].中华预防医学杂志,1994,28(1):6—8. [2]GB/T5009—2003.食品卫生检验方法理化部分[S].中 国标准出版社.1997. [3]郑云雁.CAC第24次大会通过的污染物标准[J].中国 食品卫生杂志,2001,13(6):72. [4]昊永宁.现代食品安全科学[M].jE京:化学工业出版 社.2003.191. 【5]陆屹.2003年上海市部分食品中铅镉污染情况 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 [J].上海预防医学,2004.16(10):486—487. [6]李慧,黄薇,黄海雄.等.深圳市2004年部分食品中 镉污染情况分析[J].现代预防医学,2005,32(6):609. [7]王竹天.王茂起,韩宏伟,等.2002年我国水产食品中镉 含量监测及分析[J].卫生研究,2004,33(4)473. 小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量测定 傅丽君 (莆田学院环境与生命科学系,福建莆田351100) 摘要:通过高效液相色谱(HPLc)对感染球孢白僵茵后小菜蛾血淋巴游离氨基酸含 量进行测定.姑果表明小 菜蛾幼虫血淋巴中含有l7种游离氨基酸,其中蛋氨酸,苏氨酸,赖氨酸,精氨酸,苯丙 氨酸,亮氨酸,异亮氨酸 的总浓度较高,为主要氨基陵.小幕蛾幼虫体内具有虫生真菌苗株营养生长所必需 的氨基酸. 关键词:小菜蛾;血淋巴;游离氨基酸;虫生真菌 中圈分类号:$433.4文献标识码:A文章编号:1005—5320(2006)02—0028—02 DeterminationofFreeAminoAcidsintheHemolymphofPlutellaxylostella FULj—jm (EnvironmentandL毋ScienceDepartmentofPutianUniversity,Putian351100,China) Al~tract:ThecontentsoffreeaminoacidsinhemolymphofPlutellaxylostelkiweredetermin edbyHPLC(HighPerformanceLiquid Chromatograph).Theresults&resumrmarizedasfollows:thereare17freeaminoacidsi nthehemolymphofPlutdhxylostellaandwith highcontentsofMet,Thr.Lys,Arg,Phe,Ile.Therearenecessaryaminoacidsforthefungi'sgro wthinthedmmondbackmoth's bodl~. KeyWords:Plutellaxy[osteIlaL.;hemolymph;freeaminoacids;entomogenousfungi 小菜蛾(Plutellaxylostella)是世界性的十字花 科蔬菜重要害虫,每年的防治费用估计达到1亿美 元uJ.长期以来单靠化学药剂的防治方法使得小 菜蛾对几乎所有的杀虫剂都产生了抗药性.如今甚 至对微生物杀虫剂Bt也产生了抗性.为了达到控 制小菜蛾的目的,人们增加了农药的使用量和使用 次数,农药在蔬菜上残留量的增加.带来了严重的环 收稿日期:2005—11—03 作者简介:博丽君(1975一),女,博士,讲师.主要从事生物化学 方向研究. ? 28? 境污染,并引发了一系列的生态和社会问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 .于是, 发展利用虫生真菌与化学农药,天敌昆虫,病原微生 物等相结合的多种方法对小菜蛾实行综合治理就具 有重要的意义. 昆虫血淋巴中含有大量的游离氨基酸,其含量 常为脊椎动物血液中的50倍左右.昆虫与脊椎动 物具有相同的"必需"氨基酸,外加精氨酸[t,这些 氨基酸除作为合成蛋白质物质外,还可能有一些特 殊功能,如渗透压的调节,废物的解毒,特殊条件下 的能量来源及参与形态变异和生殖过程.已有报道 表明,昆虫被病原菌或寄生昆虫等寄生后,产生的取 第23卷 Vd.23 第2期 No.2 微?元素与健康研究 StudiesofTraceElementsandHealth 2006年3月 Mar.20o6 食,生长发育,生理生化等变化会朝着有益于寄生物 的方向进行,即"寄主制御"反应[4-7].因此有必要 对小菜蛾血淋巴中游离氨基酸含量的变化进行研 究,为利用虫生真菌对小菜蛾进行综合治理提供理 论依据. 材料与方法 1材料和仪器 材料:供试小菜蛾(Plutellaxylostella)采自福州 郊区菜地,经室内多代繁殖所得的健康3龄幼虫. 仪器:美国Beckman338型高效液相色谱仪 (HPLC),ll0B泵,ODS柱(4.6mm×25cm),冷冻 浓缩离心机. 2方法 2.1取样将3龄小菜蛾幼虫用蒸馏水洗净,滤纸 吸干后用消毒的干净剪刀剪破腹足,用美国Robbins Scientific公司"微量针式分液器"吸取定量血淋巴于 离心管中,血淋巴液加30倍体积的3%磺基水扬酸 溶液,4?16000g×10min离心,保留上清液. 2.2样品的衍生和测定取一定量的血淋巴上清 液.加入异硫氰酸苯(PTTC)衍生剂,离心真空干燥 后溶于50mmol/L醋酸钠溶液中,过0.45u滤膜后 一 20?低温保存备用.并于1周内经高效液相色谱 (HPLC)上机分析. 结果与讨论 小菜蛾感染球孢白僵菌后血淋巴中各种游离氨 基酸含量的测定结果见表1. 寰1小菜蛾感染白僵蕾后体内血淋巴游离氨基酸 含量变化裹(mg/100m1) 氨基酸名称古量氨基酸名称古量 天门冬氨酸Asp4.52酪氨酸Tyr1.92 谷氨酸Glu21.49蛋氨酸Met52.93 丝氨酸Set81.50缬氨酸Val4.49 甘氨酸Gly11.95半胱氨酸Cys7.58 组氨酸His12.33异亮氨酸Iso24.93 苏氨酸Thr45.12亮氨酸Leu83.13 丙氨酸Ah16.10苯丙氨酸Pbe65.25 精氨酸Arg77.18赖氨酸Lys52.02 脯氨酸Pro4.40氨基酸总量566.84 昆虫体内游离氨基酸的种类和比例随着昆虫种 的不同而有差异,同一个体随着食物,发育时期和生 理状态而不同[J.由表1可知,用HPLC可检测 出小菜蛾幼虫血淋巴中含有17种游离氨基酸,其中 蛋氨酸,苏氨酸,赖氨酸,精氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸, 异亮氨酸的总浓度较高.为主要氨基酸. 病原对各种昆虫毒力的高低,取决于昆虫体液 成分能否满足该菌株对营养的需求,一般所谓敏感 昆虫,就是其体液成分能符合菌株对营养的需求,否 则毒力弱[101.小菜蛾体液中含有丰富的营养成分, 其中所含的游离氨基酸就达17种之多,基本能满足 病原菌对赖氨酸,组氨酸,亮氨酸等的需求,较适合 病原菌的生长发育,使得利用虫生真菌防治小菜蛾 具有一定的可行性.但由于病原菌致病具有缓效与 持久性(会造成流行病)的特点,短期内是不能达到 控制小菜蛾大发生的目的,为了更有效地对小菜蛾 实行综合治理,最好与生物农药,天敌昆虫,化学药 剂等配合使用. 参考文献: [1]Talekar,N.S.,A.M.SheltonBiology,ecology,and management0fdiamondbackmoth.Annu.Rev. Entoraology【J].1993,38:275—301. [2]Florkin,M.Thefreeaminoacidsofinsenthaemolymph [A].InBiochemistryofinsects.Pergamonpress,London [C].1959,63—77. [3]H.H.里斯.昆虫生物化学[M].北京:科学出版社, 1980.27. [4]Vinson,S.B.&G.F.1wantsch.Hostregulationby parasitioids[J],Quart.Rev.Bio1.1980.55:143—65. [5]杭三宝,陆自强.二化螟幼虫被二化螟绒茧蜂寄生后血 淋巴的生理生化变化[J].昆虫,1991,34(4):427— 432. 【6]扬跃雄.氨基酸和微量元素在虫草茵感染虫草蝠蛾幼虫 中的影响[J].动物学研究.1990.11(36):237—242. [7]是振延.菜青虫感染苏云茼杆茼HD一1血淋巴的生理 变化[J].昆虫知识,1988,25(3):149—151. 【8]Wigglesworth,V.B.Theprinciplesofinsectphysiology [M].London.1974,457. [9]Levenbook,I.&M.L.DinamarcaFreeaminoacidsand relatedcompoundsduringlarvalgrowthmetamorphosisof theblowfly.Phormiaregina[J].InsectPhysio1.1966,12: 134362. [1O]蒲蛰龙.昆虫病理学[M].广州:广东科技出版社, 1994.538. ? 29?