蟾酥注射液对马立克氏病预防作用的研究

蟾酥注射液对马立克氏病预防作用的研究 中国摩学亟报 . : ? 蟾酥注射液对马立克氏病预防作用的研究 李敬双,于 洋 辽宁医学院,辽宁锦州 摘 要:为了研究蟾酥注射液的抗病毒以及抗病毒引发肿瘤的作用,采用鸡马立克氏病动物模型来 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 蟾酥注射液对马立克氏病的预防效果。蟾酥注射液能减轻马立克氏病的临床症状和病理变化,降低致 病率和死亡率,延长生存率,提高保护率和增重率。应用 .方法估计蟾酥注射液试 验组的平均生存时间为 . . 天,病毒对照组的平均生存时间为 ..天;应用’ 检验分析组间生存率,蟾酥注射液试验组与病毒对照组差异显著尸 .;应用时序检验 ? 法分析组间增重率,蟾酥注射液试验组与病毒对照组差异极显著 . 。研究结果显 示,蟾酥注射液能提高机体的免疫力,具有抗病毒和抗肿瘤的功能,对马立克氏病有较好的预防作用。 关键词:蟾酥注射液;鸡;马立克病毒;预防;效果 中图分类号: . 文献标志码: 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 编号: ’, ,:?? , . ,, . ?? . ? .. . . ’ . .. . ,?.: ;;; ; 引言 题。由于破坏法式囊、胸腺和脾脏等免疫器官, 马立克氏病是最常见的一种鸡淋巴组织增 所以可引起严重的免疫抑制,受害鸡群对球虫病、新城 生性传染病,自 世纪 年代广泛使用火鸡疱疹病毒 疫等疾病易感,并且影响各种疫苗的免疫效果。研发 疫苗以来, 的损失已大大下降,但疫苗免疫 出高效、低毒和特异的抗药物是养殖业发展的 失败屡有发生。近年来,世界各地相继发现毒力极强 迫切需要。 的马立克氏病毒 ,给 的防治带来了新的问 蟾酥注射液是一种常用的抗肿瘤和免疫增强药 基金项目:辽宁省教育厅科学技术研究项目“中药蟾酥抗鸡马立克氏病肿瘤机制的研究”。 第一作者简介:李敬双,女,年出生,辽宁锦卅人,副教授,研究方向为动物疾病发病机制及防控。通信地址:辽宁省锦州市古塔区人民街 五段 号 宁医学院畜牧兽医学院 , : , : . 。 收稿日期: ? ,修回日期:? ? 。中圄农孝通报: . . . 生物公司。 物,有些学者的研究结果表明,蟾酥注射液通过增强机 体免疫功能而具有抗肿瘤和免疫增强作用 。还有研 . . 药品 蟾酥注射液由广西北斗星动物保健品有限 究结果表明:蟾酥注射液的抗肿瘤作用机制是蟾酥注 公司生产,批号: , / 。 射液能激活巨噬细胞和杀伤细胞的活性以及诱导干扰 . . 鸡胚成纤维细胞 实验室 17025实验室iso17025实验室认可实验室检查项目微生物实验室标识重点实验室计划 制备,取 ~ 日 素和白细胞介素一 的产生,提高机体自身免疫功能,减 龄的鸡胚,剪去头、爪、翅和内脏,置烧杯 少瘤细胞的有丝分裂和淋巴器官中诱发的早期 内,剪成大小的碎块,加入 ~ 倍量的胰蛋白 溶细胞感染,降低活化 细胞及转化为肿瘤细胞,阻止 酶液,置水浴中消化 ~ 。弃胰酶,加入细 肿瘤的发生 】。刘俊珊等 蟾酥及其活性成分抗肿 胞生长液置 ?、 % :培养箱中培养,待长成单层 瘤作用的研究进展,研究表明,蟾酥具有确切的抗肿瘤 后备用。 活性,能够诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、 . . 制备病毒 取病毒液 . 加入生长至 %~ 促进肿瘤细胞的分化,还有逆转耐药性、抑制肿瘤血管%单层的细胞瓶内,放 于 ?、 % :培养箱 形成及增强免疫的作用。姜峰等 对蟾酥不同溶剂萃 中观察,当细胞发生典型病变 病变细胞呈圆形,大小、 取物对小鼠免疫细胞功能的影响方面进行研究,表明 形状规则,折光性增强,呈葡萄状排列或散在后,弃上 蟾酥不同溶剂萃取物在体外可促进脾淋巴细胞和腹腔 清液,刮取细胞,分装于离心管,冻融 次,释放病 巨噬细胞的免疫功能;于洋等 对蟾酥从增强机体非 毒,.保存备用。 特异性免疫方面进行研究,研究结果表明蟾酥注射液 . 试验方法 在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原 . . 雏鸡分组和处理 购入 日龄雏鸡只进行饲 或 作用能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的 养, 天后确认无疾病进行称重,随机分成 组 见表 增殖能力,蟾酥注射液单独作用可以显著提高巨噬细。 组 日龄时,每天按表 标准注射蟾酥注射液 胞吞噬中性红的能力,蟾酥注射液能够显著提高小鼠 或生理盐水,连用 天,常规饲养。正常雏鸡对照组单细胞对靶细胞的杀伤活性,能显著增强小鼠脾淋 独饲养在安全地方,严格消毒,防止感染马立克病毒。 巴细胞分泌型细胞因子。程相朝 ,王福传 等 . . 感染途径和剂量 在各试验组 日龄时, 的研究结果表明,中药免疫增强剂不但可促进外周血 用培养得到的强度攻击,每只腹腔注射 液淋巴细胞总数的增值,而且能明显提高辅 剂量的马立克氏病毒 . 。正常对照组 助型 淋巴细胞的数量,较好地增强火鸡疱疹病毒苗 腹腔注射 . 生理盐水。 对鸡马立克氏病的免疫效果。但是蟾酥注射液 . . 接毒后观察 每天 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 雏鸡 的发病和死亡情 在抗病毒以及病毒引发的肿瘤方向上的研究,在世界 况。观察临床症状和病理剖检变化,记录 的发病 上还是空白。 数和死亡数,统计致病率、生存率和死亡率。观察为了进一步开发蟾酥注射 液的兽用价值,研究蟾 天之后对全部活鸡称重、宰杀,然后剖检。统计各器官 酥注射液对雏鸡马立克氏病的预防作用是十分重要 肿瘤的阳性率。 的。笔者通过研究蟾酥注射液的抗马立克氏病肿瘤的 . . 数据统计与分析 应用 。方 作用,也为蟾酥将来可能成为有效的兽用免疫调节剂 法估计各组试验鸡的平均生存时间;应用’ 及免疫佐剂奠定基础。 检验分析组间生存率的差异;应用时序检验 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与 方法. 法分析蟾酥注射液试验组与对照组相对 . 试验时间、地点 增重率的差异。 试验于 年在辽宁医学院实验动物中心进行。 . 试验材料 致病率塾嚣 ×。% . . 病毒型强毒购自中国兽药监察所。 保护率 竖 塑 堋 。% . . 试验动物 日龄白来航雏鸡,由北京梅里 马立克氏病阳性判定标准:死亡鸡只各器官、组织 亚维通实验技术有限公司提供。 中,只要有肿瘤病变,即为阳性。 . . 试剂 细胞培养基: 公司产品;胎 相对增重率:根据开始时及试验结束每只鸡的体 牛血清:购自杭州四季青生物制品公司; 谷氨酰胺: 重,计算每只鸡的增重量,然后计算每组试验鸡的平均 分装;胰蛋白酶: 分装;青霉素和链霉素: 均为 分装;制霉菌素和 :均购自大连 增重和标准差。相对增重率是按各用药组与正常对照李敬双等:蟾酥注射液对马立克氏病预防作用的研究 . . 组的平均增重之比计算,其中正常对照组设定为 鸡的发病时问和死亡时间,减轻感染雏鸡的临 %。 床症状。 . 病理变化 通过 攻毒株致病率、死亡率、生存率、保护率和 相对增重率进行评价蟾酥注射液对 的预防效果。 病毒对照组:死亡鸡只出现典型的肿瘤结节。在 结果与分析 心、肝、脾、肺、肾、胰腺、肠壁、肌胃、腺胃和肠系膜等器 . 临床症状 官出现大小不一的肿瘤结节或肿块,呈灰白色,质地坚 正常对照组:试验结束, 只鸡全部生长正常,没 硬而致密。有时肿瘤组织在受害器官中呈弥漫性增 有发病,说明正常对照试验组成立。 生,整个器官变得很大,肿瘤组织色泽灰 白,与原有组 病毒对照组:攻毒后 天出现临床症状,病鸡精 织的色彩相间存在,呈大理石样斑纹。有的睾丸急剧 神委顿,食欲降低,被毛松乱,肉冠和肉髯苍白,有的出 增大,有的法氏囊萎缩,有的坐骨神经肿胀、增粗,呈黄 现下痢,渐进消瘦。有的步态不稳,逐渐不能行走,在 白色或灰白色,横纹消失,呈水肿样外观。 蟾酥注射液试验组:死亡鸡只器官肿瘤较少,肝脏 疾病后期,出现典型的“劈叉”现象。攻毒后 天有 只鸡死亡,雏鸡的发病和死亡时间集中,主要在攻毒后 肿大,肺脏、肠管出血,肾脏肿胀有出血点,机体变得消 天。 瘦。 通过病毒对照组与蟾酥注射液试验组死亡鸡只病 蟾酥注射液 组:雏鸡的发病和死亡时间迟于病 毒对照组,攻毒后 天出现临床症状,第 例死亡时间 理变化比较,说明蟾酥注射液可以减轻感染雏 鸡的病理变化。 为攻毒后 天,发病和死亡时间不集中,呈散发和零 星状态。致病率、死亡率、生存率、保护率和相对增重率 蟾酥注射液 组:攻毒后 天出现临床症状,蟾酥 . . 致病率和死亡率 在整个试验过程中,只要是表 注射液 组第 例死亡时间为攻毒后 天,零星发 现出感染了症状的鸡,均认为是发病鸡。各组 雏鸡攻毒后不同时间的死亡数见表 。病毒对照组的 病。临床症状比病毒对照组轻微但比蟾酥注射液 组 重。 致病率为 %/,死亡率达 % /,蟾酥注 蟾酥注射液 组:攻毒后 天出现临床症状,蟾酥 射液 个试验组的平均致病率为 %/ ,死亡率 注射液 组第 例死亡时间为攻毒后 天,零星发 仅为 % /。可见,各组雏鸡攻毒后病毒对照 病。临床症状比病毒对照组轻微但比蟾酥注射液 组 组致病率和死亡率都高于正常对照组和蟾酥注射液试 重。 验组;各组雏鸡攻毒后死亡时间也不一致,病毒对照组 死亡时间比蟾酥注射液试验组早,蟾酥注射液 个试 说明蟾酥注射液可以明显推迟人工感染雏 表 各组雏鸡攻毒后不同时间的死亡数 只 攻毒后天数鋈料 中国农学通报://. . . 加 ? ? ? ? 加验组比较,蟾酥注射液浓度越高死亡时间越晚。 组低于正常对照组,蟾酥注射液 个试验组生存率比. 生存率 各组雏鸡攻毒后不同时间的生存率见表 较,蟾酥注射液浓度越高生存率越高。 。蟾酥注射液 个试验组的生存率均高于病毒对照 . 统计检验 组低于正常对照组,蟾酥注射液 个试验组生存率比 . . 组间生存率的差异 正常对照组与蟾酥注射液试 较,蟾酥注射液浓度越高生存率越高。 验的 个组差异不显著 .,病毒对照组与蟾酥 . 保护率和相对增重率 各组雏鸡保护率和相对增 注射液试验的 个组差异显著 .,蟾酥注射液 重率见表 。蟾酥注射液 个试验组保护率比较,蟾酥 试验的 个组之间的生存率差异不显著 .。 注射液浓度越高保护率就越高。蟾酥注射液 个试验 说明蟾酥注射液可明显降低 的发病率和死亡率。 组相对增重率高于病毒对照组,蟾酥注射液 个试验 . . 平均生存时间 病毒对照组的平均生存时间为 . .天;蟾酥注射液 组的平均生存时间为 组相对增重率比较,蟾酥注射液浓度越高相对增重率 就越高。 . .天;蟾酥注射液 组的平均生存时间为 . . 累积生存曲线 各组雏鸡的累积生存曲线见图..天;蟾酥注射液 组的平均生存时间为 。蟾酥注射液 个试验组的生存率均高于病毒对照. .天。蟾酥注射液 个组的平均生存时间 为 . 士 . 天。可见,蟾酥注射液试验的 个组的 生存时间基本接近,而且长,病毒对照组的生存时间最 短。 . . 组间增重率的差异 蟾酥注射液试验的 个组与 病毒对照组在增重率上差异极显著 .,蟾酥注 射液试验的 个组与正常对照组在增重率上差异不显 著.。 讨论 试验结果显示,蟾酥注射液不但能推迟人工感 染鸡的发病时间,而且还能降低人工感染鸡的致病率 和死亡率,能显著提高生存率。从临床症状看,蟾酥注 射液试验组的临床症状都比病毒对照组轻,呈散发和 攻毒后天数, 零星状态。从剖检变化来看,蟾酥注射液试验组的病 图 各组雏鸡生存曲线 变程度轻于病毒对照组,肿瘤的检出率低于病毒对照