中美英三国药典标准比色液的对比与测定

·实验与研究· 作者简介: 庞青云, 女, 副主任药师。学科及研究方向: 药物分析。联系电话: 010- 66124449。 中美英三国药典标准比色液的对比与测定 庞青云　田洪昭　寇晋萍　陆　岩　王丽荣　余　立(北京市药品检验所　北京 100035) 摘要　目的: 对中美英三国药典标准比色液的配制方法及不同测定方法所得的颜色参数进行对比, 为进口药品检验和进口药 品质量标准复核时颜色质量标准的制订提供参考。方法: 采用《中国药典》2005 版附录收载的目视比较法、紫外分光光度法、色 差计法进行测定。结果: 中英药典标准比色液之间有相似之处, 但与美国药典标准比色液差别较大。 关键词: 标准比色液; 中国药典; 美国药典; 英国药典 中图分类号: 92112　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 100923656 (2007) 2424324 Com par ison and D eterm ina tion of Reference Solution s from ChP, USP and BP Pang Q ing2yun, T ian Hong2zhao , Kou J in2p ing,L u Yan,W ang L i2rong, Yu L i(B ej ing Institu te f or D rug Con trol, B ei2 j ing 100035) Abstract　Objective: T he p reparat ions of the reference so lu tions and the param eters from differen t determ ination m ethods of Co lo r of So lu tion in ChP,U SP and BP w ere compared, to p rovide reference fo r estab lish ing standards in inspecting the impo rt2 ed drugs and in re2inspecting impo rted drug standards. M ethods: T he Comparison m ethod by naked eyes, UV Spectropho2 tom etry and Co lourim etry m ethods in ChP 2005 w ere used. Results: T he reference so lu tions betw een ChP and BP w ere sim i2 lar, bu t betw een ChP and U SP w ere differen t. Key words: R eference So lu tions; ChP; U SP; BP 　　药品颜色作为药品质量控制的一项重要检查项 目收载于各国药典。检验方法是将被检药品制成规 定浓度的溶液, 与相应的标准比色液进行比较以判 断药品颜色的深浅及合格与否。由于各国药典配制 标准比色液的方法各不相同, 给进口药品检验颜色 带来一定的困难。本文通过三国药典标准比色液的 对比, 为进口药品检验和进口药品质量标准复核时 颜色标准的制订提供一定的参考。目前尚无该方面 的文献报道。 一、仪器与试药 TU 1901 紫外分光光度计, 北京普析通用仪器有 限责任公司;W B 280 型色差计, 北京康光仪器有限公 司; 氯化钴、硫酸铜、高锰酸钾、盐酸均为分析纯。 二、配制方法 11 中国药典标准比色液 111　比色用溶液 11111　比色用重铬酸钾液: 用水制备每1m l 中 含01800m g 的K2C r2O 7 的溶液 (标定方法略)。 11112　比色用硫酸铜液: 用盐酸溶液 (1→40) 制备每 1m l 中含 6214m g 的CuSO 4·5H 2O 的溶液(标定方法略)。11113　比色用氯化钴液: 用盐酸溶液 (1→40)制备每1m l 中含5915m g 的CoC l2·6H 2O 的溶液 (标定方法略)。112　各种色调标准贮备液: 照表1 进行配制。表 1　各种色调标准贮备液的配制表色调 比色用氯化钴液öm l 比色用重铬酸钾液öm l 比色用硫酸铜液öm l 水öm l黄绿色 (YG) 112 2218 712 6818黄色 (Y) 410 2313 0 7217橙黄色 (O Y) 1016 1910 410 6614橙红色 (OR ) 1210 2010 0 6810棕红色 (BR ) 2216 1215 2010 4510　　113　各种色调色号标准比色液: 照表2 进行配制。表 2　各种色调色号标准比色液的配制表色号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10贮备液öm l 015 110 115 210 215 310 415 610 715 1010水öm l 915 910 815 810 715 710 515 410 215 0 34D rug Standards of Ch ina 2007, vo l. 8 N o. 4 中国药品标准2007 年第8 卷第4 期　 (总283) 　　21 美国药典标准比色液 211　比色用溶液 21111　比色用氯化钴溶液: 用 25m l 盐酸和 975m l 水的混合液配制每1m l 中含5915m g 的CoC l2 ·6H 2O 的溶液。 标定方法: 取510m l 上述溶液, 置250m l 锥形瓶 中, 加过氧化氢试液 5m l, 加氢氧化钠溶液 (1→5) 15m l。煮沸10 分钟, 放冷, 加碘化钾 2g 和稀硫酸 (1 →4) 20m l, 待固体溶解后, 以 3m l 淀粉试液为指示 剂, 用 011mo löL 硫代硫酸钠滴定液滴定至终点, 必 要时进行空白校正。每1m l 的011mo löL 硫代硫酸钠 相当于23179m g 的CoC l2·6H 2O。 21112　比色用硫酸铜溶液: 用 25m l 盐酸和 975m l 水的混合液配制每1m l 中含6214m g 的CuSO 4 ·5H 2O 的溶液。 标定方法: 取 1010m l 上述溶液, 置 250m l 锥形 瓶中, 依次加水40m l、醋酸4m l、碘化钾3g、盐酸5m l。 以3m l 淀粉试液为指示剂, 用011mo löL 硫代硫酸钠 滴定液滴定至终点, 必要时进行空白校正。每1m l 的 011mo löL 硫代硫酸钠相当于 6214m g 的CuSO 4· 5H 2O。 21113　比色用氯化铁溶液: 用 25m l 盐酸和 975m l 水的混合液配制每1m l 中含4510m g 的FeC l3 ·6H 2O 的溶液。 标定方法: 取 1010m l 上述溶液, 置 250m l 锥形 瓶中, 依次加入水15m l、碘化钾3g、盐酸5m l, 放置15 分钟, 再加水 100m l 稀释。以 3m l 淀粉试液为指示 剂, 用 011mo löL 硫代硫酸钠滴定液滴定至终点, 必 要时进行空白校正。每1m l 的011mo löL 硫代硫酸钠 相当于27103m g 的FeC l3·6H 2O。 212　各种色调标准比色液: 照表 3 比例进行配 制。 31 英国药典标准比色液 311　比色用溶液 31111　比色用黄色溶液: 用25m l 盐酸和975m l 水的混合液配制每1m l 中含4510m g 的FeC l3·6H 2O 的溶液。 标定方法: 取 1010m l 上述溶液, 置 250m l 锥形 瓶中, 依次加入水15m l、盐酸5m l 和碘化钾4g, 密封, 暗处放置15 分钟, 再加100m l 水稀释。用011mo löL 硫代硫酸钠滴定至终点, 指示剂为 015m l 淀粉试液 溶液。每 1m 1 的 011mo löL 硫代硫酸钠相当于 27103m g 的FeC l3·6H 2O。 31112　比色用红色溶液: 用25m l 盐酸和975m l 水的混合液配制每 1m l 中含 5915m g 的 CoC l2 · 6H 2O 的溶液。 标定方法: 取510m l 上述溶液, 置250m l 锥形瓶 中, 加稀过氧化氢试液5m l, 加300göl 氢氧化钠溶液 10m l。缓慢煮沸10 分钟, 放冷, 加稀硫酸60m l 和碘 化钾2g, 密封, 振摇使固体溶解。以015m l 淀粉试液 为指示剂, 用011mo löL 硫代硫酸钠滴定液滴定至溶 液变为粉红色为至。每1m l 的011mo löL 硫代硫酸钠 相当于23179m g 的CoC l2·6H 2O。 表 3　美国药典各种色调标准比色液配制表 色调 比色用氯 化钴溶液 比色用氯 化铁溶液 比色用硫 酸铜溶液 水 A 011 014 011 414 B 013 019 013 315 C 011 016 011 412 D 013 016 014 317 E 014 112 013 311 F 013 112 010 315 G 015 112 012 311 H 012 115 010 313 I 014 212 011 213 J 014 315 011 110 K 015 415 010 010 L 018 318 011 013 M 011 210 011 218 N 010 419 011 010 O 011 418 011 010 P 012 014 011 413 Q 012 013 011 414 R 013 014 012 411 S 012 011 010 417 T 015 015 014 316 　　31113　比色用蓝色溶液: 用25m l 盐酸和975m l 水的混合液配制每 1m l 中含 6214m g 的 CuSO 4· 5H 2O 的溶液。 标定方法: 取 1010m l 上述溶液, 置 250m l 锥形 瓶中, 依次加水 50m l、醋酸 12m l 和碘化钾 3g。以 015m l 淀粉试液为指示剂, 用011mo löL 硫代硫酸钠 滴定液滴定至溶液显微淡粉色为至。每 1m 1 的 011mo löL 硫代硫酸钠相当于 24197m g 的CuSO 4· 5H 2O。 312　各种色调标准贮备液: 照表4 进行配制。 表 4　各种色调标准贮备液的配制表 色调 比色用黄色 液öm l 比色用红色液öm l 比色用蓝色溶液öm l 盐酸 (10gölHC l) öm l 棕色 (B) 310 310 214 116 棕黄色 (BY) 214 110 014 612 黄色 (Y) 214 016 010 710 绿黄色 (GY) 916 012 012 010 红色 (R ) 110 210 010 710 44 中国药品标准2007 年第8 卷第4 期　 (总284) D rug Standards of Ch ina 2007, vo l. 8 N o. 4 　　313　各种色调色号标准比色液: 照表 528 进行 配制。 表 5　棕色 (B )各种色号标准比色液的配制表 色号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 贮备液öm l 7510 5010 3715 2510 1215 510 215 115 110 盐酸(10göl HCl) öm l 2510 5010 6215 7510 8715 9510 9715 9815 9910 表6　棕黄色 (BY)和黄色 (Y)各种色号标准比色液的配制表 色号 1 2 3 4 5 6 7 贮备液öm l 10010 7510 5010 2510 1215 510 215 盐酸 (10göl HCl) öm l 010 2510 5010 7510 8715 9510 9715 表 7　绿黄色 (GY)各种色号标准比色液的配制表 色号 1 2 3 4 5 6 7 贮备液öm l 2510 1510 815 510 310 115 0175 盐酸 (10göl HCl) öm l 7510 8510 9115 9510 9710 9815 99125 表 8　红色 (R )各种色号标准比色液的配制表 色号 1 2 3 4 5 6 7 贮备液öm l 10010 7510 5010 3715 2510 1215 510 盐酸 (10göl HCl) öm l 010 2510 5010 6215 7510 8715 9510 三、测定方法与结果 11 目视比较法 中国药典标准比色液分5 个色调各10 个色号共 50 个标准比色液。美国药典比色液共A 至T 20 个 色级, 色调各有差异, 且不按深浅序列, 与中国药 典标准比色液相当的色号见表 9。英国药典比色 液序列与中国药典类似, 分 5 个色调, 各 7～ 9 个 色级。其中R 与B 系列与中国药典色系不接近, 无 法比较颜色差异, 而 Y、GY、BY 系列分别与中国 药典Y、YG、O Y 系列颜色接近, 二者之间相当的色 号见表10。 表 9　中美药典标准比色液目视相当的色号 U SP23 A C E F G H ChP2005 O Y3 Y4—5 O Y8 O Y8 O Y9 Y8—9 表 10　中英药典标准比色液目视相当的色号 BP93 Y7、Y6 Y5 Y4 Y3 Y2 Y1 ChP2005 < Y1 Y2 Y2—3 Y5—6 Y6—7 Y9—10 BP93 GY7、GY6 GY5 GY4 GY3 GY2 GY1 ChP2005 < YG1 YG1 YG3 YG4 YG5 YG6—7 BP93 BY7、BY6 BY5 BY4 BY3 BY2 BY1 ChP2005 < O Y1 O Y2 O Y3 O Y6 O Y7 O Y8—9 　　21 紫外分光光度法 　　中国药典 5 个色调系列标准比色液在 350± 3nm 的波长处均有最大吸收峰, 且各个色调的10 个 色号溶液的吸收度值与贮备液的取用量成线性相关 (r 均> 019990, 详细数据略)。美国药典标准比色液 除S 号外均无最大吸收峰。英国药典标准比色液除 Y7、Y6、GY7、GY6、B 9、B 8、B 7、B 6、BY7、BY6、R 7、 R 6 在 333±2nm 有最大吸收峰外, 其余各色号均无 最大吸收峰。因为中国药典中紫外分光法测定药品 颜色的质量标准大多制订在 430nm 处, 因此, 我们 对美国药典和英国药典标准比色液在 430nm 处的 吸收值进行了测定, 结果见表11。 31 色差计法 照《中国药典》2005 年版二部附录Ì A 2溶液颜 色检查法第三法对三国药典标准比色液进行测定: 以水为空白, 取色品坐标L 3 a3 b3 、色调角H 及色 差∃E3 3 为参数比较各标准比色液的颜色, 测定结 果见表12214 (因篇幅所限, 仅列出色差值)。相同的 色调角表示两个颜色的色调相同, 但仅有彩度 (或色 差)完全相同时, 两个颜色才完全一样。因此, 从色差 计测定结果比较, 三国药典比色液之间无完全相同 的颜色。 表 11　美英药典标准比色液 430nm 波长处的吸收值 色号 B9 B8 B7 B6 B5 B4 B3 B2 B1 吸收度 0 0 0 0 01040 01116 01211 01321 01587 色号 BY7 BY6 BY5 BY4 BY3 BY2 BY1 吸收度 0 0 01030 01082 01223 01401 01592 色号 R 7 R 6 R 5 R 4 R 3 R 2 R 1 吸收度 0 0 01027 01060 01097 01183 01280 色号 GY7 GY6 GY5 GY4 GY3 GY2 GY1 吸收度 0 01007 01029 01059 01132 01269 01537 色号 Y7 Y6 Y5 Y4 Y3 Y2 Y1 吸收度 0 01011 01040 01095 01231 01401 01616 色号 A B C D E F G H I 吸收度 01082 01289 01151 01157 01503 01533 01555 01724 11447 色号 J K L M N O P Q R 吸收度 31038 41703 31253 11021 > 6 > 6 01096 01063 01099 色号 S T 吸收度 01025 01149 表 12　色差计测定中国药典标准比色液的结果 色号 Y1 Y2 Y3 Y4 Y5 Y6 Y7 Y8 Y9 Y10∃E3 1162 3119 4168 6124 7181 9129 13175 17199 22118 28175 色号 YG1 YG2 YG3 YG4 YG5 YG6 YG7 YG8 YG9 YG10∃E3 1158 3104 4154 6103 7149 8199 13125 17135 21145 27160 色号 BR 1 BR 2 BR 3 BR 4 BR 5 BR 6 BR 7 BR8 BR 9 BR 10∃E3 1139 2146 3167 4169 5198 7109 10144 13161 16173 21151 色号 OR 1 OR 2 OR 3 OR 4 OR 5 OR 6 OR 7 OR 8 OR 9 OR 10∃E3 1159 3106 4139 5189 7122 8168 11138 16183 20171 76197 色号 O Y1 O Y2 O Y3 O Y4 O Y5 O Y6 O Y7 O Y8 O Y9 O Y10∃E3 1147 2177 4102 5139 6159 7194 11161 15138 18184 28183 54D rug Standards of Ch ina 2007, vo l. 8 N o. 4 中国药品标准2007 年第8 卷第4 期　 (总285) 表 13　色差计测定美国药典标准比色液的结果 色号 A B C D E F G H I J∃E3 5112 12177 7194 7191 18142 19176 20153 24102 36125 54174 色号 K L M N O P Q R S T∃E3 67175 59162 31104 69199 68191 6122 5108 7113 4165 10112 表 14　色差计测定英国药典标准比色液的结果 色号 Y7 Y6 Y5 Y4 Y3 Y2 Y1∃E3 0157 1115 2167 5152 11133 17140 23105 色号 GY7 GY6 GY5 GY4 GY3 GY2 GY1∃E3 0167 1134 2161 4140 7178 13110 20153 色号 BY7 BY6 BY5 BY4 BY3 BY2 BY1∃E3 0164 1114 2171 5144 11130 17108 22198 色号 R 7 R 6 R 5 R 4 R 3 R 2 R 1∃E3 1118 2197 5169 8155 11129 16197 22129 色号 B9 B8 B7 B6 B5 B4 B3 B2 B1∃E3 0151 0164 0199 1174 4120 8117 12142 16157 25127 四、讨论在进口药品质量复核时, 如采用目视法制订药品颜色的标准, 可采用上述目视测定结果进行标准间的转化, 或参考上述紫外分光光度法测定结果制订药品颜色在 430nm 处的限度值; 亦可采用色差计法, 对药品颜色进行综合测定, 仅以色差值 (表示颜色的深浅)为指标制订药品颜色的标准, 从而解决不同标准间色调不一致或不同生产厂家同一药品颜色的偏色调问题。参考文献[ 1 ] 中国药典. 二部. 2005: 附录59261[ 2 ] 美国药典. 29 版. 265122652, 289622898[ 3 ] 英国药典. 2005,V o l4: 附录A 1942A 196[ 4 ] 王承芬, 庞青云, 李慧芬等. 仪器法测量药品颜色. 药物分析杂志, 1995, 15 (4) 61264 作者简介: 周怡, 女, 药师ö理学士。学科及研究方向: 药物分析。联系电话: 010- 671544882202。 中国药典与欧洲药典关于“溶液颜色检查法”的比较与分析 周　怡 (中国协和医科大学医药生物技术研究所3 、国家药典委员会 北京 100061) 摘要　比较分析中国药典和欧洲药典溶液颜色检查方法, 阐明进行颜色检查的必要性和发展趋势。 关键词: 溶液颜色检查; 中国药典; 欧洲药典 中图分类号: 92112　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 100923656 (2007) 2424625 Com par ison of Test of Colour of Solution between ChP 2005 and EP510 Zhou Y i(P ek ing U n ion M ed ica l Colleg e, Ch inese P harm acop oeia Comm ission , B eij ing 00061) Abstract　Objective: To compare and analyze the test of Co lour of So lu tion betw een ChP 2005 and EP510, and elucidate the sign ificance and the fu tu re of the test of Co lour of So lu tion. Key words: T est of Co lour of So lu tion; ChP2005; EP510 　　随着全球经济一体化进程的不断发展, 我国药 品进出口总量保持着持续较快增长的趋势。在药品 进出口贸易中对药品质量最为重视, 多数国家法律 规定, 进口药品进入该国市场不仅要符合出口国的 质量标准要求同时也要符合进口国药品质量标准的 各项规定, 以保正药品质量, 维护人民生命安全。然 而各国药品质量检查方法均不同程度的存在差异, 这为药品的进出口检验增加了困难, 也造成了不必 要的障碍以及经济损失。因此, 在保证药品质量的前 提下, 对各国药品质量的检查方法进行协调统一是 十分必要的。 溶液颜色检查法是控制药品质量、保障用药安 全的检查方法之一, 是将药物溶液的颜色与规定的 标准比色液相比较, 或在规定的波长处测定其吸光 度, 以检查其颜色的方法。现除欧洲药典与英国药典 中方法一致外, 其他药典方法间均存在差异, 这必然 为药品质量的判定设置了障碍, 比如度米芬, 中国药 典 2005 年版质量标准溶液颜色项要求“如显色, 与 黄色 1 号标准比色液比较, 不得更深”, 英国药典 2004 版要求“如显色, 应小于Y7 号标准比色液”, 两 国药典检查判定方法不同, 使检验人员不得不进行 两次检查以满足不同标准的判定, 这既浪费了人力、 64 中国药品标准2007 年第8 卷第4 期　 (总286) D rug Standards of Ch ina 2007, vo l. 8 N o. 4