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ÄKTA常见问题解决
方案
气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载
系统（System）
Q：样品与缓冲液怎么脱气和过滤？
A：溶液和样品必须过滤（0.2um 或者 0.45um的膜过滤）和脱气，可以使用负压抽滤
瓶过滤（如右图），并且在负压条件下保持 10min 脱气。脱气的方法还包括：超声 15min
以上或者使用注射用水配制缓冲液。对于小体积样品的过滤，可以使用高速离心的方式，
吸取上清。
Q：系统怎么保存？
A：使用完毕，须用水将系统冲洗干净（关机前，电导检测数值<0.1ms/cm），之后用
20%乙醇清洗系并保存所有的流路。
Q：系统的清洗？
A：按时清洗系统或遇到问题时清洗系统。用 1M NaOH ，小流速清洗系统 30min，之后立即用中性的缓冲液（例
如 PBS）和去离子水将 NaOH 冲洗干净并且系统 pH保持在中性。
系统泵（Pump）
Q：系统中进了气泡，怎么排除？
A：排除气泡的方式有两种：system control→Manual→Pump→PumppurifierA/B，
进行泵洗，高流速将气泡排出（流速和冲洗的时间系统默认）；或者将空注射
器放置在泵头黑色接头处（如右图），拧开泵头，抽出气泡后，拧紧泵头即可。
Q：泵后润洗系统，如果进入气泡怎么处理？润洗液不循环，怎么处理？
A：润洗系统只是起润滑作用，有小气泡不会影响缓冲液的系统或者进入柱子；
如果有大段气泡影响润滑时，则将润洗瓶中有接头处接空注射器，将气泡抽出即可。
如果润洗液不循环，说明单向阀堵塞或损坏，可以使用超声清洗或更换。
紫外监测器(UV Monitor)
Q：如果紫外检测曲线有噪音或者波动，怎么处理？
A：可以使用注射器推甲醇或 1M NaOH注入紫外流动池，停留 20 分钟，用水
冲洗；或者用注射器推 10%的表面活性剂（如 Decon90，Deconex11，DBS25，
SDS等）注入紫外流动池，停留 20 分钟，用水冲洗。
Q：怎么查看检测器的使用时间？
A：三波长检测器灯的使用时间：面板菜单-Check-press OK-Check Lamp Run Time（如果>4000h，
需要更换紫外灯）；光栅转动时间：面板菜单-Check-press OK-Check Flip Time （如果>2000h，需要维护）；紫
外灯的能量：面板菜单-Check-press OK-Check Lamp Intensity （如果灯的能量<20%，需要更换内部光纤）
固定波长检测器灯使用寿命：（AKTApurifier UPC/FPLC）：灯的使用时间：面板菜单-Check-press
OK-Check Lamp Run Time，如果达到以下使用时间，需要更换相应灯——汞灯在 254 nm 的
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寿命，室温一般为 7000h（冷室 2000h)；汞灯在 280 nm的寿命，室温一般为 3500h；锌灯
的寿命，室温一般为 2000h；面板菜单-Check-press OK-Check Lamp Intensity. 如果灯能量
小于以下数值，需要更换相应灯——R <300 mV for 254 nm ；R <150 mV for 280 nm；R
<150 mV for 214 nm。
pH 计（pH electrode）
Q：使用前，怎么进行 pH校正？
A：使用前校正 pH计，将 pH 计探头放在校正液中（实验室常用的 6.86、4.01 或者 9.18），在 system control→System
→Calibrate→pH中进行两点校正。
Q：pH的保护液成分是什么？
A：保护液：1:1 pH 4 buffer 和 2M KNO3，或 pH4.0 的饱和 KCl溶液）。
Q：怎么清洗 pH 流通池和电极？
A：清洗流动池：拆下 pH电极，用 1M NaOH 清洗 pH 和电导流动池 30 分钟，用 水
冲洗。清洗 pH电极（响应慢或校正斜率小于 80%时）：
1. 盐沉积：0.1M HCl/ 0.1M NaOH/ 0.1M HCl 交替洗数次，间隔 5分钟。
2 . 油脂沉积：1%SDS清洗后水洗。
3. 蛋白沉积：1% 蛋白酶于 0.1M HCl 溶液中清洗后水洗。
在线滤器（On-line filter）
Q：在线滤膜的材质？怎么进行清洗？
A：滤膜孔径 1um ，滤膜安装时没有正反。FPLC 和 100的系统滤膜是多聚物材质, 是一
个耗材，清洗后反复使用 5~10 次左右； 10 的系统/micro 是金属材质滤膜，可以 反
复使用。清洗滤膜的方法：使用 1M NaOH浸泡 15min，去离子水超声 15min，即
可反复使用。
收集器
Q：怎么测量和设定从 UV检测池到收集器的延迟体积？（AKTAprime和 avant 是默认值）
A：延迟体积（delay volume) 测定：从 UV检测器到收集器的体积。使用空注射器将 UV
检测池以后的管路排空，设置 1mL/min，当看到收集器有连续液滴时，Pause，在 logbook
中读取体积，在 System Control-setting-special-Frac delay volume 设定。
浙公网安备 33021202002483