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BDPharmingen产品专 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 基因公司市场部田丽平Lynn_tlp@genecompany.com主要内容BDPharmingen简单介绍BDPharmingen产品分类BDPharmingen特色技术BDPharmingen简介BD公司成立于1897年,财富周刊500强公司的业务分为三大类:BD医疗系统BD生物科学系统BD临床实验室系统产品丰富,足迹遍及世界六大洲BDPharmingen简介BDBiosciencensBDImmunocytometrySystems(IS)BDPharmingenwww.bdbioscience.com/pharmingen/BDDiscoveryLabwareBDClontech分子生物学、细胞生物学、免疫学、流式細胞分析技术等领域为生命科学的基础研究和临床应用,提供全方位強有力的支援和协助。BDPharmingen简介BDPharmingen是华人在美国最成功的生物公司涉及领域:免疫学,细胞生物学,分子生物学流式抗体和基于流式平台开发的产品种类日益丰富,拥有全球领先科技和多项专利,与高速发展的研究前沿保持一致免疫学问题产生哪些BRM,以及由何种类型的细胞产生?这些细胞的数目和产生频率?体外分析抗原特异性Tcells?对一个样品同时分析多种BRM(multiplexing)?BDPharmingen产品特色PMG高品质的流式产品在BD和BeckmanCoulter的流式细胞仪上都能得到完美的检测结果。Pharmingen优势在于免疫学领域,不仅是流式。直标型抗体,FITC,PE,APC等特异性灵敏性好抗体涉及多个物种,常规抗体齐全。抗体效价很高。许多产品具有独家的专利产权。BDPharmingen常见抗体ICC:免疫细胞化学(甩片)IHC:免疫组织化学IHC(F)*:免疫组织化学-甲醛固定样品(需抗原修复)IHC(Fr):免疫组织化学-冰冻切片IHC(P):免疫组织化学-石蜡切片IHC(Zn):免疫组织化学-锌固定IC/FCM:胞内染色(流式细胞分析)Ictrl:同型对照BDPharmingen流式抗体标记缩写中文名标记em(nm)FITC异硫氰酸荧光素直标530PE藻红蛋白直标575APC别藻蓝蛋白直标660PerCP多甲藻素-叶绿素直标679PerCP-Cy5.5多甲藻素-叶绿素-花青甙5.5直标694Biotin生物素间标,需加avidin/streptavidin标记的二抗Purified未标记,间接法检测,需加荧光标记的二抗BDPharmingen产品分类BDDimerXTCR不能自动与Ag结合,Ag必须被摄取、加工,与MHC结合为复合物由APC(DC、B细胞、巨噬细胞)呈递给T细胞。MHCClassI将Ag(胞内)呈递给CD8+T细胞产生细胞毒性免疫反应MHCClassII将Ag(胞外)呈递给CD4+Tcells引起细胞因子分泌和Ig的产生BDDimerXMHCClassI病毒、肿瘤细胞等胞内基因编码的Ag经加工后的肽段或者胞内寄生细菌产生的Ag经加工后的肽段8~10aa的Ag肽段在ER中与MHCI分子结合MHCI/肽复合物由Golgi转运到细胞表面,Ag被呈递给CD8+T细胞MHCClassII胞外蛋白经过加工后的抗原肽段,比MHCI分子结合的肽段长且结构复杂MHCII/肽复合物被呈递给CD4+T细胞DimerX结构b2微球蛋白使MHCI分子具有结合肽段的功能重组融合蛋白表达于真核细胞系(鼠浆细胞瘤细胞系J558L),具有更好的构象完整性,更容易加载肽段,结构高度稳定。BDOptEIA特色:F(ab’)检测抗体、专用Buffer和稀释体系包装:Kit、Set和PairBDIMAG磁分离系统抗原-抗体反应磁场原理BDIMAG磁分离 流程 快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计 1向细胞悬液中加入抗体标记的磁珠2磁珠通过特异性抗体与带有相应抗原的细胞结合3置于磁场中,与磁珠连接的细胞被磁场吸附4吸去上清,带有抗原的细胞留在试管里,其他细胞在吸出的上清中正选法:去除上清,将试管移出磁场,分析被磁珠捕获的细胞,即为目的细胞负选法:分析上清,目的细胞在上清液中BDIMAG磁分离产品BDIMag:直接标记磁珠/间接标记磁珠磁珠包被了针对白细胞亚群表面特异性标志的单抗磁珠包被了链霉亲和素(streptavidin)在实验系统中加入biotin标记的单抗,磁珠通过streptavidin与biotin标记的单抗结合,单抗与细胞表面相应抗原特异性结合而使细胞被磁珠间接捕获,从而达到分离。这种磁珠使研究者可根据自己需要选择生物素标记的各种单抗去分离目的细胞,应用范围更广泛,使用更灵活。BDELISPOTELISPOT(酶连免疫斑点):体外检测单个细胞分泌某特定蛋白的水平和确定产生该特定蛋白的细胞频率的工具。BDELISPOT单细胞水平检测分泌到的胞外细胞因子动态观察活细胞应答而非检测培养上清、血清、血浆、裂解液(静态)结果以斑点显示,能计数效应细胞,分析效应分子产生频率能检测产生细胞因子频率极低的细胞,灵敏度高达1/300,000捕获抗体为BDPharmingen高亲和力、无叠氮钠、低内毒素抗体,不会引起非特异性细胞激活。ELISA与ELISPOT比较ELISPOT--细胞产生效应分子一分泌出细胞,被包被在板上的抗体直接捕获,灵敏度更高ELISA--细胞产生的效应分子分泌到上清后被稀释,或者被其高亲和力的受体吸收而不被抗体检测到或被蛋白水解酶降解而灵敏度较低ELISA--只能检测到分泌的效应分子总量,而不知效应细胞有多少ELISPOT--能计数效应细胞,得到单个细胞分泌效应分子的相对量;细胞活化后产生效应分子的变化BDCBABDCytometricBeadArray简称BDCBA,是利用一系列荧光强度不同的微球,同时分析样本中多种成分的流式检测方法。BDCBA携带有荧光的微球包被有特异性捕获抗体,与待测样本孵育后,形成“三明治”复合物。微球在流式细胞仪的FL3通道检测,定性目的蛋白,PE标记的检测抗体在FL2通道来对目的蛋白定量。液相ELISA流式检测BDCBA技术原理CaptureBeadCaptureAbBead++AnalyteofinterestFluorescentdetectionAbCBA检测原理123不同强度红色荧光的捕获微球,在FCMFL3检测不同的目标蛋白PE标记的检测抗体,在FCMFL2检测。荧光强度即为靶蛋白量456BDCBA特点液相中反应,实时检测细胞因子的表达操作简单(无需包被),省时(3h)同时同步检测多指标微量样本(5-50ul)特异性和灵敏度2-7pg/ml,(20-100pg/ml)避免由于信号放大的假阳性更好的线性度和更宽的检测范围流式细胞仪和CBA软件自动分析CBA与ELISA比较ELISA抗原检测的经典方法单项检测每项实验样本用量50-200L需要抗原包被实验时间大于24h酶-底物背景干扰BDCBA多参数检测样本用量少-50L操作方便,节省时间流式细胞仪自动检测标准曲线自动生成,专用软件自动计算结果无酶-底物背景干扰提高检测效率BDCBA应用眼泪等来源珍贵的微量样本(5-10ul),血清、血浆或培养液上清细胞凋亡等信号传导通道蛋白肿瘤研究,疾病诊断、预后判断、病程检测多参数同时分析SLE,新生儿脓血症等免疫疾病的监控药物研发,疫苗研究总体免疫功能分析免疫性疾病:自身免疫病、过敏等炎症反应,白血病、淋巴瘤、癌症等BDCBAFlexSet-NewFlexSet微球带有近红外和红色两种荧光,分别在流式细胞仪的FL3(近红外荧光)和FL4(红色荧光)通道检测,通过这个二维矩阵(对应于微球上的特定序号)识别捕获微球,从而定性目的蛋白,PE标记的检测抗体在FL2通道来对目的蛋白定量。CBAKit与CBAFlexSet比较CBAKit同时检测5或者6个捕获微球、标准品、检测抗体、缓冲液和稀释液等全部试剂灵敏度0.3pg/ml检测范围0-5000pg/mlCBAAnalysisSoftware和FCAPArraySoftwareKit中包括全部试剂CBAFlexSet1-72个捕获微球、标准品、检测抗体灵敏度0.3pg/ml检测范围0-5000pg/mlFCAPArraySoftware需另购相应的BufferkitCBAKit和CBAFlexSet产品磷酸化蛋白类人细胞因子类大鼠细胞因子类小鼠细胞因子类谢谢大家!
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