2021年常用pH缓冲液配置方法及注意项目

常见pH缓冲溶液配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1氯化钾-盐酸13.0ml0.2mol/LHCl和25.0ml0.2mol/LKCl混合均匀后，加水稀释至100ml1.72氨基乙酸-盐酸在500ml水中溶解氨基乙酸150g，加480ml浓盐酸，再加水稀释至1L2.33一氯乙酸-氢氧化钠在200ml水中溶解2g一氯乙酸后，加40gNaOH，溶解完全后再加水稀释至1L2.84邻苯二甲酸氢钾-盐酸把25.0ml0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液和6.0ml0.1mol/LHCl混合均匀，加水稀释至100ml3.65邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液和17.5ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml4.86六亚甲基四胺-盐酸在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g，加浓HCl10ml，再加水稀释至1L5.47磷酸二氢钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L磷酸二氢钾和23.6ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml6.88硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L硼酸-氯化钾和4.0ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml8.09氯化铵-氨水把0.1mol/L氯化铵和0.1mol/L氨水以2：1百分比混合均匀9.110硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L硼酸-氯化钾和43.9ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml10.011氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把49.0ml0.1mol/L氨基乙酸-氯化钠和51.0ml0.1mol/LNaOH混合均匀11.612磷酸氢二钠-氢氧化钠把50.0ml0.05mol/LNa2HPO4和26.9ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml12.013氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/LKCl和66.0ml0.2mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml13.0一、常见溶液配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有很好质量试剂分为优级纯（确保试剂，Guaranteedreagent，G．R．）、 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 试剂（Antalyticalreagent，A．R．）化学纯（Chemicalpure，C．P．）和试验试剂（Laboratoryreagent，L．R．）等等。工业用化学试剂，杂质较多，只在部分情况下应用，如配洗液用硫酸、配干燥剂氯化钙等。2．药品称量要正确。3．配制试剂用水应用新鲜去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制通常化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。４．配好后溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1000ml）。2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或Na2HPO4·2H2O11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1000ml）。3．按附表百分比，配制成不一样pH值缓冲溶液。附表1磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0（三）0.15Mol/LPB液附表20.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/LNa2HPO4（ml）0.15Mol/LNaH2PO4（ml）6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.050.15Mol/L溶液含26.7g/L。Na2HPO4·12H2O分子量=358.220.15Mol/L溶液含53.7g/L。NaH2PO4·H2O分子量=138.000.15Mol/L溶液含20.7g/L。NaH2PO4·2H2O分子量=156.030.15Mol/L溶液含23.4g/L。（四）0.2Mol/LPB缓冲液附表30.2mol/LPB缓冲液配制法pH0.2Mol/LNa2HPO4（ml）0.2Mol/LNaH2PO4（ml）5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/LNa2HPO4·2H2O溶液35.61g/LNa2HPO4·12H2O溶液含71.64g/L0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/LNaH2PO4·2H2O溶液含31.21g/L欲配0.1Mol/LPB缓冲液则在0.2Mol/LPB缓冲液基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加0.85％NaCl溶液即可。（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/LPH7.2）NaCl8.0gKCl0.2gNa2HPO41.15g（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）KH2PO40.2g将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂和洗涤细胞培养物。（六）硼酸盐缓冲液（Boratesalinebuffer）1．硼酸（Ｈ3BO3）0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g加水至1000ml。2．硼砂（Na2B4O7）0.05Mol/L硼砂：硼砂19.07g加水至1000ml。附表4不一样pH0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法pH0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）pH0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0（七）巴比妥缓冲液1．pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥钠47.6g蒸馏水3000ml1.17NHCl55.0ml（1.17NHCl=193ml浓HCl加1807ml蒸馏水）⑴将4.76g巴比妥钠溶于3000ml蒸馏水。⑵加1.17NHCl55ml。⑶用HCl调整pH到8.2，并加蒸馏水至4265ml。2．pH8.40.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥1.84g巴比妥钠10.30g加蒸馏水至1000.00ml3．pH8.60.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥1.66g巴比妥钠12.76g加蒸馏水1000.00ml（八）0.2Mol/L醋酸盐缓冲液见表附表5附表50.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）pH0.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）23℃37℃23℃37℃9.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5（九）三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液（Tris—HCl缓冲液）不一样pH，0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加хml0.1NHCl，加水稀释至100ml（见下表）附表6Tris—HCl缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)23℃37℃23℃37℃9.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羟甲基氨基甲烷（Tris）分子量=121.140.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1000ml。0.1NHCl：取HCl8.6ml，加水至1000ml。（十）0.5Mol/LpH9.5碳酸盐缓冲液NaHCO33.70gNa2CO30.60g溶于600.00ml蒸馏水中即得。不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。（十一）甘油磷酸缓冲液1．配制pH8.0磷酸缓冲液0.1Mol/LNa2HPO494.50ml0.1NNaH2PO45.50ml混合即可2．9份甘油和1份pH8.0磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。用途：用于免疫荧光试验。（十二）Hank’s液1．贮存液NaCl80.00gKCl4.00gNa2HPO4·12H2O1.52gKH2PO40.60g葡萄糖4.00g0.4％酚红液50.00ml双馏水加至100.00ml115℃高压灭菌15min，冰冻保留。2．工作液贮存液1份双馏水9份115℃高压灭菌15min。临用时用灭菌5.6％NaHCO3液调pH值至7.2左右（溶液呈橙红色）。（十三）萘（钠）氏试剂（Nessler’sreagent）配方1：氯化汞6.0g碘化钾12.4g20％NaOH30ml加蒸馏水至100ml配方2：碘化汞11.5g碘化钾8g蒸馏水50ml（完全溶解后）过滤，加20％NaOH50ml。用途：检测溶液中氨离子。（十四）阿氏（Alsever’s）液葡萄糖2.05g柠檬酸钠0.80g氯化钠0.42g蒸馏水100ml溶解后，以10%柠檬酸调整pH至6.1，过滤，分装，10磅10min灭菌，4℃保留。（十五）青、链霉素混合液（简称S．P．液或双抗液）青霉素（40万U）5支链霉素（200万μg）1支分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保留备用（1万单位μg/ml）。临用时，按1%量加入营养液或其它溶液中，最终浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。（十六）洗液（清洁液）配方1：重铬酸钾150g蒸馏水300ml浓硫酸3000ml将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发烧过剧则稍停，冷却后再继续加。此为强洗液。盛清洁液容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这么洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。配方2：浓硫酸50%蒸馏水50%重铬酸钾5%此为中等强度洗液。配方3：重铬酸钾100g蒸馏水1000ml加热溶解，冷却后缓慢加入工业硫酸100ml此液为弱洗液，为棕红色。使用此液时，必需预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，不然该洗液很快失效。