浅谈Warthin–Starry银染法的应用*Background W-S法首先在1920年由Warthin和Starry作为显示螺旋体的一种特殊染色方法提出,其原理是一种嗜银反应。 W-S法除可显示螺旋体外还可显示放线菌、猫抓病球杆菌、尘埃颗粒、胃幽门螺杆菌、黑色素颗粒、真菌、球菌及神经纤维等。WarthinAS,ChronisterAC(1920)."Amorerapidandimprovedmethodofdemonstratingspirochetesintissues(WarthinandStarry’scover-glassmethod)".AmericanJournalofSyphilis4:97–103.*Introduction TheWarthin–Starrystain(WS)isasilvernitrate-basedstainingmethod(asilverstain)usedinhistology. Itwasfirstintroducedin1920byAmericanpathologistsAldredScottWarthin(1866-1931)andAllenChronisterStarry(1890-1973),forthedetectionofspirochetes. Ithasbeenconsideredthebeststainfordetectionofspirochetes,andisalsousedtostainHelicobacterpylori,Lawsoniaintracellularis,Microsporidia,andparticulates.*W–S法在Hp感染诊断中的应用Fig1A.Helicobacterpyloricolonizedonthesurfaceofregenerativeepithelium,stainedwiththeWarthin-Starrymethod;Fig1B.Clustersofbacteria(arrow)shownonWarthin–Starrystain.1A*Warthin–Starry银染法的应用*传统的Warthin-starry染色法 传统的Warthin-starry染色法是用1g硝酸银加100ml酸化水配制成1%硝酸银染液。该方法显色时间长,染色效果差,幽门螺杆菌检出率低,且呈现灰色,不易被病理医师所辨识,易出现假阴性的结果。另一方面,如果加热时控制不好,温度过高,会导致切片中标本呈现干枯状,染色出现非特异的结果。*改良Warthin-starry染色法 因胃镜活检标本病理诊断的需要,北京大学第三医院消化科病理室自1988年以来，以Warthin-Starry银染法为基础加以改进，开展Hp银盐染色技术。该法改进后的20余年,制片数十万张,至今组织仍着色牢固稳定。韩亚京.幽门螺杆菌银盐染色方法改进[J].北京医科大学学报,1998,05:86.*不同之处 使用此改进法和Warthin-Starry方法的不同之处主要为试剂配制简便组织着色牢固稳定,成本低廉。两方法不同之处为: 试剂配制简化,仅为双蒸水。而W-S法为醋酸盐缓冲液,其改良法为柠檬酸盐缓冲液； 所用玻璃器皿、载物片等预先行化学洁净处理,活性银还原范围局限,切片银污染程度较小,观察对比清晰； 本法可使用立式玻璃染缸成批集中染色(每缸8～11张),提高制片效率。***-*k*优点 经改进后的改良Warthin-starry染色法显色时间明显缩短,染色效果易于控制,幽门螺杆菌呈现黑色,易于辨识,检出率明显提高。其次,通过银染法与改良染色法结果的比较可以看出,两种染色方法对于幽门螺杆菌的检出率是相同的,而且改良Warthin-starry染色法诊断可靠,不会出现假阳性的染色结果。*应用价值 改良Warthin-starry染色法是一种较为经济实用的染色法,它有着试剂配制简便,诊断准确迅速等特点,在一般的实验室即可得到广泛的开展,在幽门螺杆菌的检测中具有独特的优势和很高的应用价值。*图2应用改良W-S法可见胃粘膜腺体陷窝内可见簇状或片状的幽门螺杆菌*超声波改良W-S染色法 南京军区南京总医院病理科孟奎，马恒辉，周晓军等提出一种更加快捷的Warthin-starry染色方法。 他们利用超声波高速振荡的原理,在70℃水浴加温下,促进银溶液中的离子加速运动,从而促使胃幽门螺杆菌快速有效地结合银离子,加速显色，结果可靠，快速方便。孟奎,马恒辉,周晓军等.一种快捷的Warthin-Starry染色方法[J].中华消化内镜杂志,2002,19(1):55.*图3应用改良W-S法可见胃粘膜粘液下可见簇状或片状的幽门螺杆菌*
总结
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W-S染色是一种较传统的特殊染色方法,尽管其染色时间较长,染色条件较严格,在某些应用领域也出现了替代手段,但作为一种能直观查见病原体的敏感且特异的检测方法,W-S染色在病理诊断中仍发挥着重要作用,其操作所需设备简单,便于各级医院开展使用。王雷明,于文娟,钟延丰.改良银染法在病理诊断中的应用[J].诊断病理学杂志,2012,03:231-232.*Conclusion W-S银染法是组织切片染色法中效果最好的一种，检出率较高，为侵入性取材方式下诊断Hp感染的“金
标准
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”。 但是传统方法操作较繁琐．技术要求高，且费时、价格昂贵，故临床应用率较低。 改良W-S法应用于Hp诊断，方法合理，价格低廉，诊断准确率高，适合在基层医疗单位病理室作为常规的检测方法。*Thankyou!***-*k*-*k*-*k*
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