2.2.3多底物酶促反应动力学一般的多底物酶促反应可
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示为：这里讨论：双底物双产物情况反应机制：关键问题：底物A、B哪个先和酶结合？任何一个都有可能先与酶结合（随机机制）A先与酶结合或B先与酶结合两底物同时与酶结合（可能性极小）随机机制（分支机制）EEBEAEABEPQEPEQE（不形成三元复合物）反应模型EAE＋A－A－P＋P＋B－BEQ－Q＋QEEG（EG：修饰过的酶）简单机制EEAEAB＋A－A＋B－BEPQ－Q＋QEPE－P＋P双底物酶促反应动力学反应机理：解之，得式中：2.3固定化酶促反应动力学2.3.1固定化酶促反应动力学基础2.3.1.1酶的固定化技术定义酶的固定化技术是将水溶性的酶分子通过一定的方式，如静电吸附，共价键等与载体如角叉菜胶、离子交换树脂等
材料
关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料
制成固相酶的技术。细胞的固定化技术:为省去从微生物（或动、植物）中提取酶的操作，确保酶的稳定性，采用直接固定化微生物细胞、动植物细胞、组织技术。物理吸附法载体结合法离子结合法共价结合法交联法格子型包埋法微胶囊2.3.1.2酶和细胞固定化方法交联法EOEEOOOE2.3.1.3固定化对酶性质的影响底物专一性的改变稳定性增强最适pH值和最适温度变化动力学参数的变化2.3.1.4影响固定化酶促反应的主要因素分子构象的改变位阻效应微扰效应分配效应（可用Kp定量描述）链接扩散效应（可定量描述）分配系数(Kp)链接分配系数：载体内外底物(或其他物质)浓度之比。Kp的测定：已知底物浓度(CS0)，体积(V0)的溶液中，放入不含底物的一定体积的载体，并保持适宜条件，当达到平衡时，测定载体外溶液的底物浓度(Cs)。2.3.2固定化酶促反应过程分析2.3.2.1外部扩散过程以表面固定化酶为例。CSCSS外扩散过程分析外扩散速率：达到平衡时，即酶促反应速率：N,rrmaxNmax0CSSCS(CSS，rout)NmaxN，rrmax0CSSCS(CSS，rout)Da准数:当时，过程为外扩散控制。当时，过程为反应控制。式中:表明C*为Da准数的函数，即(时,)表明为C*的函数，即可见，Da准数是决定效率因子和比浓度C*的唯一参数，因而是表征传质过程对反应速率影响的基本准数。Da准数越小，固定化酶表面浓度越接近于主体浓度CS，越接近于1。Da准数越大，固定化酶表面浓度越趋近于零，越小，越趋近于零。为提高固定化酶外扩散效率,应设法减小Da准数。减小Da准数的
措施
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：1、降低固定化酶颗粒的粒径，增大比表面积，但由于粒径减小会伴随压降增加，因此应用中综合考虑，确定合适的粒径。2、使固定化酶表面流体处于湍流状态以增大。2.3.2.2内部扩散过程具有大量内孔的球形固定化酶颗粒Rdrr内扩散效率因子稳定状态下，对底物进行物料衡算：流入量－流出量＝反应量整理,得两侧同除,得当反应符合米氏方程规律时，故,令,,,上式可转化为无因次形式，得边界条件:,,该微分方程无解析解，只能用数值法求解。西勒准数()的物理意义是表面反应速率与内扩散速率之比。对各类反应动力学与固定化酶的形状，普遍化的的定义式为:引入无因次参数，则无解析解，只有数值解。见教材33页图2-10内扩散效率因子in是和的函数。对in影响不大，影响in的主要参数是西勒准数。如果，则不随变化，近似等于1，也就是说没有内部传质阻力，若，则，反应为内扩散所限制。为提高固定化酶内扩散效率，应设法减小。减小的措施主要是适当降低固定化酶颗粒粒径。外扩散过程内扩散过程Da准数是决定外扩散效率的唯一参数。准数是决定内扩散效率的主要参数。Da准数定义：西勒准数定义：外扩散效率因子定义：内扩散效率因子定义：Da<<1，过程为反应控制；Da>>1，过程为外扩散控制<<0.3时，过程为反应控制；>>0.3时，过程为内扩散控制。作业P509，12，13
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