流式细胞术测定植物基因组大小流式细胞术(FlowCytometry,FCM)流式细胞术，即利用流式细胞计对处在快速直线流动状态中的单细胞活生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术，是20世纪70年代发展起来的一项技术，综合了激光技术、计算机技术、半导体技术、流体力学、细胞化学等各学科的知识，它是一种自动分析的技术。流式细胞仪(FlowCytometer)集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机技术、细胞荧光化学技术、流体力学为一体的一种新型高科技仪器。概念一流式细胞术的基本知识流式细胞术特点单细胞悬液或生物颗粒分析速度高多参数精度高当代最先进的细胞定量分析技术高灵敏度无害分析和分选国际两大流式细胞仪生产商：BD(BectonDickinson)公司：FACSCalibur、FACSAria、FACSVantageDiva等；BC(BeckmanCoulter)公司：EPICSXL/-MCL、CytomicsTMFC500系列等。目前流式细胞仪可分为两类：台式机和大型机特点：光路调节系统固定自动化程度高操作简便使用寿命长配备1-2根激光细胞分选速度慢，主要用于细胞分析临床型(BD,FACSCalibur台式机)大型机(BD,FACSAria科研型)特点：分辨率高选配多种波长和类型激光器可把感兴趣细胞分选到特定培养孔或板上（4路和24孔板）适用于高速分选和多色分析流式细胞仪检测范围细胞大小细胞粒度细胞
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关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
面面积核浆比例DNA含量与细胞周期RNA含量蛋白质含量细胞结构特异性抗原（细胞表面/胞浆/核）细胞内细胞因子细胞活性酶活性激素结合位点细胞受体细胞功能细胞信号转导/通路分析细胞间相互作用分子共定位与胞内分子转运细胞形态学荧光原位杂交基因表达分析细胞凋亡细胞周期分析白细胞亚群分析ImageStream成像流式细胞仪COPASTM生物分选系统流式细胞技术的最新突破分选微型模式生物COPAS在线虫分选方面的应用，就在Nature系列杂志上发表了7篇以上的文献模式动植物研究、大体积细胞研究及药物筛选等方面流式细胞仪的工作原理液流系统：流动室、液流驱动系统液流中心由单列匀速运动颗粒组成的液柱分选系统信号检测--散色光FSC(前角散射光)它反应细胞的相对大小和截面积的大小SSC(90度角散射光)代表细胞的颗粒度和精细结构的变化它反应细胞的物理特性,根据前侧向散射光，可以把不同类型的细胞群加以区分数据显示类型单参数直方图（Histogram）X轴：代表荧光信号或散射光信号的强度，用“通道数”表示，可以与光强度之间线性关系或对数关系Y轴：代表该通道内所出现具有相同光信号特征性细胞的频率二维等高图和密度图便于数据统计不同的细胞群可以用不同的颜色标记主要表达方式利用特殊的荧光染料(PI、EB、AO等)与细胞内DNA碱基结合，被荧光染料染色的细胞在激光照射下发射出荧光，荧光强度与DNA含量成正比。流式细胞仪通过测定细胞的荧光强度推算出细胞的DNA含量。二植物C值分析原理流式细胞仪计算测量DNA含量实际上是细胞周期的测量，由于细胞核G1期的DNA含量反应一个细胞的倍性，因此常用DNA含量来估计细胞倍性，包括DNA的绝对含量或相对含量。测量DNA的绝对含量时，须设一个已知DNA含量的标准样品作对照，来换算出DNA的绝对含量。样品2CDNA含量=[(样品G0/G1峰均值)/(标准G0/G1峰均值)]×标准2CDNA含量(pgDNA)测量DNA的相对含量时，须设一已知倍性的同类
材料
关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料
作照，换算出待测样品的DNA相对含量，进行倍性分析。02004006008001000sDNAcontentcount变异系数(CoefficientofVariation,CV)：通常以G0/G1峰的宽度来反映,该指标反映了仪器的分辨率或精确度。影响CV的因素主要包括两方面：仪器因素（如鞘液的流速、光路、机器调试等）和样本制备(如样品中碎片含量、细胞团块、细胞活性和细胞浓度等)及染色过程对标本的人为影响。优化DNA分析条件就是指最大程度地减少这两大因素带来的变异。DNA指数(DNAindex,DI)：DI指的是样本G0/G1峰的平均道数与正常二倍体G0/G1峰的平均道数之间的比值。DI为1意味着二倍体(2c)。倍体(Ploidy)：原指染色体数目，流式中用来描述总的DNA含量。二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。DI为1.9-2.1的细胞为四倍体(CV<5%)。除二倍体和四倍体，其他均称异倍体。DNA检测的常用术语DNA的倍体和DNA指数的关系DI=1.0±0.01二倍体DI=1.0±0.15近二倍体DI=2.0±0.1四倍体DI>2.10多倍体例：G2MG0G1s02004006008001000sDNAAnalysisDNAcontentNormalCellCyclecount02004006008001000PIFluorescenceDNAAnalysisAneuploidpeak2N4NLoureiroetal.,2007.Fig3复叶槭猕猴桃柠檬马鞭草柠檬柿子无花果植物组织细胞核悬准备荧光染色上机检测图像数据流式细胞术测C值主要流程统计、分析ModFit试管苗、幼叶、愈伤等Galbraith(Galbraithetal.,1983)LB01(Dolezˇeletal.,1989)OttoⅠⅡ(Otto,1992);DolezˇelandGo¨hde,1995)Tris.MgCl2(Pfosseretal.,1995)GPB,WPB(Loureiroetal.,2007)NucleiisolationbuffersPI,EB,AO;DAPI,HO33342，HO33258;7-AADandsoon.
浙公网安备 33021202002483