触酶试验原理：触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。⑵方法：取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3%H2O21滴，立即观察结果。⑶结果：若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。⑷应用：大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用此试验来鉴定。此外，金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。注意事项：①3%H2O2溶液要新鲜配制。②不宜用血琼脂平板上生长的菌落，因红细胞含有触酶，可致假阳性反应。③取对数生长期的细菌。氧化酶试验原理：氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。试剂：1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。方法：常用方法有三种；菌落法：直接滴加试剂于被检菌菌落上。滤纸法：取洁净滤纸一小块，沾取菌少许，然后加试剂。试剂纸片法：将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片，取菌涂于试剂纸上。结果：细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。为保证结果的准确性，分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。应用：主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。2.3耐酸性染色法（萎一倪二氏法）2.3.1石炭酸品红染色液碱性品红0.3g95%乙醇10mL5%酚水溶液90mL将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。2.3.23%盐酸一乙醇浓盐酸3mL95%乙醇97mL2.3.3复染液吕氏碱性美蓝染色液。美蓝0.3g；95%乙醇30mL；0.01%氢氧化钾溶液100mL；将美蓝溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。2.3.4染色法2.3.4.1将涂片在火焰上加热固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸气出现，但切不可使沸腾。染液如因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染液，水洗。2.3.4.2滴加盐酸一乙醇脱色，直至无红色脱落为止（所需时间视涂片厚薄而定，一般为1〜3min），水洗。2.3.4.3滴加吕氏碱性美蓝染色液，复染30s〜1min，水洗，待干，镜检。2.3.5结果：耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。抗酸染色一般步骤1）初染用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。2）脱色3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟；用水冲洗。3）复染用碱性美兰溶液复染1分钟，用水冲洗后用吸水纸吸干。苯酚、美蓝、盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺、双氧水
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