固定化脂肪酶研究进展

固定化脂肪酶研究进展书书书 !"!## 冯! 超，蒋丽娟，黎继烈!，郝聚喜（中南林业科技大学，湖南长沙 !"###!）摘$ 要：固定化脂肪酶由于其易与底物分离且可重复使用而备受关注。综述了常用的固定化方法，包括物理吸附法、共价交联法和包埋法，不同的固定化方法对酶的性质有不同的影响。关键词：固定化，脂肪酶，载体 "#$#%&’( )&*+&#$$ ,- .,)%$# ,//*0,.,1%2,*- !"#$ %&’(，)*+#$ ,-%./’0，,* )-% 1-2!，3+4 )/%5- （&’()*+, -./)0...

书书书 !"!## 冯! 超，蒋丽娟，黎继烈!，郝聚喜（中南林业科技大学，湖南长沙 !"###!）摘$ 要：固定化脂肪酶由于其易与底物分离且可重复使用而备受关注。综述了常用的固定化方法，包括物理吸附法、共价交联法和包埋法，不同的固定化方法对酶的性质有不同的影响。关键词：固定化，脂肪酶，载体 "#$#%&’( )&*+&#$$ ,- .,)%$# ,//*0,.,1%2,*- !"#$ %&’(，)*+#$ ,-%./’0，,* )-% 1-2!，3+4 )/%5- （&’()*+, -./)0 1(23’*42)5 .6 7.*’4)*5 +(8 9’:0(.,.;5，&0+(;40+ !"###!，&02(+） 30$2&%’2：!""#$%&%’() &%*+,( $(-+"( + .#/,*#/ $(-+0,( %/, (+,1 /# ,(*+2+/( +3) -+3 $( 2(0,()< 4.( -#""#3 %""#$%&%’+/%#3 "(/.#), 5(2( 6(3(2+&&1 %3/2#)0-() %3-&0)%36 *.1,%-+& +),#2*/%#3，-#7+&(3/ -2#,,% &%38%36 "(/.#) +3) (3/2+*"(3/ "(/.#)<9%::(2(3/ %""#$%&%’+/%#3 "(/.#), .+) )%::(2(3/ (::(-/, #3 /.( (3’1"(< 4#5 6*&7$：%""#$%&%’+/%#3；&%*+,(；-+22%(2 中图分类号：9-=#"<= > ?$ $ $ $ 文献标识码：@$ $ $ $ 文章编号："##=%#?#A（=#""）#=%#?B?%#! 收稿日期：=#"#%#=%=A$ !通讯联系人作者简介：冯超（"CDE %），女，硕士研究生，主要从事生物新能源的研究。基金项目：国家科技支撑计划（=##BF@G!"F#A）。 $ $ 脂肪酶（H2I+4’ J&?<"<" 表明，非极性树脂 OP@是最佳的固定化载体。结果表明，在给酶量为 "-)? ;?#?:9［77］等将脂肪酶用戊二醛交联到 .@A!& 微球上，得到的固定化酶的最适 -.几乎与游离酶相同（-.+’0），而固定化酶的最适温度比游离酶高 01，交联的酶在 +&1时更稳定。 B’C’D?=:<9=EAF?AD>:,?［7!］等将脂肪酶通过活化剂（高碘酸钠或碳二亚胺）固定到由纤维素、纤维素衍生物及纤维素复合材料（纤维素醋酸盐和纤维素酯）薄膜上，获得的最大酶活为 76’0!)EG $ H·)!。 IR? 2?QE［!7］等通过溶胶A凝胶的方法将脂肪酶固定到无机材料上来合成手性化合物，用乙烯基 !"#$$ 三乙氧基硅烷制得的溶胶!凝胶脂肪酶在水溶液中有高的水解活性。 "#$%&’(# )*+,-./［00］等通过将脂肪酶加入到含有有机!无机的溶胶!凝胶基质的前体溶液中固定到铁酸盐粉末上。固定脂肪酶和铁酸盐粉末的最佳前体溶液的组成是含有功能化的氨基和烷基的硅烷，有机的交联如戊二醛和聚乙烯醇并不会提高其活力和载体的机械强度。 1-&(# 23#+4［05］等将脂肪酶固定到先用联合固定剂（包括卵磷脂、胶质、聚乙烯、乙二醇、氯化镁）浸湿的以棕榈为基质的聚亚胺酯泡沫上，固定化酶的活力通过在己烷中的油酸或油醇的转酯反应测得。天然酶和固定化酶的最适温度均为 678，说明固定化并没有改变脂肪酶的一般性质，该固定化酶至少可以重复使用四次。李丽丽［06］等以米糠为原料，研究了米糠固定化脂肪酶的制备及生化性质。结果表明：米糠经过一定的处理后，不仅能获得米糠中油脂，且能保留米糠脂肪酶的活性，形成一种以米糠为天然载体的米糠固定化脂肪酶（ &99-$&(&:’; %&,’!$%#+ (&<#=’，>1?!@），且以石油醚在 5A8下去脂 A9&+ 得到的 >1?!@ 的活动度最高，约为 B7CD09@ E 4。该酶在催化油脂水解反应中，最适水解温度约为 678，最适 1?!@ 与油酸的质量比为 G7H，甲醇与油酸摩尔比 BIB，反应温度 678，反应时间 GJ；在上述条件下，产物油酸甲酯得率可达 66CKLH。且该酶在 678的环境中保存 67; 可维持 L7H以上的活性，在批次水解反应下重复使用 A 次之后，残余酶活力仍达 G0H。 !" 存在的问题与展望 !#$" 存在的问题很多固定化方法在单独使用的时候往往有其缺点所在，吸附法中由于酶与载体之间的作用力弱，改变温度、99-$&(&:#P&-+ #+; =P#$&(&PT =P*;&’= -S # (&<#=’ S%-9 PJ’%9-99-$&(&:#P&-+ -S @&<#=’ -+ [-(T （ "(T,&;T( N’PJ#,%T(#P’） ! 4%#SP’; [-(T’PJT(’+’ N&,%-$’#;［ M ］ C N#,%-9-(’,*(#% 1’=’#%,J，0776，B0（G）：B!DC ［B6］罗文，谭天伟，袁振宏，等 C多孔玻璃珠固定化脂肪酶及其催化合成生物柴油［M］C现代化工，077D（BB）：67!60C ［BA］刘秀伟，司芳，郭林，等 C酶固定化研究进展［M］C化工技术经济，0775，0B（6）：B0!BDC ［BG］杨本宏，蔡敬民，吴克，等 C海藻酸钠固定化根霉脂肪酶的制备及其性质［M］C催化学报，077A，0G（BB）：KDD!KLBC ［BD］王爱玲，杨江科，黄瑛，等 C海藻酸钠明胶协同固定化黑曲霉脂肪酶［M］C应用化工，077D，5G（6）：5BD!50BC ［BL］黄磊，程振民 C纳米!微米复合孔泡沫陶瓷固定化脂肪酶［M］C催化学报，077K，0K（B）：AD!G0C ［BK］曾淑华，杨江科，闫云君 C固定化脂肪酶性质及其应用研究［M］C生物加工过程，077D（B）：6A!6KC ［07］刘勇，吾满江·艾力，夏木西卡玛尔，等 C黑曲霉脂肪酶 ^ ^ ^ ^ （下转第 5DL 页） !"#$$ 以减少天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶的量，抑制 !"#$%引起的脂质过氧化，抑制水杨酸引起的脂质过氧化，表现出了很好的保肝效果。对于抗疲劳，红曲可以有效地延长运动时间，增强耐力，延迟疲劳的出现；延缓血液中葡萄糖的降低及血液中乳酸及尿素氮浓度的增加，减少运动造成的脂质过氧化。还有抗炎症，红曲对于炎症有很好的消除作用。对于其它方面的应用，还需更多人的研究，来开发红曲的应用潜力，让红曲更多更好地为人类服务。参考文献［&］邢旺兴，张梅，方琅，等 ’中药红曲的药理作用研究进展［(］’药学实践杂志，)**+，),（&）：&-.’ ［)］吴根福，吴雪昌 ’红曲菌产生的 #$$%自由基捕捉物质的筛选［(］’微生物学学报，)***，,*（,）：./,-.//’ ［.］赵保路 ’氧自由基和天然抗氧化剂［0］’北京：科学出版社，&///：/+’ ［,］1232 "4567，83932 8 :;<745，=7<>92 %5?7，@< 7A’ #5B@C9B5D 7D5E 7> 74 74<52F5E74< 2G <;@ B2AE 0247>D9> "437［ (］’HC@@ I7E5D7A J52A2?6 K 0@E5D54@，&///，)L（+）：///-&**,’ ［M］(94>@5 =75C7，N;537 0567?5，1232 "4567’#5B@C9B5D 7D5E 7> 74 74<52F5E74< GC2B <;@ B2AE，0247>D9> 7437：<;@ 54;5O5<524 B@D;745>B> 7?754>< A5P5E P@C2F5E7<524 74E ;@B@PC2<@54-B@E57<@E 2F5E7<524［(］’J52D;@B5D7A $;7CB7D2A2?6，)**)，+.：&*&/-&*)+’ ［+］(94- 5D;5 17B7>;5C2，Q9B5;5C2 Q;5C75>;5，=2C9 H9R7，@< 7A’ #5B@C9B5D 7D5E PC2<@D<@E 2F5E7<5S@ >>-54E9D@E D6<2<2F5D5<6 54 5>2A7<@E C7< ;@P7<2D6<@>［(］’N@AA J52A =2F5D2A，)**L，),：)L.-)/*’ ［T］郭新竹，宁正祥 ’天然酚类化合物及其保健作用［ (］’食品添加剂，)**)，.*：)L-)/’ ［L］19-%>59 =>@4?，(274-%R7 174?，%95- U54? N;74?，@< 7A’ "4<52F5E74< PC2P@C<5@> 2G B@<;742A5D @F GC2B B247>D7A 7EA76 ［(］’H22E N;@B5>59 =>@4?，19 - U54? U@@，@< 7A’ "4<52F5E74< PC2P@C<5@> 2G B@<;742A5D @F GC2B B247>D7A C5D@ ［(］’ QR5>> Q2D5@<6 2G H22E QD5@4D@ 74E =@D;42A26?，)**+，./： T,*-T,T’ ［&*］19 - U54? U@@，(274 - %R7 174?，(@4? - U@94 079’ "4<52F5E74< PC2P@C<5@> 2G R7<@C @F GC2B 0247>D9> G@CB@4<@E >26O@74>［(］’H22E N;@B5>; W9B7C，@< 7A’ 8>2A7<524 74E D;7C7D<@C5X7<524 2G E5;6EC2B247D2A54 - 0Y GC2B 0247>D9> P9CP9C@9> G2C 74<52F5E74< PC2CP@C<5@>［ (］’ "PPA 05DC2O52A Z Z Z Z Z J52<@D;42A，)**T，T.：&&/T-&)*)’ ［&.］林杰，黄宏南，林国斌，等 ’功能性红曲功效成分的含量测定［(］’中国卫生检验杂志，)**T，&T（+）：/T)-/T,’ ［&,］1-% $62，=-N U@@’=;@ P2<@4<57A 74<52F5E74< D7P7D5<6 74E 74?52<@4>54 8-D24S@C<54? @4X6B@ 54;5O5<52C6 7D<5S5<6 2G 0247>D9>- G@CB@4<@E >26O@74 @F：@S7A97<524 2G 0247>D9> - G@CB@4<@E >26O@74 @F 7> B9A<5G94D<5247A G22E 7EE5<5S@>［ (］’ (29C47A 2G H22E QD5@4D@，)**T，T)：>)&L->)).’ ［&M］"CB> 54 @F@CD5>@- 54E9D@E B9>D9A7C 54[9C6［(］’0@E QD5 QP2C<> \F@CD，&//*，))：,)/-,.M’ ［&+］ W74<@C 00’ HC@@ C7E5D7A>，@F@CD5>@，74E 74<52F5E74< >9PPA@B@4<7<524［(］’84< ( QP2C< !9 W("，]954<745A;7 "=，JC223> ^"，@< 7A’HC@@ C7E5D7A> 74E <5>>9@ E7B7?@ PC2E9D@E O6 @F@CD5>@［(］’J52D;@B J52P;6> I@> N2BB94，&/L)，&*：&&/L-&)**’ ［&L］"A@>>52 %0，^ 2AEG7CO "%’U5P5E P@C2F5E7<524 74E >D7S@4?@C @4X6B@> E9C54? @F@CD5>@：7E7P<5S@ C@>P24>@ <2 52A，&/LL，+,：&...-&..+’ ［&/］黄谚谚，毛宁，陈松生 ’红曲霉发酵产物抗疲劳作用的研究［(］’食品科学，&//L，&/（/）：/-&&’ ［)*］许红峰，毛宁，黄谚谚，等 ’红曲霉菌丝体及发酵滤液抗疲劳作用的研究［(］’中国体育科技，&///，.M（&&）：M*-M)’ ［)&］(6;- (6; _74?，0@4?- (6; Q;5@;，Q;54?- U54 W92，@< 7A’ \GG@D< 2G C@E B2AE C5D@ 24 74<5G7<5?9@ 74E @F@CD5>@ - C@A7<@E D;74?@> 54 A5P5E P@C2F5E7<524 54 @4E9C74D@ @F@CD5>@［ (］’ "PPA 05DC2O52A J52<@D;42A，)**+，T*：),T-)M.’ ［))］#@R7C NU，%7C<; 0’Q9P@C2F5E@ PC2E9D<524 GC2B D6<2354@- ［ (］’ NA54 84S@>< 0@E， &//,，&T：M)-+*’ ［).］#547C@AA2 N"’I2A@ 2G PC2-74E 74<5- 54GA7BB7<2C6 D6<2354@> E9C54? 54GA7BB7<524：@FP@C5B@4<7A 74E DA545D7A G54E54?>［ (］’ J52A I@?9A %2B@2>< "?@4<>，&//T，&&（.）：/&’ ［),］王炎焱，赵征，黄烽，等 ’红曲抗炎作用的实验研究［ (］’ 中国新药杂志，)**+，&M（)）：/+-/L’ ［)M］王炎焱，赵征，黄烽，等 ’红曲抗炎机制研究［ (］’中国药物与临床，)**+，+（M）：.M*-.M)’ ［)+］N;57- H@4? W92，=>9- Q;54? _74?，$@5- U54 174?，@< 7A’ "4<52F5E74< 7D<5S@<6 2G A5‘95E - ><7<@ G@CB@4<7<524 PC2E9D<> 2G 0247>D9> P5A2>9> ?C2R4 54 ?7CA5D-D24<75454? B@E59B［(］’(29C47A 2G H22E QD5@4D@，)**+，T&：>,M+->,+*’ ［)T］N;57-H@4? W92，054?-%24 %29，=>9- Q;54? _74?，@< 7A’ \4;74D@E 74<52F5E74< 7D<5S5<6 2G 0247>D9> P5A2>9> G@CB@4<@E PC2E9D<> O6 7EE5<524 2G ?54?@C <2 <;@ B@E59B［(］’H22E N;@B5>967 W7<2，19@G7 ^24?，=7372 Q75<2，@< 7A’$C@P7C7<524 74E D7<7A6<5D P@CG2CB74D@ 2G A5P7>@ @4D7P>9A7<@E 54 >2A- ?@A B7<@C57A> ［(］’J52>D5@4D@，J52<@D;42A2?6 74E J52D;@B5>A7S b5S@A’ U5P7>@ 5BB2O5A5X@E 54 2C?745D- 542C?745D B7［ (］’(29C47A 2G Q2A- ^@A QD5@4D@ 74E =@D;42A2?6，&//T（L）：++T-+T&’ ［).］I25A7 "R74?，02;E I7G7@5 ^;7X9A5，07;5C74 J7>C5，@< 7A’ 8BB2O5A5X7<524 2G A5P7>@ GC2B D74E5E7 C9?2>7 24 P7AB - O7>@E P2A69C@<;74@ G27B 7> 7 >9PP2C< B7<@C57A［ (］’"B@C5D74 (29C47A 2G J52D;@B5>

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