消抗灵Ⅱ号对解脲支原体体外抑菌的实验研究
消抗灵?号对解脲支原体体外抑菌的实验研究
====================================================================== 【摘要】 目的 消抗灵II号对解脲支原体感染的实验研究包含两部分，一部分为本实验所负责的内容，即:消抗灵II号对解脲支原体体外抑制的实验研究，旨在证明其对Uu的抑制作用;一部分为消抗灵II号对Uu的体内抑制实验，旨在证明其对机体免疫系统的作用。本试验的研究目的是探讨消抗灵II号治疗Uu感染的作用机制，证明其与常用的抗生素阿奇霉素相比所存在的优势;优化方中的药物组成，为消抗灵II号广泛应用于临床及进一步的研究奠定基础。方法采用药基法，以培养液倍比稀释中药药液及抗生素药液，使其共含有10个稀释度，并设立阳性对照组、阴性对照组及药液培养基对照组。经培养24,48h后，待阳性对照组发生颜色改变时观察结果。比较消抗灵II号全方、方中各药物及阿奇霉素的抑菌效果，优化方药组成。结果?消抗灵II号组成药物的抑菌效果依次如下:鱼腥草(MIC50:7.81 g/L， MIC90:62.5 g/L，敏感率:80.00%)、垂盆草(MIC50: 7.81 g/L， MIC90: 62.5 g/L ,敏感率:70.00%)、黄柏(MIC50: 7.81 g/L，MIC90: 62.5 g/L ，敏感率:53.33 %)、连翘(MIC50: 7.81 g/L，MIC90: 125.00 g/L ，敏感率:53.33 %)、黄芪(MIC50: 31.25 g/L，MIC90: 250.00 g/L，敏感率:23.33 %)、甘草(MIC50: 31.25 g/L，MIC90: 250.00 g/L，敏感率:16.67 %)、土茯苓(MIC50: 31.25 g/L，MIC90: 125.00 g/L，敏感率:10.00 %)、党参(MIC50: 62.5 g/L，MIC90: 250.00 g/L，敏感率:0)。? 全方、阿奇霉素对Uu抑菌效果如下:全方:MIC50:7.81 g/L，MIC90:62.5 g/L，敏感率:73.33%，耐药菌株数:0;;阿奇霉素:MIC50:0.078 g/L，MIC90:1.25 g/L，敏感率:53.33%，耐药菌株数:8(26.67%)。?精简后药方:MIC50:7.81 g/L，MIC90:31.25 g/L，敏感率:83.33%，耐药菌株数:0。结论?消抗灵II号在体外对Uu有明显的抑制作用。精简药物组成后，最小抑菌浓度没有明显的改变，但对Uu的敏感率增强。?阿奇霉素在体外对Uu有明显的抑制作用，但耐药菌株较多，提示:用中医药治疗Uu感染可能成为代替、或协助抗生素治疗的方法。
【关键词】 消抗灵?号 解脲支原体 抑菌实验
近年研究发现，解脲支原体(Uu)感染与成人泌尿生殖道系统疾病密切相关，可引起非淋菌性尿道炎、慢性前列腺炎、不孕不育、妊娠期感染等疾病。消抗灵?号是导师韩延华教授治疗Uu感染的经验方。临床治疗总有效率达76.19%。方中以垂盆草、连翘、土茯苓、黄柏、鱼腥草清热解毒，对抗Uu;以黄芪、党参、杜仲等药物固护正气，增强机体的免疫力。
1 方法
分别将5种中药、5药合剂、阿奇霉素胶囊制成药液。连续倍比稀释，对7株解脲支原体
标准
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菌株(?型、?型、?型、?型)进行体外抑菌实验。实验具体方法如下:?将备用新鲜培养液基置于37?电热保温箱中，预温1 h;?在12×8孔的聚苯乙烯微量板上，将50 μg 备用煎剂加入第2，3孔;?将50 μg新鲜培养液基分别加入第3至11孔;?用微量加样器，从第3孔开始倍比
稀释备用煎剂至第11孔;?第1孔加液基150 μg，第2至11孔各加100 μg ，第12孔加200 μg;?第1至11孔各加Uu液体培养物50 μg;?第l孔为阳性对照，第12孔为阴性对照。药物浓度从第2孔始依次为:100(00，50(00，25.00，12.50，6.25，3.125，1.56，0.78，0.39，0(19 mg/L ，共10个稀释度;? 每一孔均滴石蜡油，以可以覆盖液面为标准。电热保温箱内，37孵育24 h后观察结果，直至阳性对照孔发生颜色改变，以最低无颜色变化孔的药物浓度定为MIC。所有实验均建立复孔，相差两个浓度及以上者视为失败，重新测定，相差一个浓度者取较小浓度。根据结果将敏感性较高的中药重新组合，重复实验过程。
2 结果
5味中药体外抑菌实验结果:鱼腥草:MIC50=1.9625 g/L，MIC90=3.125 g/L，敏感率:85.71%;垂盆草:MIC50=1.9625 g/L，MIC90=3.125 g/L，敏感率:71.43%;黄柏:MIC50=3.125 g/L，MIC90=25 g/L敏感率:71.43%;连翘:MIC50=6.25 g/L，MIC90=12.5 g/L，敏感率:44.29%;土茯苓:MIC50=50 g/L，MIC90=100 g/ L，敏感率:0%;五药合剂:MIC50=0.7825 g/L，MIC90=12.5 g/L，敏感率:85.71%。鱼腥草+垂盆草:MIC50=0.7825 g/L，MIC90=3.125 g/L，敏感率:85.71%;鱼腥草+垂盆草+黄柏:MIC50=0.7825 g/L，MICM90=3.125 g/L，敏感率:100%。阿奇霉素:MIC50=0.078 g/L，MIC90=1.25 g/L，敏感率:71.43%。
3 结论
3.1 消抗灵?号中的主要成分中除土茯苓外确实具有抗Uu的功效，其中鱼腥草、垂盆草、黄柏具有高度敏感作用;连翘具有中度敏感作用;阿奇霉素对Uu感染具有较好的抑制作用。
3.2 5味药物抗Uu存在量效关系，浓度越高，抑制的菌数越多。
3.3 中药合剂的抑菌作用优于单味药，提示中药复方的重要性。合剂的抑菌敏感性优于阿奇霉素，提示Uu对阿奇霉素可能具有一定的耐药性。
3.4 方药组成优化结果:将原方中土茯苓去掉、减连翘用量，重用鱼腥草、垂盆草、黄柏。
3.5 消抗灵?号对解脲支原体感染治疗作用可能与其对Uu生长的抑制作用密切相关。
浙公网安备 33021202002483