高效液相色谱法测定汽水中的苯甲酸一、实验目的1.熟悉高效液相色谱操作条件的选择，以达到化合物的良好分离效果2.掌握高效液相色谱测定汽水中苯甲酸的方法二、实验原理苯甲酸是一种常用的防腐剂，被广泛应用于饮料及日常调味品中。我国食品卫生
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规定饮料如汽水中苯甲酸的最大使用量为0.2g/kg。本实验利用高效液相色谱法测定汽水中苯甲酸的含量，以
检测
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其饮用安全性。三、仪器及试剂高效液相色谱仪带紫外检测器甲醇，（1+1）氨水，0.02mol/L乙酸铵溶液，1mg/ml苯甲酸标准储备液，0.1mg/ml苯甲酸标准使用液四、实验步骤1.高效液相色谱条件C18色谱柱，流动相甲醇+0.02mol/L乙酸铵溶液，流速为1ml/min,进样量为10ul，紫外检测器波长为230nm2.流动相的配制甲醇和0.02mol/L乙酸铵溶液按10:90(v/v)混合而成，用0.5um滤膜过滤后，经超声波脱气即可使用3.标准曲线的绘制分别吸取苯甲酸标准使用液（0.1mg/ml)2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于10ml具塞比色管中，用超纯水定容至刻度，混匀。过滤后分别取10ul进样，测定不同浓度标准溶液的峰面积。以苯甲酸标准溶液的浓度为横坐标，相应峰面积为纵坐标绘制标准曲线。4.样品的处理与测定取汽水样品约10g于小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用（1+1）氨水调pH至约7，加超纯水定容至25ml，离心后，取10ul进样
分析
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。苯甲酸浓度(mg/ml)峰面积（微伏·秒）保留时间(min)0.026381286.0050.0412942826.0150.0619487336.0150.0826123166.0120.1032272996.010五、结果
记录
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及讨论1.数据记录及处理根据汽水中苯甲酸的峰面积从标准曲线上查的其浓度，据下列公式计算：x=CV/mx---样品中苯甲酸的含量，g/kgC---从标准曲线上查得的样品浓度,mg/mlm---样品质量，gV---样品稀释总体积，ml2.讨论思考
题
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1.为什么高效液相色谱流动相在使用前必须经过脱气处理？2.改变流动相的配比，苯甲酸的保留时间是否发生变化？若发生变化将如何变？谢谢观赏WPSOfficeMakePresentationmuchmorefun@WPS官方微博@kingsoftwps
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