作用于呼吸系统的药物实验
实验三十三 桂痰药对纤毛上皮细胞活动的影响
目的 通过氯化铵溶被对纤毛上皮细胞活动的观察,进而了解祛痰药的祛痰作用。
实验材料
器材——蛙笼、蛙板、大头针、剪子、尖镊子、滴管、木屑(或滤纸片)、天平、针、线。
药品——氯化铵溶液(浓度为1:3000或1:4000)、生理盐水。
动物——青蛙或蟾蜍。
实验方法
取蛙一只称重(在20g以上为好),腹部向上,用大头针将其四肢及上颚固定于蛙板上。用线穿过舌及下颚后。将线的另一端系于固定后肢的大头针上,使口腔大大张开。
用滴管吸取生理盐水,反复冲洗上颚粘膜上的粘液,然后在两眼后侧中间处粘膜上的一点,用尖镊子放上一块浸泡过生理盐水的木屑(木屑以半颗绿豆大小即可),此时由于纤毛上皮细胞的纤毛运动,可将小木屑向食道口方向移动,待小木屑移至食道口时立即用镊子取出,以免进入食道。在木屑移动时,要准确测定木屑由始点至食道口止所需要的时间,并
记录
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之。
然后在粘膜上滴入浓度为1:3000氯化铵溶液3滴,3-5分钟后用生理盐水洗去药液,再将术屑置于原处,重新测定它们从某点移至食道口所需要的时间。比较用药前后木屑移动所需要的时间有何不同。
讨论题 从实验结果试分析氯化铵的作用方式如何?
实验三十四 祛痰药对呼吸道粘液分泌的影晌
目的 通过祛痰药远志对呼吸道粘液分泌量的影响,进一步理解祛痰药的祛痰作用机理。
实验材料
器材——小鼠灌胃管、注射器、针头、蛙板、大针头、剪刀、镊子、线、5-10mL试管、试管架、天平、分析天平。
药品——100%远志煎剂,0.25%酚红溶液、5%碳酸氢钠溶液、1NNaOH溶液、生理盐水、5%NaHC0溶液。 3
动物——小白鼠。
实验方法
取禁食8-12小时,体重相近的健康小鼠2只,雌雄不限,做好标记。甲鼠以100%远志煎剂灌胃,剂量为0.25mL/10g(即24g/kg);乙鼠只给同量的常水,30分钟后两鼠均由腹腔注射0.25%酚红溶液0.7mL。待30分钟后,将小鼠颈椎脱臼致死,仰位固定于木板上。切开颈正中皮肤,找出气管,在其下穿一线备结扎用。然后用注射器抽取5%碳酸氢钠溶液0.4mL,按上7号针头从喉头刺入气管内。将线扎紧,避免针头滑脱。反复抽洗3次。将冲洗液注入小试管内。将3次冲洗液混合,与
标准
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管进行目测比色。
注:1.剥离气管时操作要轻、稳、勿使出血,以免影响比色。
2.抽洗气管分泌物时,要尽可能将液体抽尽,同时应避免将气注入气管内。
3.盛装冲洗液来比色的试管与标准管应尽可能同一型号。
附:1.0.25%酚红溶液的配制:
用粗天平称取酚红0.5g,以1NNaOH溶被5mL溶解后加生理盐水至200mL摇匀即可。
2.标准酚红管的配制:
用分析天平准确称取一定量酚红,以5%NaHC0溶液溶解之,使1mL含酚红1000μg。3
然后依次稀释,配成每mL含酚红1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20μg的标准比色管,每管容重3mL,密封备用。
讨论题 从实验结果,谈谈远志的祛痰机理是什么?
实验三十五 平喘药物对豚鼠离体气管的作用
目的 观察平喘药对离体气管平滑肌的作用。
实验材料
器材——记纹鼓、万能支架、万能杠杆、活动双凹夹、恒温水浴槽、手术刀、手术剪、眼科镊、小止血钳、结扎线、烧杯、麦氏浴皿、Z形管、温度计、三角烧瓶、培养皿、注射器、二连球、胶管、螺旋夹、氧气、二氧化碳气。
药品——0.1%磷酸组织胺溶液,0.1%氧化乙酰胆碱溶液、2.5%氨茶碱溶液、0.01%肾上腺素溶液。克-亨氏液(kceb-Henseleit液)。
动物——豚鼠。
实验方法
取体重400-500g豚鼠一只,木棒击头致死。沿颈正中切开,轻剥周围组织, 分离出气管,自甲状软骨下至气管分支处剪下气管,立即置于盛有氧气饱和了的、温度在37??1?的克-亨氏液(K-H氏液)的平皿内。除去粘附在气管上的组织, 用手术剪将气管剪成螺旋形
0的气管片(斜度以30宽度以2-3mm为宜),或沿软骨环筒横切气管为5-6段,用棉线将各段
-1)也可沿气管腹面纵行切断,再于每两个软骨环间切断,平分成5段,将结扎成链状(图35
5段沿纵行切口,用棉线缝合成一串(图35-2)。制成的气管标本两端分别用线结扎,一端系于Z形弯钩上,另一端连于描记杠杆上,将标本放入装有K-H氏液的浴皿内(浴皿内液体约为50-60mL), 温度37?,用双连球从Z形管给以95%氧和5%二氧化碳混合气体,静置30分钟,当基线稳定再进行下列实验。
1.向麦氏浴皿内加入0.1%氯化乙酰胆碱溶液0.7-1.0mL,待作用明显后加入 2.5%氨茶碱溶液0.5-1.0mL,观察5分钟,记录药物反应,然后用K-H氏液冲洗3次。
2.待前一个药物充分洗去,杠杆回至基线后再加入0.1%磷酸组织胺液 0.5-1.0mL,观察其反应并记录之。
实验记录
反应 收缩 舒张 药物 开始时间 收缩幅度 开始时间 收缩幅度
乙酰胆碱
氨茶碱
组织胺
肾上腺素
讨论题 分析实验结果,谈谈氨茶碱、肾上腺素的平喘作用?
附:K-H氏液配制:
NaCl6.92,KCl0.35,CaCl0.28,NaHCO2.10,MgS00.29,葡萄糖2.0,KHP00.16 加23424水至1000m1。
注:配制时应先将氯化钙,碳酸氢钠分别溶解,然后加入充分溶解稀释的其它成分中,否则产生沉淀。
实验三十六 可待因对小鼠氨水引咳的镇咳作用
目的 了解化学物质浓氨水的刺激引起小鼠咳嗽的方法,借以观察镇咳药可待因的镇咳作用。
实验材料
器材——天平、玻璃罩、注射器、针头、滤纸条(各棉球用线系好)、瓶塞、滴管、烧杯。
药品——0.2%磷酸可待因注射液、生理盐水、浓氨水。
动物——小白鼠 .
实验方法
取健康小鼠2只,称重(18-22g为好),编号,置钟罩内,观察它们的正常活动和呼吸特点。甲鼠腹腔注射0.2%磷酸可待因注射液0.1mL/10g;乙鼠腹腔注射生理盐水0.1mL/10g ,仍分别置钟罩内。将滤纸(或棉球用线系好)由瓶口悬挂在钟罩上方,瓶塞事先留有小孔以通空气。给药后通空气。给药后20-30分钟分别向滤纸条注入浓氨水1滴。1分钟后,立即取出小鼠,置烧杯内听咳嗽声,并记录取离钟罩后的咳嗽总次数,比较两鼠的咳嗽次数有何不同。
实验记录
咳嗽次数 鼠号及用药 反应
甲鼠,可待因
乙鼠,生理盐水
讨论题 可待因的镇咳作用如何,镇咳机理是什么,