四乙酰核糖HPLC法测定

四乙酰核糖HPLC法测定四乙酰核糖HPLC法测定四乙酰核糖HPLC法测定 98 药物生物技术 Pharmaceutic.a]Bioteehnology2001,8(2):98--99 四乙酰核糖HPLC法测定' 薛继雄 (温州中西医结合医院,温州325000) 摘要为了建立高教液相色谱法分离测定四乙酰核糖纯度及相关杂质的方法,以YWG-18为分析柱,以 35%乙腈为流动相.流速为lmb~min.检测波长为210nm,对四乙酰核糖进行了HPLC法测定在50t~/ml, 10000/浓度范围内呈线性关系(r:0.99997...

四乙酰核糖HPLC法测定四乙酰核糖HPLC法测定 98 药物生物技术 Pharmaceutic.a]Bioteehnology2001,8(2):98--99 四乙酰核糖HPLC法测定' 薛继雄 (温州中西医结合医院,温州325000) 摘要为了建立高教液相色谱法分离测定四乙酰核糖纯度及相关杂质的方法,以YWG-18为分析柱,以 35%乙腈为流动相.流速为lmb~min.检测波长为210nm,对四乙酰核糖进行了HPLC法测定在50t~/ml, 10000/浓度范围内呈线性关系(r:0.99997).且测定方法重现性鞍好(RSD<I%),精密度<I%.证明本方法简单准确,重现性好.可用于分离测定四乙酰核糖纯度及相关杂质. 关键词四己酰核糖:高效液相色谱法;测定;相关杂质中图分类号Q657.72文献标识码:B文章编号:1005—8915(2001】02098—02 1,2,3,5.0四乙酰.呋喃核糖(四乙酰核糖) 是合成胸腺嘧啶及利巴韦林(三氮唑核苷)等抗病毒药的重要中间体,准确测定其纯度及杂质显得尤为重要,经查阅资料目前国外有气相色谱测定方法.本文采用HPLC法.能有效地分离其中杂质及对纯度进行定量,方法简便,结果准确,专属性高,有实用意义. 1 材料 1.1仪器 Waters510泵;486型紫外检测器:SP4290 型积分仪;UV1800型紫外扫描仪(北京通用仪器公司) 1.2试药四乙酰核糖纯品:自制(纯度?99.5%);四乙酰核糖样品:河南新乡制药厂;乙酰次黄嘌呤:河南新乡制药厂. 2方法 2.1色谱条件色谱柱:YWG-18(250mm×4.6mm,5m); 检测波长:UVL210nm;流动相:乙腈:水(35:65); 流速:1rnl/min;灵敏度:0.02AUFS;柱温:室温. 2.2实验步骤 2.2.1对照溶液的制备精密称取四乙酰核糖对照品适量,舟流动相稀释翩成1mg/ml的溶液. 22.2供试品溶液的制备同对照溶液制备. 2.2.3实验过程分别注入液相色谱仪,进样量 20"I,并按外标法计算供试品纯度 3结果 31色谱适用性试验按上述色谱条件测定.四乙酰核糖色谱峰(图 1)的相对保留时间为5.20min,3个原料药及中间体中的主杂质峰的相对保留时间分别为172 min.1.95min,2.18min,2.54min,试剂空白峰的相对保留时间为228min,各色谱峰之间明显分离,四乙酰核糖峰与相邻杂质的分离度大于25, 理论塔板数按四乙酰核糖峰计算可大于7000,同时四乙酰核糖在此流动相中能较好溶解. 3.2线性关系取四乙酰核糖对照品适量.用流动相配制成 10rag/mr的标准贮备液,再用流动相分别配成50 ,ttg/mL;100p.g/ml;200ug/ml;500p-g/ml;1000 ml;2000ml;5000,ttg/ml;10000p-g/ml的标准系列,每个浓度进样3次,以峰面积与浓度作标准曲线,回归方程为Y=71.14771X一2.18533;相关系数r=0.99997,两者具良好线性关系,线性范围宽. 3.3校正因子(f)值测定: 分别取四乙酰核糖对照品,配制成500 p.g/ml,1OOOm1.2OOOp.g/ml的标准系列溶 ?收稿日期2000a18.28 作者简介:薛继雄(1968年生).男浙江温州凡,职业药师.主要从事药物台成与药物制剂方面的研究. 薛继撼:四己酰核糖I-tPLC法测定液,每一溶液进样3次,测定校正因子f值,9次测定的RSD<1.0%. Tab1R酬tsofdeterminationOftherectificationfactor 3.4精密度和检测限取供试液1份连续进样6次,其峰面积分别为:15.39553;15.53164;15.32437;15.41311;15. 45260;15.63305;平均峰面积为15.15838,其精密度RSD为0.71%;最低检出浓度为1.8/*g/ml;同时测定相关杂质;乙酰次黄嘌呤及未知杂质的最低检出浓度分别为0.20~g/ml,0.251*g/ml. Tab2Thecomparison0fthedeterminationbyHPLCand 3.5HPIC与GC法的比较以上2法经数理统计分析,无显着性差异. 2法正态总体方差为齐性: 在a=0.05下检验假设H0:c=8zHPLc.s邑c= 0.3767,sLc=0.7016...sLc>s,.'.s【 s=0.7016/03767=I.8624查F表,得F口o5/2 (8—1,8—1)=4.99>1.8624故接受Ho,即在水平0.05下认为2总体方差相等. 2法的测定结果显着性差异检验在d=001下.检验假设Ho:E(x)=0检验的拒绝域为lx{>{ta/2(n一1). ?n 由x=U—V计算x的观察值,得相互独立观察值. 注:u=气相色谱法测得的个体数据; V=高效液相色谱法测得的个体数据. 得一0.39,一036.一002,1.8,014,0.93,一 0.46,0.25,得x:0.2363,S=0.7777 查t表,得to01/2(7)=3.4995 S2(n一"=O.7777=0.9622>0.2363 4n4 故在水平今x=0.2363不落在拒绝域内, 0.01下认为2种方法无显着差异. 4结论本法分离线性范围广,相关杂质检测浓度低灵敏度高.与气相法比较,测定结果基本吻合. DeterminationofTetraacetylRibosebyHPLC XueJixiong (WenzhouHospimltheIntegrationofTraditionalChineseandWesternMedicine,Wenzhou 325000) AbstractThemethodsoftetraaeetylrilosedeterminationbyHPLCwasestablished.Theanal yticalcolumnis YWG-18,mobilephaseis35%acetonitrile.andflowrateis1.Oml/min.Thedeterminationra ngeis 50~g/ml--10000t~g/ml(r=0.99997).Thismethodissimple,accurate,goodreproducibilitya ndcanbeused fordeterminationofcontentsand~sol,ation0fimpurityofTetraacety1,rihose. KeyWordsTetraaeetylribose,HPLCDetermination,Impurity.

                    本文档为【四乙酰核糖HPLC法测定】，请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑，
                    图片更改请在作品中右键图片并更换，文字修改请直接点击文字进行修改，也可以新增和删除文档中的内容。 
 该文档来自用户分享，如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服，我们会及时删除。

                    [版权声明] 本站所有资料为用户分享产生，若发现您的权利被侵害，请联系客服邮件isharekefu@iask.cn，我们尽快处理。

                    本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权，请谨慎使用。

                    网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传，仅限个人学习分享使用，禁止用于任何广告和商用目的。
                

下载需要：免费已有0 人下载

立即下载

四乙酰核糖HPLC法测定

你可能还喜欢