超氧化物岐化酶（SOD）的作用及其在化妆品中的应用

一 牛／，彳 化散 ，黧抽 巳幽 占 c／ 1 起氧化物岐化酶 (SOt))的作用 及其在化妆 品中的应用 蔺国敬 (甘肃省轻工研究所 ) - - - - — _ ● 提要：介绍SOD的分布，制法，性能和 SOD的抗衰老怍用 论述了超氧阴离子自由 基在机体 内的产生以及对机体的损伤遮径 SOD对超氧阴离子自由基的清除作用和SOD 的抗衰老机理；也介绍了SOD在围内外化妆 品行业的应用及效果。 超氧化物歧 化 酶 (superoxide di S muta se)简称SOD．是一种酶制剂。用于化 妆品的SOD除消炎外，对老年斑，雀斑和面 部黄褐斑 等皮肤色素沉积症有显著疗效[】 ， 同时sOD也作为抗衰老药使用【 ，是抗衰老 的新原料【 。国内外化妆品行业声称SOD是 当今世界抗衰老的化妆品最佳用品． 一 ． SOD的分布 迄今为止已从细菌、真菌， 藻类 鱼 类 ．昆虫，植物和哺乳类动物等各种生物体内 分离得到过SOD。目前主要以牛血．猪血、 柳梨等资源开发SOD⋯。SOD分 为三类 1．Ca-Zn—SOD，呈蓝绿色，主要 存在于 真核细胞的细胞质中．如动物血中有牛血 、 猪血等 ．动物肝中有牛肝 猪肝等 ．以及箭 鱼、麦叶、莉梨 等体内。2．Mn--SOD．呈 紫红色，主要存在于原核细胞和真核细胞的 基质 中，如人肝 、细胞 的细胞 液 中。3，Fe～ SOD，呈黄褐色，主要存在于原核细胞及少 数植物中⋯。 因此可根据 当 地 资 源 开 发 SOD． ：，SoD的制量 根据S0D的种类 不 同．资 源不同，制 · 4O t 备方法也略有差异。MeCord FfidOvleh法 主要甫三步：即乙醇～氯仿去血红蛋白：有 机溶剂和硫酸铵分级沉淀：离子交换桂层析 精制 【 。 目前目外 已采用亲和层 析洼 【 和金 属整合亲和层析法【 。国内 制备SOD的方法 常包括：原抖处 理；热 变 性；有机溶剂沉 淀；透析；柱层析分离；浓缩：冷冻干燥等 【●】 例如 从牛血 中提取Cu·Zn— SOD⋯ ： 1．取新鲜 抗 凝牛血sOD，2500转／分 离心 20分钟 ，去 除黄 色血 浆液 ．用 两倍 的生 理水 洗两次：干净的红血球加入等体积的去离子 水搅拌30分钟。2．将溶血液置冰盐溶液中搅 拌冷却至0℃左右，缓缓加八0．25倍 体 积的 冷乙醇，然后加A0．1 5倍体积的氯仿，搅拌 l 5分钟，离心去血红蛋白沉淀。3．淡黄笆清 液按体积加^磷酸氢二钾搅拌．溶液移至分 液漏斗静止分层l5分钟 ．弃去下清液，再将 上层黄色混浊液离心弃去沉淀得黄色清液． 4．将黄色清液置冰盐溶液中 冷 至0℃以下． 在搅拌下加人冷丙婀后产生大量沉淀，离心 得微黄带绿色沉淀，然后 加 八 少 量去离子 水，置透析袋中。PH7．6 2，5ramol／L磷酸缓 冲液进行动态透析5～6小时；透析液离心弃 沉淀．得淡黄色的上清液．加到 预 先用pH 7．6 2．5ramol／L磷酸缓冲渍平衡的DE一32 柱上．然后用PH7．6 2．5~200mmol／ L磷 酸缓冲液进行梯度冼脱 5．将上述洗脱液超 滤浓缩 冷冻干燥 得产 品。 山东医科大学对SOD毒性试验⋯．对大 白鼠按20mg／kg体腹腔注射20呖的SOD生 维普资讯 http://www.cqvip.com 堙盐水，对照组(每组1o只雌雄各半)用盐 水，观察两周 ．结果大白鼠活动自由， 激 反应灵敏 ，呼吸平稳规 律、食 欲 良好 。另外 对小鼠也作过大剂量致敏试验 ，结果为阴性． 三、SOD的性质 】 】．对热稳定性：天 然牛血S0DT5℃下加 热数分钟．其酶活性丧失很小。2．PH对SO D的影响：SOD在PH5．3～】o．5范围其 催化 速度不受影响，PH3．6时SODZn脱 落95呖i PIll2．2SOD构象会发生不 可逆的 构象，导 致酶活性丧失 3．SOD的紫外线吸收特性； SOD在280rim处没有吸收高峰。4．金属辅基 与酶活性：SOD属金属酶，Zn仅于 分 子 结 构有关，而Cu与僵化活性 有 关，同样Fe、 Mn是酶活性必需的 5．SOD是具有还 原 和 失活作用 (见后 )。 西、SOD的抗囊老作用 1．机体内的超氧阴离子自由基；它在生 物体内产生的途径很多，呼吸细胞能产生 ． 某些细胞器如线粒体、叶绿体也能产生，此 外它还是半乳糖氧化酶及其它某些酶反应的 中间产物。它能导致脂质过 氧 化 破 坏细胞 膜，也能使体内病毒失活。因此维持体内超 氧阴离子自由基的平衡十分重要。通常它本 身并不直接造成上述破坏作用．若参与氧化 不但损害机体．而且它还是毒性更大的其它 活性氧(。OH HO2．-等)的前体 。SOD具有 清除超氧阴离子 自由基的能力，因之维持体 内一定水平的SOD同样是十分重要 【l0 J。 2．机体衰老时自由基的损伤作用：(1) 脂类过氧化和生物庹的损伤．在人体中，不 饱和脂肪酸此饱和脂肪酸丰富得多．如果机 体中自由基处于不平衡状态 ．会导致体内不 饱和脂肪。酸的过氧化，尤其是生物膜上的多 不饱和脂舫 酸发生过氧化作用 ．产生 的自由 基可对膜上蛋白质或膜结合酶起作用，导致 膜功能严重受损．使机体处于不正常状态， 逐渐趋于衰老【 。 (2)脂褐 素 的产生 ，脂 褐素 (即老年色素 )的积聚是细胞衰老的基 本特征．是细胞脂质不饱和酸过氧化的产物 【 。 脂类过氧化分解物生成丙二醛等使生物 大分子间发生 联，聚台成异常大分子在溶 酶体中堆积形成脂褐素，导致胶原坚韧长度 缩短，各条胶原纤维失去膨胀能力，使皮肤 出现皱纹 [1l】。 同 时 皮肤色素的 形 成过 程 中，酪氨酸酶对黑色素的合成起重要作用， 而SOD对酪氨酶有抑制作 用，SOD用于化妆 品能渗^上层组织减缓 黑 色素 的形成 】， 有抗衰老功能。 3．SOD是机体内 u 2的有效清除剂；自 由基清除剂是指能使自由基丧失其不配列电 子并失去自由基的特性的物质。可分两类： (1)小分子 自由基清除剂 ， 如V 、V 、甘 露醇等等。 (2)大分子 自由基 清除 剂 ，侧 ~uSOD、过氧化氢酶(CTS)，过氧化物酶(P OD)、畚胱甘肽过氧化物 酶 (GpX)等。 其 中sOD是超氧阴离子自由基 的 有 效清 除 荆弘】。 4．酶自旃同效应：作为 荷 I象剂 的 SOD 酶．能把引起衰老的超氧阴离子 自 由 基 清 除．而机体内形成的H O 可通过CTS或GP x请除，2HzO=!_= Ht0+0tt从而起到保护 细胞作用。同样超氧阴离子 自由基葩睫CTS， POD失活．SO贩 过来 又 保 护 这 两 剃一酶 【_1 5．SOD具有抗 衰老作用，虽然 衰老时 机体内脂质过氧化作用可由不同的自由基引 发 ．但由于这类引发 自由基的来源很可能是 超氧阴离子自由基作为原 初引发 自由基而产 生 ，因而超氧阴离子 自由基很可能是各利t自 由基的最初 『发剂 ．因此清除超氧阴离子自 由基的累积对防止衰老有一定意 义 【 ，SOD 作为超氧阴 离子自由基的清除剂因而它确抗 衰老作用． 五、SOD在化妆吕行业的应用 。】[11’。： (下转第29页 ) ·4l· 维普资讯 http://www.cqvip.com 避八冷凝器的气量减少，进人水分离器的冷 凝液减少，既节约了冷却用 水，又可减 小附 属设备的规格 ． C．汞刷双冷凝 系统 ．涟 第 一次冷凝约不 凝性汽体璺二次冷鬣 ．以 回 收 低沸 ：景的头 香。 D．采用冷凝 径夏谣枉佃 能使水溶 性成分得到回收 对水溶性成分较多的产 品 如玫瑰花和迷迭香．用此 殳备可以把损失减 少到最小 。 本设备 有花渣过滤器，若残液内水溶 性成分商，过滤液可作下锅的蒸馏刷水。 E．由于 蒸 馏过程中植物经彻底粉碎． 形成易流动的浆状物 ．出 渣。时，只 需 打开 底阀，渣浆可迅速排出，缩短了操作时间，减 轻了劳动 强度 。这是目前常用的任何一种设 备所不及的。 ． 结柬语 蜗轮式快速蒸馏装置，无论从理论上l还 是从实践效果看，都此目前生产上使用的任 何一种水蒸汽蒸馏设备优越 如果在出渣隅 前装上过滤装置，也可作强化的浸提设备使 用。在全国推广使用．无疑可以提高我国天 然精油的加工水平。当然，此设备目前虽热 有lo0i 200} 8ooI兰种规格．但需要水、 电、汽配套工程，适台于较大规模的生产． 如何也能适应山区和原科产地的加工，在这 方面还需进一步研究改进．希望国内同仁共 】 同努力． 参耄文蘸 1．坤斯，E．Gueafher，The E sse~t@- a1 0i1s 2． 中国香料植物的栽培与加工 ，轻 工 业 出版社 ．1 g85 3．姚祖玉等． 玫瑰花精浊蒸馏技术改 进”技术 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 载手 。中国油用玫瑰 资料 专 辑．甘肃轻科所汇编，1 984 4．By：Beln'ara Meyef二vtadiod， Camill'a， NatnrafE ss ntiilOil" erf m¨ l＆F1avotiit，vol ：N ． ， 2，P93，1984 r 一 ‘ t ● ‘ · (上接第4i页 ) SOD作为抗衰老化妆品原料出现， f起 国内外化'妆品行业的关注。通过研究利用，已 成功地把sOD作为抗衰老原 应 用于化妆 品，井经临床证明，含sOD化妆 在一定程度 上确实起到延缓皮肤衰老 促进保健功能和 去除面部色素沉着等美容效桌 产品受到_广 大顾客的厚受。 如果 进一步对SOD研究 开 发、降低成 本．同时降低产品限存期内SOD酶活性的损 失事， ．将有利于扩大SOD化妆品的销售． 参考文簟 【1】‘日甩化学工业'l咖 ．No． 3 P． ’ 【 】t中国筠学杂志 1989No．24(T0 jlf。一 C 8It北京日他情报'199PN0,2P'．2 ’}．、 “ 】‘中国药学枣笛 ll~gNo 24( )P-铲 【 】‘中国葶学枣车 l口勰 ( } 【6】Weet Lake R⋯J et a1．Ana1 bi c妊 m t98。4 , i55m3 。 【T】thou难 K越 a1．J．Chr0山 t啦 柏 l们5．让 ，8bl ‘ ’ 【81‘甚药 业'l 糖No．4 P．‘ 一 【口】山东医科大学内 资料 ．． 【lS】‘中国药学杂志’ 80 No．~4(7 ．3虹 【iI】U．S．P．I】29644 【l2’t日甩化 l工墅’l蛔 No P．两 j ；： 1i巍 ～ 维普资讯 http://www.cqvip.com