室内测定30种植物提取液对甜瓜霜霉病的防效

室内测定30种植物提取液对甜瓜霜霉病的防效 室内测定30种植物提取液对甜瓜霜霉病的 防效 第25卷第2期上海交通大学(农业科学版) 2007年4月JOURNALOFStlANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY(AGRICULTURALSCIENCE) V01.25No.2 Apr.2007 文章编号:1671-9964(2007)02-0161-04 室内测定30种植物提取液对甜瓜霜霉病的防效 赵杰,赵爱华,胡育海,陈建,夏建明 (1.南汇区农业技术推广中心,上海201300;2.南汇区农业信息中心,上海201300; 3.上海市农业技术推广服务中心,上海201103) 摘要:用叶圆盘生测法测定了3O种植物不同组织部位的丙酮提取液对甜瓜霜霉病菌(Pseudoperonosporacubensis)的防治 效果,其中侧柏(eiot~orientalis(I.)End1.)叶,马尾凇<船删so,ll口Larmb.'针和泽漆.Ilor6helioscopiaU)t叶混样的丙 酮提取液在离体叶圆盘的防效分别为100.O%,100.O%和93.3%.其他植物提取液均无明显抑茵效果.上述3种植物提取液的 室内盆栽试验结果表明.7d后对甜瓜霜霉病的预防效果分别为95.2%,96.5%和93.9%. 关键词:植物提取液:甜瓜霜霉病菌;防效 中图分类号:$436.429文献标识码:A ControlEfficacyof30PlantExtractsagainst CucumberDownyMildewinLab ZHA0J,ZHA0Ai-huHUYu-hal;CHENJ,X/AJ/an-m, (1.NanhuiDistrictAgro-TeehnologyExtensionCenter,Shanghai201300;2.NanhuiDistric tAgriculturalInformationCenter, Shanghai201300;3.ShanghaiA0._TechnologyExtensionandServiceCenter,Shanghai201103,China) Abstract:Thecontroleffieaeiesofdifferenttissuesextractsof30plantsagainstPseudoperonosporacubens/swastestedbytheleaf discstests.Thems~tsshowedthattheextractsoftheleafofP/otaodent~/s(L.)End1..theleafof,umassonianaLarmb.and thestemaswellasleafofEuphorbiahelioscopiaLhadagoodcontroleffieaeiesof100.0,100.O%and93.3%,respectively.rhe otherplantextractsdidnthaveanycontrolefficacy.Thepottestsofthesethreeplantextractsshowedthattheircontroleffieaeies at7dayswere95.2%.96.5%and93.9%,respectively. Keywords:plantextracts;Pseudoperonosporacubensis;controlefficacy 长期以来,有机合成农药在保证作物高产,稳产等方面发挥了巨大的作用,与此同 时,化学农药自身毒 性,在环境中的行为和归宿对人类造成的负面影响已引起人们的高度重视.为此, 人们期望从植物中寻找 具有生物活性的物质,以开发毒性低,对环境影响小的植物源农药.国内研究发现 出大花金挖耳草 (CarpesiummacrocephalumFranch.EtSav)[11,虎耳草(Chto~virgataSwartz)[21,南欧 丹参(SalviasclareaL.)翻 和苦豆子(Sophoraalopecuroides)t~等多种植物具有有杀菌或抑茵活性.此外,国外 也报道了翅叶槐(Cassia atat~)[51,欧洲红豆衫Taxusbaccata)蛔,杜茎~(Maesaramentacea)~及十字花科植物 阐的抑茵活性. 本文对30种植物不同部位提取液的抑茵活性进行了初步筛选,并对侧柏叶,马尾 松针和泽漆茎叶混 样的提取液进行了盆栽试验. 收稿日期:2006-05.15 作者简介:赵杰(1979-),男,上海人,硕士,助农,研究方向:病虫害综合防治,Tel:021— 58021064,E-mail:zhaoeaoyou@163.com 162上海交通大学(农业科学版)第25卷 1材料与方法 1.1供试材料 1.1.1供试植物材料于上海植物园采集30种植物的不同部位,经整理,35?干燥,粉 碎后于冰箱内5 c【=冷藏备用(表1). 表1供试植物材料 Table1Catalogueoftestedplant PlantnameFamilTestedtissues 艾Artem/siaar~TrIJev1.etVant 苍耳XanthiumsibiriculnPatrin. 水蓼PolygonumhydropiperL 羊蹄Rumexi~onicusHour. 侧柏P/otaD,ll口f(L.)End1. 龙葵sDfc啪"mrIig兀堋L 番茄LycopersiconesculentumMil1. 马尾松HnusmassonianaLarmb. 狗尾草SetariaverticiUata(L.) 牛膝AchyranthesbidentataBlumex 香樟LinderaconmmnisHems1. 石楠Dtiniaserrulata【d1. 地锦EuphorbiaaustralisL 泽漆EuphorbiahelioscopiaL 乌桕SapiumSebrumRoxb. 铁苋菜AcalyphaaustralisL 藜Chehopodiumalbum 黄檀DalberglahupeanaHance. 刺槐Ro6iapseudoacciaL. 合欢A跖izia,ulibrissinDurazz. 毛茛RanuncjaporacusThunb. 野胡萝卜DaucuscarotaL. 丝瓜Luffacylindrical(L) 榆树Ulmu~pumilaL 桑MorusalbaL 薇草Humulus$callden$(IJ0ur.) 卷耳Cerastiumart3el,lseL. 牛繁缕Malachiumaquaticum(L) 繁缕Stellariamedia(L) 马齿苋Portuk~aoleraceaL 菊科Compositae 菊科Compositae 蓼科Polygonum 蓼科Polygonum 柏科Cupressaceae 茄科Solanaeae 茄科Solanaeae 松科Pinaeeae 禾本科Gramineae 苋科Amaranthaceae 樟科1.auraceae 蔷薇科Rosaceae 大戟科Euphorbiaeeae 大戟科Euphorbiaceae 大戟科Euphorbiaeeae 大戟科Euphorbiaeeae 藜科Chenopodiaceae 豆科Leguminosae 豆科Leguminosae 豆科Leguminosae 毛莨科Ranuneulaeeae 伞形科Umbelllferae 葫芦科Cueurtibaeeae 榆科Ulmaeeae 桑科Moraceae 桑科Moraceae 石竹科Caryophyllaeeae 石竹科Caryophyllaceae 石竹科Caryophyllaeeae 马齿苋科Portulaeaeeae 叶Oeao,茎(stem),根(root) 叶Oeao,茎(stem),根(root),种子(8eed) 全草(whole) 茎叶(stemandle,根(m0f) 叶Oeao 茎(stem),叶Oeao,根(Hoot) 茎叶(stemandleaf) 叶(1ea|) 茎叶(stemandhat) 全株(whole) 枝(stem),叶Oeao 枝(stem),叶Oeao 全株(whole) 根(root),茎叶混样(stemandleaf) 叶Oeao 全株(Whole) 茎叶(stemandleaf) 枝叶(stemandleaO 枝叶(stemandleaO 叶(1eaf),枝(stem) 全~(whole) 全株(whole) 藤根混样(StemandLeaf) 叶( 叶(a|) 根(Roo0,茎叶混样(StemandLeaf) 全草(Whole) 全草(Whole) 全草(Whole) 全草(Whole) 1.1.2供试病原茵甜瓜霜霉病菌(Pseudoperonosporacubensis)采于上海市南汇区农业技术推广中心实验 基地甜瓜霜霉病叶,用自来水洗净表面,保湿一昼夜(18,19?),促使新鲜孢子囊的产生.用蒸馏水洗下孢 子囊并调整孢子囊悬浮液浓度至5,10个?IJ-,立即用于生物测定. 1.1.3供试寄主试验使用的甜瓜品种为津甜1号(天津科润蔬菜研究所生产),叶圆盘生测所用的甜瓜 叶片取自培养室(25,30?)培养的甜瓜苗同一叶位的叶片,盆栽试验所用的甜瓜苗为室内培养3个星期后 有5片真叶的甜瓜苗. 1.1.4供试药剂72%代森锰锌?霜脲氰wP(商品名:克露),由上海杜邦农化有限公司生产,用蒸馏水稀 释成700倍液(1028.57g?mL-')供试. 1.2实验方法 1.2.1植物提取液的制备用200mL丙酮分3次浸泡提取(100mL,50mL,50mE),每次浸泡时间依次为 72h,48h,24h,过滤合并滤液,40?减压浓缩至干,最后用丙酮溶解过滤定容至2OIIlL,提取液浓度为每 mL丙酮含1g干材料,于0~4?冰箱内冷藏备用.生物测定时用蒸馏水稀释5倍,以20%丙酮为对照. 第2期赵杰,等:室内测定30种植物提取液对甜瓜霜霉病的防效163 1.2.2生物测定方法 1.2.2.1室内叶圆盘预防试验参考Schwinn等方法,准备直径5cm的培养皿若干,每皿加入10mL 蒸馏水;将甜瓜同一叶位的健叶制成直径1.5em的叶圆盘;将叶圆盘分别于提取液和对照中浸渍3min, 取出晾干后,背面向上漂浮在液面上,每皿5片,重复3皿.在每叶圆盘背面中心滴加l滴10L的孢子囊 悬浮液50,100个孢子囊),于培养室内培养7d(每天光照12h,温度18,22?),调查病情并计算防效. 病情调查方法:根据病斑面积占叶圆盘面积的百分率划分病级[1ol:0级,病斑面积--0;1级,0<病斑面 积?10%;2级,10%<病斑面积?20%;3级,20%<病斑面积?50%;4级,病斑面积>50%.采用以下公 式计算病情指数和防效,差异显着性比较均采用DMRT检验P<0.05). 病情指数=?(各级病叶数×各级代表值,调查总叶数×发病最重级代表值)x100% 防效=100%一(处理组平均病情指数,对照组平均病情指数)x100% 1.2.2.2治疗试验方法类似于预防试验,只是将叶圆盘未经提取液处理直接漂浮在液面上,接种培养2d, 产生水渍状病斑,用滤纸吸去表面水滴后,于叶圆盘背面病斑处滴加20L的提取液和对照溶剂,将病斑全 部覆盖.继续培养5d后,调查病情.病情调查方法及病情指数和防效计算同预防试验. 1.2.2.3内吸试验】每培养皿分别加10mL提取液并设对照,每皿加入5片叶圆盘, 背面向上漂浮在提 取液液面上,在叶圆盘背面中心滴加10L的孢子囊悬浮液.培养7d后,调查病情.病情调查方法及病情 指数和防效计算同预防试验. 1.2.2.4盆栽预防试验用小型喷雾器将提取液均匀喷洒于叶片正反面,直到提取液开始滴下为止;12h 后,将游动孢子囊悬浮液用喷雾器离叶片背面20cm处连续喷洒2次,套袋保湿24h后,去袋.每处理1 盆,重复3次,7d后调查病情.病情调查方法及病情指数和防效计算同预防试验,只是根据病斑占整个叶 片的面积的百分率划分病级. 2结果与分析 2.1具有抑菌活性植物提取液的筛选 采用室内叶圆盘测定方法,对30种植物不同部位的丙酮提取液进行筛选,结果发现侧柏叶,马尾松针 和泽漆茎叶混样的丙酮提取液对甜瓜霜霉病有较好的预防作用,7d后的预防率依次为100.0%,100.0%和 93.3%,对照药剂72%代森锰锌?霜脲氰we(1028.57I*g?m【『1)的防效为100.0%.其余27种植物的提取液 均无预防作用,另外试验结果表明所有植物提取液在接种病原菌后均无治疗作用和内吸作用(表2). 表2具有预防作用的丙酮提取液的筛选结果 Table2ThescreeningresultsOUtheinhibitioneffectoftheacetoneextracts'% 2.2盆栽试验结果 3种植物提取液的盆栽试验结果表明,马尾松针,侧柏叶,泽漆茎叶混样的丙酮提取液对甜瓜霜霉病 均有很好的预防作用,其防效分别为96.5%,95.2%和93.9%,对照药剂72%代森锰锌?霜脲氰WP(1028.57 Ixg?m)的防效为98.6%(表3). 164上海交通大学(农业科学版)第25卷 3讨论 通过对30种植物不同部位粗提液的室内叶圆盘实验.筛选出侧柏叶.马尾松针和泽漆茎叶混样3种 具有预防作用的丙酮提取液,但均无治疗作用和内吸作用.对3种植物提取液的盆栽预防试验,进一步确 定了这3种提取液的预防效果,并且表明这3种植物提取液的防效较为稳定. 在盆栽试验中,植物提取液的预防效果尽管不如72%杜邦克露,但仍表现出了较好的防效,而且植物 提取物是一种混合物,其有效活性成分尚需进一步分离纯化,其含量显然远不如化学农药高,并且还可以 借助结构改造等技术提高其活性,因此仍具有开发利用价值. 本研究为植物源杀菌剂的研制提供了材料,至于其活性成分的分离纯化和结构鉴定是一个比较复杂 的过程.需要继续研究.在整个实验过程中,所有提取液在进行叶圆盘试验和盆栽实验时,均以20%丙酮 为最终溶剂.可能对环境和植物的有一定的影响,因此有关溶剂方面也需要进行优化.另外实验中还存在 不足之处.如:植物提取液对孢子囊及孢子的影响有待于进一步行研究;文中只采用丙酮为溶剂制备提取 液并用于筛选,在一定程度上存在漏筛的可能性.而且由于受到当地植物资源的影响,只能对植物的某些 部位进行研究. 参考文献 【1]李玉平,龚宁,江志利.大花金挖耳草杀菌活性的进一步研究【J].西北农林科技大学(自然科学版),2004,32(2):35?38. 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