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MS培养基母液的配制与保存(3学时)

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MS培养基母液的配制与保存(3学时)MS培养基母液的配制与保存(3学时) & MS 3 1、通过MS培养基母液的配制,掌握配制与保存培养基母液的基本技能。 2、掌握培养基各种母液的保存方法。 1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱; 2、用具:烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签; 3、试剂:95%酒精,0.1-1N NaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物,蒸馏水。 (一)母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。 优点:(1)保证各物质成分的准确性。 (2)便于配置时...

MS培养基母液的配制与保存(3学时)
MS培养基母液的配制与保存(3学时) & MS 3 1、通过MS培养基母液的配制,掌握配制与保存培养基母液的基本技能。 2、掌握培养基各种母液的保存方法。 1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱; 2、用具:烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签; 3、试剂:95%酒精,0.1-1N NaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物,蒸馏水。 (一)母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。 优点:(1)保证各物质成分的准确性。 (2)便于配置时快速移取。 (3)便于低温保藏。 1、MS大量元素母液(10X) 称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。 化学药品 1升量 10升量 NH? NO 1650 mg/L 16.5g 43 KNO? 1900 mg/L 19.0g 3 ? CaCl440 mg/L ?2HO 4.4g 22 ? MgSO370 mg/L ?7HO 3.7g 42 KH? PO 170 mg/L 1.7g 24 2、MS微量元素母液(100X) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 1升量 10升量 ? MnSO?4HO 2223mg 22.3 mg/L 4 ( MnSO?HO) (21.4 mg/L) 24 ? ZnSO86mg ?7HO 8.6 mg/L 42 ? CoCl?6HO 0.025mg/L 0.25mg 22 ? CuSO?5HO 0.025 mg/L 0.25mg 42 ? NaMoO?2HO 0.25 mg/L 2.5mg 224 KI ? 0.83 mg/L 8.3 mg H? BO 62 mg 6.2 mg/L 33 注意:CoCl?6HO和CuSO?5HO可按10倍量(0.25 mgX10=2.5 mg)或100倍量(25 2242 mg)称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml(即含0.25 mg的量)加入到母液中。 3、MS铁盐母液(100X) 373 mg ?EDTA 37.3 mg/L 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 2 FeSO278 mg ?7HO 27.8 mg/L 42化学药品 1升量 10升量 注意配制时,应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,Na 可适当加热。混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡, 至产生深黄色溶液,最后定容,保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液(100X) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 1升量 10升量 5mg ? 烟酸 0.5 mg/L 5mg ? 盐酸吡哆素(VB6) 0.5 mg/L ? 盐酸硫胺素(VB1) 100 mg/L 1 g ? 肌醇 2 mg/L 20mg ? 甘氨酸 5、生长调节剂 单独配制,浓度为1-5 mg/ml(书中为0.5-1mg/ml),一般配成4 mg/ml 。 配制培养基母液时注意事项: ?一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合; ?配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水; ?药品应用化学纯或分析纯; ?溶解生长素时,可用少量0.5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5 –1N的HCl加热溶解。 (二)母液的保存 1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中,贴好标签,注明各培养基母液的名称、浓缩 倍数、日期。注意将易分解、氧化的溶液,放入棕色瓶中保存。 2、贮藏:4?冰箱。 1、写出实验报告。 2、配制培养基母液时应注意哪些事项?
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分类:生产制造
上传时间:2017-09-15
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