MS培养基母液的配制与保存(3学时)
& MS
3
1、通过MS培养基母液的配制,掌握配制与保存培养基母液的基本技能。 2、掌握培养基各种母液的保存方法。
1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱;
2、用具:烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签;
3、试剂:95%酒精,0.1-1N NaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物,蒸馏水。
(一)母液的配制
母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。
优点:(1)保证各物质成分的准确性。
(2)便于配置时快速移取。
(3)便于低温保藏。
1、MS大量元素母液(10X)
称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。
化学药品 1升量 10升量
NH?
NO 1650 mg/L 16.5g 43
KNO? 1900 mg/L 19.0g 3
? CaCl440 mg/L ?2HO 4.4g 22
? MgSO370 mg/L ?7HO 3.7g 42
KH? PO 170 mg/L 1.7g 24
2、MS微量元素母液(100X)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量
? MnSO?4HO 2223mg 22.3 mg/L 4
( MnSO?HO) (21.4 mg/L) 24
? ZnSO86mg ?7HO 8.6 mg/L 42
? CoCl?6HO 0.025mg/L 0.25mg 22
? CuSO?5HO 0.025 mg/L 0.25mg 42
? NaMoO?2HO 0.25 mg/L 2.5mg 224
KI ? 0.83 mg/L 8.3 mg
H? BO 62 mg 6.2 mg/L 33
注意:CoCl?6HO和CuSO?5HO可按10倍量(0.25 mgX10=2.5 mg)或100倍量(25 2242
mg)称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml(即含0.25 mg的量)加入到母液中。
3、MS铁盐母液(100X)
373 mg ?EDTA 37.3 mg/L 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 2
FeSO278 mg ?7HO 27.8 mg/L 42化学药品 1升量 10升量
注意配制时,应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,Na
可适当加热。混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡,
至产生深黄色溶液,最后定容,保存在棕色试剂瓶中。
4、MS有机物母液(100X)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量
5mg ? 烟酸 0.5 mg/L
5mg ? 盐酸吡哆素(VB6) 0.5 mg/L
? 盐酸硫胺素(VB1)
100 mg/L 1 g ? 肌醇
2 mg/L 20mg ? 甘氨酸
5、生长调节剂
单独配制,浓度为1-5 mg/ml(书中为0.5-1mg/ml),一般配成4 mg/ml 。
配制培养基母液时注意事项:
?一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合;
?配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;
?药品应用化学纯或分析纯;
?溶解生长素时,可用少量0.5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5
–1N的HCl加热溶解。
(二)母液的保存
1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中,贴好标签,注明各培养基母液的名称、浓缩
倍数、日期。注意将易分解、氧化的溶液,放入棕色瓶中保存。 2、贮藏:4?冰箱。
1、写出实验报告。
2、配制培养基母液时应注意哪些事项?
本文档为【MS培养基母液的配制与保存(3学时)】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑,
图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
该文档来自用户分享,如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服,我们会及时删除。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。