11消毒和灭菌处理过程[资料]

11消毒和灭菌处理过程[资料] 消毒和灭菌处理过程 定义 关于消毒和灭菌有许多不同的术语，下面是生物安全中较常用的: 抗菌剂(antimicrobial)能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。 防腐剂(antiseptic)能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。防腐剂常应用于体表。 生物杀灭剂(biocide) 所有能够杀死生物体的制剂的统称。 化学杀菌剂(chemical germcide)用于杀死微生物的化学品或化学混合物。清除污染去除和,或杀死微生物的任何过程。 消毒剂(disinfectant)用于杀死微生物的化学品或化学混合物，但不一定杀死其孢子。消毒剂常用于非生命物体或其表面。 消毒(disinfection)杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其孢子。 灭菌剂(microbicide)能够杀死微生物的化学品或化学混合物。该词常常可以代替“生物杀灭剂”、“化学杀菌剂”或“抗菌剂”。 杀孢子剂(sporocide)用于杀死微生物和孢子的化学品或化学混合物。 灭菌(sterilization)杀死和,或去除所有微生物及其孢子的过程。 11.1 实验室材料的清洁 清洁是指去除污垢、有机物和污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿布拖擦。尘土、污物以及有机物是微生物的栖身之所，并可能影响除 污染剂(抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂)的作用。 必须通过预清洁才能实现洗涤和灭菌的目的。许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。预清洁时必须小心，以避免暴露于感染性物质中。 预清洁时必须使用与以后使用的杀菌剂化学性质上相容的物质。普遍采用的是相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。 11.2消除局部环境的污染 可以联合使用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、用具和设备的污染。清除表面污染时可以使用次氯酸钠(NaClO)溶液;含有 0.1,有效氯的溶液用于普通的环境卫生设备， 而当处理高危环境时，建议使用高浓度(5g/L)的溶液。在清除环境污染时，含有3,过氧化氢溶液也可以作为漂白剂的代用品。 清除污染时气体需要与物体表面至少接触 8 小时。熏蒸后，该区域必须彻底通风后才能允许人员进入。在通风之前需要进入房间时，必须带适当的防毒面具。可以采用气态 碳酸氢铵来中和甲醛。 采用过氧化氢溶液对小空间进行气雾熏蒸同样有效，但需要专门的蒸汽发生设备。 11.3 清除生物安全柜的污染 清除I级和II级生物安全柜的污染时，要使用能让甲醛气体独立发生、循环和中和的设备。应当将适量的多聚甲醛(空气中的终浓度达到0.8,)放在电热板上的长柄平锅中(在生物安全柜外进行控制)。然后将含有比多聚甲醛多 10,的碳酸氢铵置于另一个长柄 平锅中(在生物安全柜外进行控制)。在柜外将该平锅放置到第二个加热板上，在安全柜外将电热板接上插头通电，以便需要时在柜外通过开关电源插头控制盘子的操作。如果相对湿度低于70,，在使用强力胶带(如管道胶带)密封前部封密板前，还要在安全柜内部放置一个开口的盛有热水的容器。如果前部没有封密板，则可以用大块塑料布粘帖覆盖在前部开口和排气口以保证气体不会泄漏进入房间。同时供电线穿过前封密板的穿透孔时须用管道胶带密封。 将放有多聚甲醛平锅的加热板插上插头接通电源。在多聚甲醛完全蒸发时拔掉插头以 断电。熏蒸的生物安全柜至少静置6小时，然后给放有第二个平锅的 加热板插上插头通电，使碳酸氢铵蒸发。然后拔掉电源插头，接通生物安全柜电源两次，每次启动约2秒钟来让碳酸氢铵气体循环。在移去前封密板(或塑料布)和排气口罩单前，应使生物安全柜静置30 分钟。使用前应擦掉生物安全柜表面上的残渣。 11.4 洗手/清除手部污染 处理生物危害性材料时，只要可能均应戴合适的手套。同时，实验室工作人员仍然需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前必须洗手。 大多数情况下，可使用普通的肥皂和水彻底冲洗手部。在高危情况下，应使用杀菌皂液;手要完全抹上杀菌皂液，搓洗至少10秒种，用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干(如果有条件，可以使用暖风干手机)。 应使用肘控的水龙头洗手。如没有安装，应使用纸巾或毛巾来关上水龙头，以防止再度污染干净的手。 如果没有以上推荐的洗手方法或洗手不方便，应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。 11.5消毒和灭菌方法 物理和化学的去污染方法包含三个方面:加热、液体去污剂、蒸气和气体。 11.5.1 加热 湿热和干热被推荐为杀菌最有效的方法. 在一般环境下，高压灭菌器加热到121?快 速产生蒸汽是最方便的方法。干热160?-170?，2-4小时在不具有渗透性、非有机体的物质(如玻璃)是可行的净化方法, 但是甚至在有机体或非有机体的浅层也不能被绝缘。焚烧是另一种净化方法。焚烧对人和动物的病理性废物是一个有效的方法。实验室工作人员应对加热的固体和液体有害物的处理相当熟悉，并要注意如果滥用设 备那在高压下水蒸气将会喷射出来，因此只能在允许范围内使用。在高压蒸汽下被处理过的液体是非常热的，如果要从灭菌器中取出必须等处理后过段时间再取出;如果立即取出，会引起容器内的液体产生暴沸，并飞溅到处理容器的人员身上。 11.5.2 液体去污剂 在通常情况下, 足够浓度的液体去污剂常用于表面去污染，而液体废物的去污剂最终的处理是进入污水管道系统。液体去污剂的去污效果不佳，常常是因为有些因素(如 应用场所的温度、接触时间、pH、当时情况、播散状况、穿透能力、有机物的反应)没有被适当地考虑。这些因素中的一些很小的变化可能会造成去污剂的效力上大的不同。 因此甚至在很有利的情况下，当最终要求必须无菌时，液体去污剂也不是完全可信赖的去污方法。 有许多可用的液体去污剂在商品名上有很大的变化。在通常情况下, 这些去污剂能被分类为:卤素、酸和碱、重金属盐、四铵化合物、苯酚、乙醛类、酮类、酒精和铵。但是去污剂的作用越大，它的危害性可能也越大(如腐蚀性)。对于所有传染性的情况没有一种(去污剂)是具有同等作用和效力的。 使用普通原料的消毒剂处理中必须特别小心。 从原料到制成可用的溶液对工作人员的操作必须考虑到有潜在的危险，要进行安全培训以及合适的个人防护设备保证毒性不接触眼睛、皮肤和呼吸系统。 11.5.3蒸气和气体 蒸汽和气体的种类决定了去污剂的性质，其中最常用的是甲醛和乙烯氧化物。当在一个密闭的系统中，在一定的温度、湿度控制下，它们能发挥很好的去污作用。蒸汽和气体去污剂最初被用于生物安全柜和与之相关的空气处理系统和空气过滤系统、抵抗液体表面去污剂渗透的大容积或固定的设备、或用其他去污方法会受到损害的仪器和光学(设备)和门、建筑物和与之相关的空气处理系统等。 为了避免甲醛和乙烯氧化物蒸汽的吸入，(贮存)这些化学品的容器的材料应尽可能地限制这些蒸汽(的溢出)和应放置在适当通风的化学品贮存区。当准备进行稀释和取用这些化学品时，操作者应按 操作规程 操作规程下载怎么下载操作规程眼科护理技术滚筒筛操作规程中医护理技术操作规程 严格操作以防止(这些化学品)的暴露，必要时应穿戴呼吸防护装置。乙烯氧化物已归入(对人体具有)潜在危害的诱变剂;甲醛也(对人体)具有毒性和超敏性反应。乙烯氧化物的用途非常有限，通常用于外科和临床领域。 11.6高压灭菌器程序 湿热引起蛋白质的变性比干热所需要的温度低且时间短。最主要的物理去污控制作用之一是在一个密闭的小室(空间)里高压灭菌器产生湿热和高压。大多数情况，下列组合可以确保高压灭菌器的灭菌效果。 a.134?、3分钟 b.126?、10分钟 c.121?、15分钟 d.115?、25分钟 应使用生物指示剂验证高压灭菌操作是否达到效果。当操作高压灭菌器时 必须穿戴个人防护设备(简称PPE)如橡胶围裙和抗热防水的手套。高压 灭菌器里物品的放置应保证蒸汽能穿透至需消毒的所有部分，所以物品间 不能靠得太紧或互相阻塞，否则不能保证灭菌效果，而且当从灭菌器中移 出物品时由于受压严重可能引起(人身)伤害的危险。 含有如酚类和氯仿等化学品的消毒物品不允许放入高压灭菌器内灭菌。 11.7化学去污剂的特征(特性) 具有去污特性的最主要的化学品有粉剂、晶体或浓缩液体。这些化学品可以加水作为表面去污剂，其中有些去污剂加到足够量时可用于大量废液的去污消毒。在室温下气态的化学去污剂可以作为空气去污剂，另一些在温度升高时变成气体的(化学品)能作 为水表面或空气去污剂。 化学去污剂在灭活微生物时可能会产生一种或多种副作用，如: 蛋白凝固和变性、溶血、酶的粘合或酶实质被酶底物氧化、或毁坏而灭活。 化学去污剂的作用可能会因下列因素而改变:主要成分的浓度、接触时间、pH、温度、湿度和外界有机物的存在。这些因素对化学去污剂如何成功去污的处理依赖于化学去污剂对靶微生物的最小灭活和分析系统敏感度限定范围的杀菌显示效果。去污剂使用无效的主要原因是对微生物的最初接触后作用无效。液体去污剂对某一成分去污时，如果这一成分表面有一些微小的气泡，因气泡下的区域是干燥的，其中的微生物就不能被杀灭。如果在这一成分上有油脂斑点，铁锈或污垢样，那么去污剂将不能接触到这些保 护层下的微生物。将这一成分浸入 去污剂进行净化是有效果的。去污剂应对物体整体表 面主要成分去污。 11.7.1 一些常用去污剂的性质 乙醇 乙醇的水溶液最有效的使用浓度约为70,(V/V);但是，浓度低于50%和高于90%则无效。乙醇在杀菌作用的同时对蛋白质有缓慢轻微的变性作用。然而，乙醇对含脂类病毒是有效的消毒剂。在消毒剂的功效试验中接触十分钟是常用的指标。因为乙醇具有高挥发性，去污剂的接触时间为十分钟是必须的。因为这个原因，血液耐受病原体标准(文件)不认为乙醇对表面具有有效的消毒作用。一般来说异丙醇对细菌消毒作用更有 效;乙醇对病毒的消毒作用更有效。 甲醛 甲醛作为市售消毒剂通常是浓度为37%的福尔马林液，或是被称为多聚甲醛的固体聚合物。当主要成分中甲醛含量在5%时为有效的液体消毒剂。甲醛在冷藏温度下的大量失活，在实验室中甲醛溶液由于气味的刺激性而难于使用。从甲 但是甲醛蒸汽醛溶液中产生的蒸汽对建筑物或门等空间环境是有效的消毒剂， 遇水可在其表面聚合成多聚甲醛，多聚甲醛性质稳定但令人不快。多聚甲醛加热再聚合能释放甲醛气体。当(周围)空气 中湿度较低时，甲醛气态释放少于表面残余物的聚合和熏蒸时间短于气态情况。 苯酚 苯酚自身通常不以一种消毒剂而存在。它的气味稍有些令人不快和粘稠感，粘的成分会残留在被处理物的表面。在蒸汽杀菌中这个现象特别明显。尽管苯酚自身的用途不 是很广，但苯酚的类似物和苯的化合物是常用消毒剂的基础。苯化合物对一些病毒、真 菌、植物细菌，包括立克次氏体是有效的消毒剂。一般来说苯的化合物对细菌孢子无效。 四铵化合物或四铵(物) 试验和应用了四十多年后，至今对于四铵物作为消毒剂的功效还有很多的争论。这些阳离子去污剂是很强的表面活性剂并对含脂病毒较有效。四铵物将黏附蛋白质以使溶液稀释并在蛋白质存在时迅速释放效力。四铵物能被诸如肥皂类的 阴离子去污剂抑制。它们的优点是无毒，无嗅，稳定，无色，对金属无腐蚀和价格低廉。 氯 卤素对许多微生物有广泛的杀灭作用，包括细菌孢子。 氯和蛋白质结合能快速降低溶液中现存的蛋白质浓度。自由氯是作用的有效因子，它是一个强氧化剂且对金属有腐蚀性。氯溶液必须现配现用。氯消毒剂中次氯酸钠是常用的基本物质。 碘酒 碘酒和氯的性质是相同的。用于实验室的最常用的消毒剂组合之一是碘结合物，与Wescodyne结合可能是最常用的。制造商推荐的Wescodyne稀释范围是1.5,4.5克/升水(即有效碘为25,75ppm)。在这个范围内的少量自由有效碘能被存在着的无关蛋白迅速 吸收。含 75 ppm有效碘的(化合物)对表面和水的清洁处理是有效的，但是假如一些相关蛋白存在则较为困难。对于碘结合物如Wescodyne, 按照制造商的说明是危险品。碘结合物的浓度越高则实际作用越低，正如结合了分子后碘就被束缚了一样。用于洗手和杀孢子剂时，被推荐稀释成Wescodyne 1,10于50%乙醇中(一种相当好的自身去污剂)。有效碘为1,600 ppm，在这个浓度下所有微生物中与之相关的部分都会被迅速灭活。 11.7.2 可选择的化学消毒剂 没有一个单一的化学消毒剂或方法对所有的情况都是有效和实用的。在选择化学消毒剂和消毒程序之前必须考虑消毒的目的和(消毒剂)间的互相影响因素及最终要达到的目的。消毒程序的选择将从以下问题的 答案 八年级地理上册填图题岩土工程勘察试题省略号的作用及举例应急救援安全知识车间5s试题及答案 中得到信息: ? 靶有机体是什么, ? 用什么消毒剂，什么形式能灭活靶有机体, ? 要求灭活到什么程度, ? 将靶有机体悬浮在什么溶剂中,(如:单一或混合液，固体多孔渗水的表面， 和/或 空气介质), ? 什么是有机体预期的最高浓度, ? 作为液体，蒸汽，或气体的消毒剂接触有机体时发生作用的持续时间, ? 要考虑物质的兼容性受什么限制, ? 可使用什么浓度消毒剂，消毒剂的即刻实用性预试验，或在预试验前有充足 的时间来配置至可用工作浓度的消毒剂的稳定性, 11.7.3 一些液体消毒剂的特性表: 灭活 重要特性 应用 四铵化合物.Cpds 0.1-2.0% + + + + + + + + + + + 酚 Cpds 1.0-5.0% + + b + + + + + + + + + + + 氯 Cpds 500 ppma + + + + + + + + + + + + + + + + 碘伏 25-1600ppma + + + + + + + + + + + + + + + 乙醇 70-85% + + b + + + + + + + + 异丙醇 70-85% + + b + + + + + + + + 甲醛 0.2-8.0% + + + + + + + + + + + + + 戊二醛 2% + + + + + + + + + + + + + + a 可利用的卤素 b 依赖病毒变异的结果 c 从光和空气中的防护 d 通常相配，但考虑在联结物质上从残余物和效应的干扰如载片的胶粘剂。 e 在制造商的文献中认为被皮肤或口腔或两者都请注意在消毒剂的功效试验中接触时间为10分钟是一般常用的。 11.8 废弃物处理 废弃物是指将要丢弃的所有物品。 实验器材和废弃物处置应由专人负责，按生物废弃物处理办法实施(附录 E)。实验室污水须经无害化处理后排放。实验用一次性个人防护用品和实验器材、弃置的菌(毒)种、生物样本、培养物和被污染的废弃物应在实验室同一建筑内消毒灭菌，达到生物血安全后再按感染性废弃物收集处理。实验用非一次性个人防护用品和实验器材，应放置在有生物安全标记的防漏袋中送至指定地点消毒灭菌后方可清洗。运送过程中应防止有害生物因子的扩散。经生物无害化处理 后的废弃物包装必须符合要求，并有中文标签，标签内容包括产生部门、日期、类别 等。实验废弃物最终处置必须交由经市环保部门资质认定的医疗废物处置单位集中处置。 在实验室内，废弃物最终的处理方式与其污染被清除的情况是密切相关的。 对于日常用品而言，很少有污染材料需要真正清除出实验室或销毁。大多数的玻璃器皿、仪器以及实验服都可以重复或再使用。废弃物处理的首要原则是所有感染材料必须在实验室内清除污染、高压灭菌或焚烧。 用以处理潜在感染性微生物或动物组织的所有的实验室物品，在被丢弃前应 考虑的主要问题有: 1(是否已采取规定程序对这些物品进行了有效的清除污染或焚烧, 2(如果没有，他们是否以规定的方式包裹，以便就地焚烧或运送到其他有焚烧 设施的地方进行处理, 3(丢弃已清除污染的物品时，是否会对直接参与丢弃的人员，或在设施外对接 触到丢弃物的人员造成任何潜在的生物学或其他方面的危害, 11.8.1 清除污染 高压蒸汽灭菌是清除污染的首选方法，需要清除污染并丢弃的物品应装在容器中(如根据内容物是否需要进行高压灭菌和/或焚烧而采用不同颜色标记的可高压灭菌的塑料袋)。也可采用其他可以除去和/或杀灭微生物的替代方法。 11.8.2 污染性材料和废弃物的处理和丢弃程序 要对感染性物质及其包装物进行鉴别并分别进行处理，相关工作要遵守国家相关规定。废弃物可以分成以下几类: 1(可重复或再使用，或按普通“家庭”废弃物丢弃的非污染(非感染性)废弃 物。 2(污染(感染性)锐器---- 皮下注射用针头、手术刀、刀子及破碎玻璃;这 些 废弃物应收集在带盖的不易刺破的容器内，并按感染性物质处理。 3(通过高压灭菌和清洗来清除污染后重复或再使用的污染材料。 4(高压灭菌后丢弃的污染材料。 5(直接焚烧的污染材料。 11.8.3 锐器 皮下注射针头用过后不应再重复使用，包括不能从注射器上取下、回套针头护套、截断等，应将其完整地置于盛放锐器的一次性锐器中。单独使用或带针头使用的一次性注射器应放在盛放锐器的一次性容器内焚烧，如需要可先高压灭菌。 盛放容器的一次性容器必须是不易刺破的，而且不能将容器装得过满。当达到容器的四分之三时，应将其放入“感染性废弃物”的容器中进行焚烧，如果实验室规程需要，可先进行高压灭菌处理。盛放锐器的一次性容器绝对不能丢弃于垃圾场。 11.8.4高压灭菌后重复使用的污染(有潜在感染性)材料 任何高压灭菌后重复使用的污染(有潜在感染性)材料不应事先清洗，任何的清洗、修复必须在灭菌和消毒后进行。 11.8.5 废弃的污染(有潜在感染性)材料 除了锐器按上面的方法进行处理意外，所有其他污染(有潜在感染性)材料在丢弃前应放置在防渗漏的容器(如有颜色标记的可高压灭菌的塑料袋)中高压灭菌。高压灭菌后，物品可以放在运输容器中运送至焚烧炉。如果可能，即使在清除污染后，卫生保健单位的废弃物也不应丢弃到垃圾场。如果实验室中配有焚烧炉，则可以免去高压灭菌:污染材料应放在指导的容器(如有颜色标记的袋子)内直接运送到焚烧炉中。可重复使用的运输容器应是防渗漏的，有密封的盖子。这些容器在送回实验室再次使用前，应进行消毒清洁。 应在每个工作台上放置盛放废弃物的容器、盘子或广口瓶，最好是不易破碎 的容器(如塑料制品)。当使用消毒剂时，应使废弃物充分接触消毒剂(即不能 有气泡阻隔)，并根据所使用消毒剂的不同保持接触时间。盛放废弃物的容器盛 在重新使用前应高压灭菌并清洗。 污染材料的焚烧必须得到公共卫生、环保部门以及实验室生物安全的批准。