安捷伦1290超高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1290超高效液相色谱仪操作规程 维 和 药 业 安捷伦1290 Infinity型超高效液相色谱仪使标题 生效日期 用、维护、保养规程 起草人 审核人 批准人 起草日期 审核日期 批准日期 颁发部门 编号 复印份数 分发至 目的:建立一个安捷伦1290 Infinity型高效液相色谱仪使用、维护、保养规程，保证 检验人员能按规程正确使用仪器，确保仪器的准确性、精密度。防止仪器损坏， 延长使用寿命，保证仪器正常运行。 范围:适用于安捷伦1290 Infinity型高效液相色谱仪的使用、维护和保养。 责任:质量管理部。 程序: 1.开机 1.1 打开计算机，进入 Windows XP 画面。 1.2 打开Agilent 1290 Infinity HPLC 各模块电源。 1.3 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与 Agilent 1290 Infinity HPLC 通讯。 1.4 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”、“系统视图”、“命令行”，使其命令前有“?”标志来调用所需的界面。 1.5 右键点击泵下面的瓶图标，选择“瓶填充” ，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。点击“确定”。 1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口 1”，然后点击“改变„”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。(如同时检测二个信号，则重复，选中“信号窗口 2”。) 2.排气 2.1 首先在泵模块单击右键，在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道(保证是开的)。 2.2 右键点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制。 2.3 勾上清洗，并且输入流量、时间、比例，开启“泵”、“清洗”功能，点击“确定” ，就可以排空管道。排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。 2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择开启“注入” ，然后点击确定。此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续 20 次自动停止。 3.编辑数据采集方法 3.1 开始编辑完整方法: 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法„” 项，在方法编辑选项仅选择“仪器/采集”，点击“确定”，进图下一画面。 3.2 方法信息: 在“方法注释”中加入方法的信息(如:This is for test!)，点击 “确定”，进入下一画面。 3.3 进样方式选择 根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式，本机默认为“HipAls”。 3.4 泵参数设定: 在“流量”处输入流量，如 1.5ml/min，停止时间:10 min。在“溶剂B”处输入 70.0，(A=100-B) ，也可“添加”一行“时间 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf ”，编辑梯度。在“压力限”处输入柱 秘密 第 1 页 共 4 页 维 和 药 业 标题 安捷伦1290 Infinity型超高效液相色谱仪使用、维护、保养规程 颁发部门 质量管理部 编号 SOP-ZL(WB)091-02 子的最大耐高压，以保护柱子。 3.5 自动进样器参数设定: 选择合适的进样方式， 如:“进样体积 1.0ul ， 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能;“进样量1.0ul，针清洗后进样”----此方式有洗针功能，“针清洗”一般选择为“冲洗端口，时间3.0秒” 。 3.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面，如无特殊规定，左侧、右侧设置成同样温度，使柱箱温度左右一致。 3.7 DAD检测器参数设定: 检测波长: 254nm，带宽=4nm， 参比波长=360nm，带宽=100nm; 检测波长:一般选择最大吸收处的波长。样品带宽: 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域 。 参比带宽:至少要与样品信号的带宽相等， 许多情况下用100nm作为缺省值。峰宽(响应时间):其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高;宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。可以开启光学单元温度控制;可以设定8通道信号等。 3.8 保存方法 从“方法”菜单，选中“方法另存为„”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。 4.单次样品运行 从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，输入操作者名称，如“安装 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 师” ;在“数据文件 ”中选择“手动”或“前缀/计数器”;在“样品参数”中填入“样品位置”、“样品名称”。 点击“确定”，在“仪器”菜单选择“系统开启” 。 等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”，进样。 5.面积百分比数据处理 5.1 选择界面 退出“仪器1联机”界面，双击“仪器1脱机”图标，进入数据 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 画面。 5.2 调用信号 从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名。点击“ 确定” ，则数据被调出。 5.3 做谱图优化: 从“图形”菜单中选择“信号选项” 。从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“ 确定” 。 5.4 积分优化: 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项。选择合适的“斜率灵敏度”、“峰宽”、“最小峰面积”、“最小峰高”。 从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。 如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。 点击左边“?”图标，将积分参数存入方法。 5.5 打印 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 : 秘密 第 2 页 共 4 页 维 和 药 业 标题 安捷伦1290 Infinity型超高效液相色谱仪使用、维护、保养规程 颁发部门 质量管理部 编号 SOP-ZL(WB)091-02 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项。 点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“面积百分比” ，其它选项不变。 点击“ 确定”。 从“报告”菜单中选择“打印报告” ，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告” 顶部的“打印”钮。 6.关机 关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。 关闭 Agilent 1290 各模块电源开关。 关闭稳压器。 7.定量数据处理 7.1 点击“方法”菜单，选择“调用方法L..”，在方法目录中选择要进行定量设定的方法， 该方法是经过积分和谱图优化过的方法。点击“确定”，则选择的方法被调出。 7.2 从“文件”菜单中选择“调用信号„”选项， 选中标样的数据文件名， 点击 “确定”，则数据被调出。检查确认积分和谱图优化的参数是否合适。 7.3 从“校正”菜单中选择，“新建校正表”按钮， 确认选项在“自动设定”，级别为“1”，点击“确定”。若要信号单独计算，则选择“校正模式”中的“每个信号单独计算”。 7.4 在覆盖现有校准表中对话框中，选择“是(Y)”。若方法中没有旧的校准表，无此项。 7.5 则所有积过分的峰，其保留时间、峰面积按序显示在校准表中。依次输入化合物的名称、含量，校准曲线显示在右下方。可以设定参考峰等。若用内标方法定量，还须选择内标，点击“内标“下的区域，选择那个峰作为内标峰，指定每个色谱峰以那个内标为参比。点击“确定”。 7.6 在删除含量为零的行对话框中选择“是(Y)”。则校准表中未输入含量的峰从表中删除。 7.7 点击“校正”菜单，选择“校正设置”按钮，输入单位:如“mg/ml”;其它项不变。点击“确定”。 7.8 打印报告: 从“报告”菜单中选择“ 设定报告(R)„”选项。点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变。点击“确定”。----若是用内标法定量，则选“内标法”。 从“报告”菜单中选择“打印报告“，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”顶部的“打印”钮。---可以选择打印到文件中，如PDF格式。 7.9 若有多个浓度标样，则依次调出校正数据，调出每一个校正数据后，点击“校正”菜单，选择“添加级别“，第2级数入”2“，类推。 在校准表中输入每级的组份浓度。 7.10 在方法菜单中，选择“运行时选项表”，确认“标准数据分析选项”也被选中，点击“确定”。点击“保存”按钮，存储修改的方法。此方法包含校准表，建立完毕。 8.使用后填写使用登记。 9.HPLC使用过程中的注意事项 秘密 第 3 页 共 4 页 维 和 药 业 标题 安捷伦1290 Infinity型超高效液相色谱仪使用、维护、保养规程 颁发部门 质量管理部 编号 SOP-ZL(WB)091-02 9.1 流动相使用中的问题 9.1.1 要求使用色谱纯级的溶剂。 9.1.2 HPLC应使用超纯水，混合水溶液需用,0.2µm的滤膜过滤。水必须放在棕色瓶中，使用前要经过超声处理。由于水长时间放置易滋生细菌，因此应尽量使用新鲜制得的纯水。当有机溶剂的比例低于10%时，最好现用现配，放置不应超过三天。当纯水做为单独一元溶剂时，应每天更换。且长时间不用，该管道及滤头应保存在有机溶剂中。 9.1.3 注意过滤水相或有机相时选用不同的滤膜。常用0.45µm的滤膜，如果使用亚二微米颗粒色谱柱，检验使用0.2µm的滤膜。 9.1.4 四氢呋喃、醚类等有机溶剂应放在棕色瓶中，以防光照变质。 9.1.5 注意要定期更换、过滤容积，尤其是水相或缓冲盐流动相。 9.2溶剂转换问题 9.2.1反相色谱中溶剂转换 若系统及柱子中为纯甲醇(或乙腈)，如需换到缓冲液流动相，则至少应以20-30ml 90%的水/甲醇(或乙腈)作为过渡，以免流动相中的缓冲盐析出，造成系统压力过高，甚而可能堵塞管路及色谱柱。当实验结束，冲洗柱子时，同样也应该注意冲洗的溶剂与流动相的兼容性。 9.2.2反相色谱与正相色谱的转换 一般两种条件的转换中间一定要充足的溶剂转换，一般会选用与水和正己烷均能以任意比例混溶的异丙醇冲洗。如果异丙醇冲洗的时间不够，则可能会在检测器内形成油 珠状液滴。出现类似检测器内有气泡的症状。 9.3 避免的溶剂 9.3.1 卤化物碱金属溶液对不锈钢有腐蚀性的酸溶液。 9.3.2 高浓度的无机酸，例如:硝酸和硫酸。 9.3.3 能都形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物。 9.3.4 含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。 9.3.5 在有机溶剂中的有机酸溶液。 9.3.6 含有强络合剂的溶液。 9.3.7 四氯化碳和异丙醇或四氢呋喃混合液。 9.3.8 如果使用PEEK毛细管，还应该注意尽量避免使用二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃等有机溶剂。 秘密 第 4 页 共 4 页