实验17蛋白质含量测定（双缩脲法）一、目的掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理和
方法
快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载
。掌握分光光度计的使用方法。二、原理碱性溶液中双缩脲（NH2一co一NH一co一NH2）能与Cu2+产生紫红色的络合物，这一反应称为“双缩脲反应”。蛋白质分子中的肽键也能与铜离子发生双缩脲反应，溶液紫红色的深浅与蛋白质含量在一定范围内符合朗伯一比尔定律，而与蛋白质的氨基酸组成及分子质量无关。其可测定范围为1-l0mg蛋白质，适用于精度要求不高的蛋白质含量测定。Tris，一些氨基酸，EDTA等会干扰该测定。三、仪器、试剂和材料1．仪器（1)分光光度计（2）分析天平（3）振荡机（4）刻度吸管：1m1X2，5m1X2，10m1X1(5）具塞三角瓶：1OOml（6）漏斗：13个2．试剂（1）双缩脲试剂：取硫酸铜（CuS045H2O）1.5g和酒石酸钾钠（NaKC4H4O6.4H2O）6.0g，溶于500m1蒸馏水中，在搅拌的同时加入300m110%NaOH溶液，定容至1000ml，贮于涂石蜡的试剂瓶中。（2）0.05mol/L的NaOH。(3)
标准
excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载
酪蛋自溶液：准确称取酪蛋白0.5g溶于0.05mol/L的NaOH溶液中，并定容至100m1,即为5mg/m1的标准溶液。3．材料小麦、玉米或其他谷物样品，风干、磨碎并通过100目铜筛。四、操作步骤1．标准曲线的绘制取6支试管，编号，按下表加入试剂：试剂管号123456标准酪蛋白溶液（ml）00.20.40.60.81.0H2O（ml）10.80.60.40.20双缩脲试剂（ml）444444蛋白质含量（mg）012345震荡15min，室温静置30min，54Onm比色，以蛋白质含量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。2．样品测定（1）将磨碎过筛的谷物样品在80℃下烘至恒重，取出置于燥器中冷却待用。（2）称取烘干样品约0.2g两份，分别放入两个干燥的三角瓶中。然后在各瓶中分别加入5ml0.O5mol／L的NaOH溶液湿润，之后再加入20ml的双缩脲试剂，震荡15min，室温静置反应30min，分别过滤，取滤液在540nm波长下比色，在标准曲线上查出相应的蛋白质含量（mg）。从标准曲线上查得的蛋白质含量(mg)五、结果处理六、注意事项1．三角瓶一定要干燥，勿使样品粘在瓶壁上。2．所用酪蛋白需经凯氏定氮法确定蛋白质的含量。七、思考
题
快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题
双缩脲法测定蛋自质含量的原理是什么？—END—
浙公网安备 33021202002483