BDFACSVerS流式细胞仪实验流程开机—质控(PQC尸实验—数据处理—清洗—关机使用者在操作BDFACSVerS流式细胞仪实验时,务必按照以上流程进行,方可保证实验数据的准确性和仪器状态良好,除数据处理外不可随意缺失任一步骤。实验者所需准备的用品:1、流式上样管若干;2、1000丄加样枪一支、枪头若干;3、40呵细胞筛网。仪器平台提供以下用品:1、鞘液;2、Clean洗液;3、去离子水;5、CS&T微球。开机步骤开机前先将上样管取下清空废液桶Waste,鞘液筒Sheath内装FACSFIow鞘液至三分之二体积打开流式细胞仪右后侧的白色电源开关,仪器进行自检并预热,约需20min,完成后仪器状态灯显示绿色打开电脑,双击桌面FACSuite软件图标,输入用户名和密码,密码为bdadministrator,点击OK后进入软件主窗口左下角的联机状态显示为Connected(绿色),显示电脑已与仪器联机仪器质控PerformanceQC流程,每天一次配制微球:取一只流式管加入500ulFACSFIow鞘液,力口2滴CS&T微球。注意:滴加微球时不要滴在壁上,微球使用前要摇匀点击软件界面左边的快捷启动键“Setup&QC”图标;在Tube里选择PerformaneeQC选择正确的CS&TBeadLotID点击Start按钮,进样管处放置准备好的CS&T微球,点击continue;取下CS&T微球,放置装DI水的流式管;点击Yes查看质控
报告
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。清洗步骤所有实验结束后,选择Cytometry>DailyClean命令,进样管加入2mLFACSClean洗液,点击Continue;冲洗后,按照仪器提示,另一进样管加入3mL去离子水,点击Continue,等待仪器清洗完毕;备注:(一)清洗时所用清洗液和去离子水务必置于两支不同的干净上样管中,且清洗液的体积不得多于去离子水的体积。(二)如果做PI染色DNA实验,实验结束后要立即在Experiment中选择或新建一个Tube,放上3mLClean液,点击preview,高速运行5min,点击STOP之后再换上3mL装去离子水的流式管,高速运行10min,点击STOP关机步骤选择Cytometry>Shutdown命令,点击Yes仪器状态灯闪烁几秒后自动关闭,仪器状态灯变为琥珀色;进样口仍然保留3ml去离子水;选择File>Exit命令,退出FACSuite软件,退出计费系统;关闭流式细胞仪右后侧白色按钮。