精液与前列腺液检查PPT课件

体液检验（四） 实验诊断教研室 段玲 第四节精液检查 精液(seminalfluid)主要由精浆和精子组成。 精子由睾丸产生，在附睾内发育成熟，再经过输精管、射精管等一系列管道系统由尿道排出。 精浆主要由精囊腺、其次由前列腺，少量由附睾、输精管、尿道球腺和尿道旁腺分泌。 精液（semen） 精子（sperm） 精浆（seminl plasma） 精液组成成分—果糖、维生素、前列腺素、5-核苷酸酶、精胺、无机盐，各种酶等，提供营养和能量。 精液有形成分—除生殖细胞外，尚有少量白细胞、生殖道脱 落的上皮细胞。 精液检查的目的 1、评价男性生育能力； 2、诊断男性不育； 3、诊断男性生殖系统疾病； 4、观察输精管结扎术效果； 5、法医鉴定及人工受精观察。 (一)标本采集 精液采集前3-5天内不应有排精。 1、手淫法：将全部精液排于清洁干燥容器内，不宜用避孕套(因避孕套含有抑制精子活动的化学物质)，标本采集后应在30min内送检，寒冷季节应注意保温。 2、体外排精法：不主张采用 (二)一般性状检查 1、外观　　 参考值：灰白或乳白色，久未射精者可呈浅黄色。 临床意义： 黄色或棕色脓样精液：见于精囊炎或前列腺炎等； 鲜红或暗红色血性精液：见于生殖系统的炎症、结核和肿瘤等。 2、量 参考值：完全液化后一次射精量为2～6ml 临床意义：减少(＜1．5mL)，见于射精管道阻塞、先天性精囊缺陷、生殖道感染性疾病等。此外，脑垂体或睾九间质性病变也可引起。 增多(＞81nL)，见于禁欲时间过长或附属性腺机能亢进等. 3．凝固及液化 参考值：射精后凝固，液化时间<30min 临床意义: 精液排除后不能凝固，常见于射精管缺陷,先天性精囊缺如，精囊腺分泌凝固蛋白减少所致。 液化不完全：见于前列腺炎精液稠度 4、粘稠度 参考值：拉丝度<2cm 临床意义: 粘稠度减低：无精子症 粘稠度增加：常伴有不液化，影响精子活力 5．pH 参考值： 7.2～8.0(平均7.8) 临床意义：正常精液为弱碱性， pH＞8.0见于前列腺、精囊腺、尿道球腺及附睾的急性炎症。 pH<7.0常见于输精管阻塞、先天性精囊缺如及附睾的慢性炎症。 （三）、化学检查 1、 酸性磷酸酶（ACP） 　精浆中酸性磷酸酶主要来源于前列腺，又称前列腺酸性磷酸酶(PAP) 参考值：速率法：80～1000 U/ml；β-硝基酚法：＞200 U/次射精 临床意义：检测精浆中酸性磷酸酶有助于了解前列腺功能和对前列腺疾病的诊断。前列腺炎时PAP活性减低；前列腺肥大和前列腺癌时， PAP活性增高。当 PAP活性降低时，精子活力减弱，受精几率降低。 2、 乳酸脱氢酶-X（LDH-X） 　精浆中LDH-X活性最强，相当于LDH总活性的1/3。广泛存在，具有组织特异性，对精子的生成、代谢、获得能量和受精有重要作用。 参考值： LDH-X相对活性≥40%；绝对活度（1430±940）U/L。 临床意义：LDH-X活性与生殖功能有良好的正相关。对睾丸组织与精子细胞具有组织特异性，活性降低见于睾丸组织萎缩；少精或无精子症。因此， 检测LDH-X活性对男性不育的诊断是一项有价值的指标。 3、 精子顶体酶（acrosin） 　精子形成早期有丰富的顶体酶原mRNA表达，当精子头部进入卵子透明带时，精子获能，顶体酶原活化，启动肽链相互作用，促进顶体反应发生。 参考值： 速率法：(37±21)U/L 临床意义：顶体酶活性与精子活力、活率正相关，与精子畸形率，白细胞数等负相关。 4、精浆柠檬酸（seminal plasma acid citric） 　精浆中的柠檬酸主要来自前列腺，通过与钙离子结合，调节精浆中的钙离子浓度，与射精后精液凝固及液化过程密切相关。 参考值： 紫外比色法：50mol/次射精 临床意义：精浆中的柠檬酸含量除与射精后精液凝固及液化外，还与睾酮水平相关，测定柠檬素含量可评价前列腺功能和判断雄激素分泌状态。 5、精浆果糖（seminal plasma fructose） 　精浆果糖由精囊腺分泌，含量极其丰富，是精子能量的主要源。果糖含量高低直接影响精子的活力。由于雄激素水平影响精囊果糖的分泌，因此，精浆果糖含量不仅能反映精囊的分泌功能，而且还间接反映睾丸内分泌功能。 参考值：间苯二酚法：9.11～17.67 mmol/L,吲哚比色法：≥13mol/次射精 临床意义：精浆果糖含量为零，见于先天性输精管缺如或精囊缺如、两侧输精管阻塞和逆行射精；果糖含量降低，见于精囊炎和雄激素分泌不足。而单纯性输精管阻塞所致的无精症，果糖含量正常。 6、精浆锌（seminal plasma zinc） 　多种元素参与维护人体生殖内分泌系统的 功能，其中锌与男性生殖功能关系最密切，含 量远比血浆中高。主要存在于睾丸、附睾和前 列腺。 参考值： 原子吸收光谱法 163.02±45.26g/ml， 比色法：≥2.4mol/次射精。 临床意义：严重缺锌可导致不育症，精浆锌的测定可作为诊治男性不育症的重要参考指标之一。精浆中含量减少或缺乏见于： ⑴ 抑制脑垂体促性腺激素的释放。 ⑵ 影响性腺发育及性腺的内分泌功能。 ⑶ 影响精子生成、成熟、激活和获能过程。 (四)显微镜检查 1、涂片检查 方法： 待排出的精液完全液化、充分混匀后，取适量标本（约8-10ul)滴在载玻片上，再加盖1块22mmx22mm盖玻片，静置1分钟后，显微镜下观察。 临床意义： a、无精子症： 镜下未见精子，应将标本离心15min(3000r/min)后，取沉淀物再涂片，镜检后仍未见精子，则判定为无精子症。 b、结扎术是否成功: 1、精子活率：包括活率、活力 （1）活率：精子活动率是用完全液化精液直接涂片检查，在镜下观察100个精子，计数活动精子和不活动精子数，求出活动精子所占比值。 精子活动率=活动精子/活动精子数+不活动精子数×100% 参考值：>60% 临床意义：精子活率检查主要用于男性不育症的检查，精子活率＜40％，为男性不育症的原因之一。 常见于：1、精索静脉曲张 2、生殖系统感染 3、化学因素 4、物理因素 （2）活动力：用完全液化精液直接涂片置37℃ lmin后检查。精子活动力（sperm motility）是指精子向前运动的能力。 WHO将其分为四级： a级：精呈前向运动； b级：慢或呆滞的前向运动； c级：非向前运动； d级：不动。 　　 参考值： 正常精液，于排出后1h， a 和 b级精子之和≥50%、或a级精子>25%. 临床意义：精子活率与活动力与受精的关系十分密切，为男性不育症的原因之一。 精子活力降低见于： ⑴ 精索静脉曲张，静脉血回流不畅，睾丸组织缺氧等。 ⑵ 生殖系统非特异性感染等导致精子活力下降。 3、精子存活率(sperm activity rate) 指活精子所占的比例。 方法：伊红Y染色。不着色为活，着色为死。 参考值：存活率>=75% 临床意义：死精子>50%为死精子症 4、精子密度检测(sperm density) 原理： 指单位体积精液中精子的数目，亦称精子浓度，可用精子计数来表示，即用碳酸氢钠破坏精液的粘稠性，甲醛固定精子，精液定量稀释后，滴入计数池计数。精子数乘以精液量为一次排出精子的总数。 计数法： 0.38稀释液 加20ul精液（待精液液化后） 充分摇匀 计数池静置1~2分钟 以精子头部为准计数，中央大方格内四角和中央 N×20×5×10×106/L 精子总数=精子数/L×精液量（ml） 参考值：密度（20~200）×109/L 总数（40~60）×106/一次 临床意义:精子数量减少常见于： ①精索静脉曲张； ②重金属如铅、镉中毒和放射线损害；③睾丸疾病如睾丸畸形、萎缩、结核、炎症及肿瘤； ④输精管阻塞、精囊缺如； ⑤长期服用棉酚； ⑥使用抗癌药； ⑦50岁以上的老人精子数逐渐减少。 5、精子形态观察(sperm morphology) 原理： 可直接涂片或染色后观察。正常精子分头、体、尾三部分，外形略似蝌蚪，全长约为50～60μm，头部呈梨形，体部细长均匀，尾部长而弯曲。 异常精子包括：最常见头部异常，如大头、小头、尖头、双头及无定形头；体部异常包括分枝、双体、体部膨胀或消失；尾部异常有双尾、短尾、尾部弯曲呈螺旋形、尾部消失等。 参考值： 正常形态精子>30％ 临床意义：精液中正常形态的精子减少称畸形精子症，常见于精索静脉曲张、生殖系感染、放射线损伤、先天性睾丸疾病及某些药物如硝基呋喃妥英等所致。 6、未成熟的生精细胞观察 原理： 未成熟的男性生殖细胞指发育不完全的各阶段生精细胞，包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞。未成熟的生精细胞体较大，不具有尾部，应注意与白细胞和上皮细胞鉴别。 参考值： 未成熟生精细胞＜1％ 临床意义： 睾丸曲细精管基膜异常，生精细胞发育障碍导致无精子症，精液中无生精细胞，当曲细精管受到药物或其他因素影响时，生精细胞形态异常，可见较多的病理性生精细胞。 8、其他细胞观察 精液红细胞 正常参考值： 阴性(无)。 临床意义：大量出现，见于精囊结核、前列腺癌等。 精液白细胞 正常参考值：＜5个／HP。 临床意义： 增高，见于精囊炎、前列腺炎、前列腺结核等。 (五）精子功能检查 精子穿透试验：hemizona assay 正常精子 穿透女性生殖道分泌物 运行到达受精部位，获能和顶体反应 穿透卵细胞的放射冠、透明带、细胞膜 使卵细胞受精 受精 方法：体内穿透试验；体外穿透试验 1、体内穿透试验（in vivo penetration test) 亦叫性交试验 （PCT） 参考值： 性交4～８h后，正常活动精子数＞25/HP 临床意义：通过性交试验来判断精子在宫颈粘液中活动能力，了解不育症夫妇，精子-宫颈粘液的相互符合程度及其质量，如精子有凝集现象、代谢障碍、逆行射精等；如女性宫颈粘液异常，均会影响试验结果的正常。 2、体外穿透试验（in vitro penetration test) ⑴ 精子-宫颈粘液玻片穿透试验 参考值：精子穿透粘液，且90%以上精子呈直线运动 临床意义：精子-宫颈粘液体外试验， 可分别了解男性精子质量和女性宫颈粘液质量。 取液化精液 取排卵期宫颈粘液 ——————————————— 女方因素 ——————————————— 1．时间选择不当 非排卵期检查 2．内分泌异常 不排卵 3．性功能障碍 阴道痉挛 4．宫颈疾病 炎症、粘连、囊肿、手术史 5．黏液异常 粘滞度大、酸性黏液、脓细胞 6．免疫因素 抗精子抗体 ————————————————————— 男方因素 ————————————————————— 1．性功能障碍 阳痿、逆行射精 2．精液异常 精子密度低、活动差、畸形精子 3．免疫因素 精浆或精子表面结合有抗精子的抗体 ————————————————————— 精子异常症： 少精子症：精子浓度持续＜20×109／L称为少精子症。 无精子症：精液中未找到精子为无精子症。 畸形精子症：精液中正常形态的精子减少称畸形精子症。 死精子症：是指精液中死精子超过50%但其形态与数量可无明显异常。 弱精子症：a+b<50%、a级精子小于25%叫做弱精子症 。 血精症：精液呈红色、淡红、暗红或酱油色并含有大量红细胞，见于生殖系统的炎症、肿瘤或结核、结石所致。 脓精症：又称白细胞精子症。当精液镜检时发 现白细胞大于5/HP或白细胞计数大于1×109/L ，称为脓精症。 （六）计算机辅助精子分析（computer aided semen analysis, CASA） 由于精子在个体之间的异质性，尚不能建立自动化检测的标准。 精液检查标准方法：仍为合格的检验人员手工检测方法。 CASA结构：计算机、视屏、与录像机相连接的显微镜 功能：确定和跟踪个体精子细胞活 动、计算精子“运动学”参数。 设计参数：精子浓度、活动精子百分率、精子头运动轨迹图和力度、精子头部形态等。 优点：提高精液检查的速度 客观性结果评价 提供手工不能测定一些参数 易于实验室之间质量控制   不足：精子浓度准确性，受精液中细胞成分和颗粒物质等的影响；因此，精子数量，仍推荐手工血细胞计数池计数。 第五节前列腺液检查 前列腺（prostate）是男性生殖器官中最大的附性腺。 前列腺液(prostatic fluid)是精液的重要组成部分，约占精液的30％。 前列腺液的主要成分有无机盐、卵磷脂、蛋白质、酶，并有少量的上皮细胞和白细胞。检查前列腺液可帮助诊断前列腺炎、前列腺脓肿、前列腺结核、前列腺癌等。 前列腺生理功能有： ①内分泌功能； ②外分泌功能； ③运输功能； ④参与能量代谢； ⑤抑制细菌生长； 前列腺液检查用于： 1、前列腺炎 2、前列腺结核 3、前列腺癌辅助诊断和疗效观察 4、性传播性疾病 （一）标本的采集 前列腺液标本一般有临床医生行前列腺液按摩术后获得。可直接涂于玻片上或收集在洁净的试管中，并立即送检。 3日内避免性交，前列腺按摩收集前列腺液，细菌学检查应收集于无菌瓶内。 (二)一般性状检查 1．量 正常成年男性经前列腺按摩一次可采集数滴至lml前列腺液，前列腺炎时，其量减少甚至采不出。 2．颜色和粘稠度 正常前列腺液稀薄、呈乳白色。 黄色或淡红色的粘稠分泌液，常见于前列腺炎； 红色为混有血液或血性分泌物，见于前列腺结核、前列腺癌、前列腺炎和精囊炎，也可由按摩过度引起。 （二）显微镜检查microscopic examination 1．直接涂片检查（未染色标本） （1）卵磷脂小体lecithin bodies 形状：淡黄色、圆球状与脂滴相似，发亮，折光性强，分布均匀，大小不一 正常：卵磷脂几乎满视野/高倍镜下 临床： 前列腺脓肿——明显下降且分布不均 前列腺炎——下降或消失 报告在高倍视野中分布的数量。 “+”： 布满全视野++++ 布满3/4 视野+++ 布满1/2 视野++ 布满1/4 视野+ （2）细胞 1）红细胞：极少、< 10个/HPF 临床：增加见于前列腺炎、结核、结石和恶性肿瘤。 2）白细胞：正常白细胞小于10个/HPF 临床：大于10/HPF，即可诊断为前列腺炎。白细胞成蔟分布是慢性前列腺炎的指征之一。 3）上皮细胞：前列腺脓肿时，可见大量成堆的白细胞和上皮细胞。 4）前列腺颗粒细胞：前列腺液中可见体积很大的细胞，内含有多量的卵磷脂小体,在老年人和患有前列腺炎患者增多。 （3）淀粉样体starchy bodies 是大小不一，层状构造的嗜酸小体，园或卵圆形，微黄或微褐色。 临床意义：一般随年龄增加而增加，可与胆固醇结合形成前列腺结石。 （5）结石：主要见碳酸钙-胆固醇，磷酸钙磷酸精胺 （6）其它：滴虫、细菌 （4）精子：按摩时压迫精囊 2．涂片染色检查 瑞氏、H-E或巴氏染色。适合炎症变性的细胞和癌细胞，有助于前列腺炎和恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断。 3、微生物学学检查 前列腺液直接涂片：革兰染色和抗酸染色，查淋病双球菌。 培养： 最常见葡萄球菌；其次链球菌、革兰阴性杆菌、淋病奈瑟，结核分支杆菌。 性传播疾病：染色、培养或免疫学方法检查淋病和支原体、衣原体。 正常的前列腺液一般性状和参考值：　 颜色 淡乳白色性状稀薄液体，半透明 pH 6．3～6.5 红细胞＜5个／HP 白细胞＜10个／HP 卵磷脂小体多量或满布视野 细菌阴性 思考题： 1.何谓无精子症？ 2.精液的组成？ 3. 精液的ph值得临床意义？ 4. 什么细胞是慢性前列腺炎的特征？ 5. WHO将精子活力分几级？如何表示? 6.何谓精子密度? 7.无精子症的原因？ 8.前列腺液中卵磷脂小体的报告形式?