淀粉含量测定
一、原理
淀粉高温糊化可溶性增加，高氯酸提取后，在加热条件下强酸使之降解为葡萄糖，再脱水生成糠醛衍生物，后者可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物，在可见光620nm处有最大吸收。
二、试剂
1、9.2N高氯酸：790ml高氯酸定容至1000ml
2、蒽酮-硫酸溶液：同可溶性糖：蒽酮-硫酸溶液：150毫克蒽酮溶于100ml稀硫酸（76ml浓硫酸加30ml水中，无论温度高低，加入蒽酮所得溶液效果相同，故可配制-冷却或冷却-配制），冷却至室温（或在冷水中冷却），贮于具塞棕色瓶内，冷藏，可使用 3～4周（溶液失效：颜色由明黄色即200ul黄色枪头的颜色向绿色转变，失效程度越高绿色越明显，可由比色法来快速确定）。
3、淀粉
标准
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液及标准曲线绘制
（1）称取400mg可溶性淀粉于40ml水中，稍加水浴（>50℃）使之溶解后定容至100ml
（2）吸取25、50、100、、150、200ul标准液定容至400ul，即为25、50、100、150、200ug/ml溶液，各浓度重复3次。（对于小麦籽粒：吸取6.25、12.5、25、37.5、50ml标准液定容至100ml，即为250、500、1000、1500、2000ug/ml溶液，各浓度重复三次）
（3）同下。以OD值为横坐标，淀粉浓度为纵坐标，绘制标准曲线。Y=275.48x-7.1079 R2=0.9993
三、步骤
水：高氯酸=3:2，维持这一比例，根据实验需要可任意变换体积，保证摇匀后管壁上较少残渣
有的实验
方法
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要求不断震荡（摇床），经试验证明，摇匀后静置10min效果更好，因为壁上少有残渣
3ml水，100℃水浴20min
可溶性糖提取后残渣80℃烘干
叶片由于粉碎效果较好，极易成块，往往在3次提取后仍有大块存在，影响提取效果，故水浴前捏碎大块
经试验证明，加入水后无需摇匀，即可水浴，结果相同
2ml 9.2N高氯酸，摇匀，静置10min，4000rpm离心15min
提取过程中会发现有相当一部分样品变成蓝黑色，这是样品被高氯酸氧化，属正常现象，不影响测量结果
转移时有少量残渣进入容量瓶，不影响结果，但在吸取样液时务必不能将残渣吸入，残渣中含有纤维素、半纤维素在加热条件下强酸亦使之降解为葡萄糖
2.4ml水和1.6ml 9.2N高氯酸，摇匀，静置10min，离心，转移
提取3次的原因可能是，目前离心机转速最高为4000rpm，相当一部分样品离心效果较差，转移不彻底，提取2次会有较多残留，造成数值相差较大（P<0.05）
2.4ml水和1.6ml 9.2N高氯酸，摇匀，静置10min，离心,转移
蒽酮-硫酸溶液做空白对照，结果与正规做法相同
定容，摇匀，吸取40ul加入4ml蒽酮-硫酸溶液中，90℃煮15min，冷却后620nm比色
计算：
淀粉含量（%）=（275.48*OD-7.1079）*50/1000000/m*100
浙公网安备 33021202002483