磷酸缓冲液的配制磷酸缓冲液的配制
一、药品的配制步骤
(一)、实验准备:
1、 准备所需的药品和玻璃仪器。
2、 洗涤。(怎样洗涤算干净,)
(二)、计算:
1、百分比浓度计算:
1)、G/V比
例如配1% NaCl，称1g NaCl溶于100ml 水。
2)、V/V比:
例如配75%乙醇100ml，75%×100%=100%×X, X=75ml。取75ml无水乙醇，加25ml蒸馏水。
乙醇:乙醚:丙酮=2:1:2配500ml，各取200 ml，100 ml，200 ml混合。 3)G/V比:用的较少，如计算...
磷酸缓冲液的配制
一、药品的配制步骤
(一)、实验准备:
1、 准备所需的药品和玻璃仪器。
2、 洗涤。(怎样洗涤算干净,)
(二)、计算:
1、百分比浓度计算:
1)、G/V比
例如配1% NaCl，称1g NaCl溶于100ml 水。
2)、V/V比:
例如配75%乙醇100ml，75%×100%=100%×X, X=75ml。取75ml无水乙醇，加25ml蒸馏水。
乙醇:乙醚:丙酮=2:1:2配500ml，各取200 ml，100 ml，200 ml混合。 3)G/V比:用的较少，如计算灰分中某种元素如Fe的含量。 2、摩尔浓度计算:注:药品的分子量一般在标签中注明。 1)、0.1M或0.1mol/L NaCl配100ml。
M=质量/体积(L)称取NaCl0.1×0.1×40=0.4g 摩尔数=G(g)/摩尔质量 2)、0.1mMNaCl配100ml
mM=毫摩尔数/体积(L) 称取NaCl0.1×0.1×40=0.4g 毫摩尔数=G(mg)/摩尔质量
3)、0.1uNaCl配100ml
mM=微摩尔数/体积(L) 称取NaCl0.1×0.1×40=0.4mg 微摩尔数=G(ug)/摩尔质量 称取NaCl0.1×0.1×40=0.4ug 3、 混合溶液配制的计算:
如配3uMEDTA，2.25mM NBT以及60uM 溶液100ml，用50mM磷酸缓冲液配制。
注意:1、分别标定体积计算
2、分别配制再混合，但总体积不能 为100ml (三)、标量:
1、根据需要选择不同量程的天平根据要求去不同精度的测量器，如量筒或移液
管。
2、电子分析天平的使用。
(四)、溶解:
1、根据药品配置要求选择溶剂。蒸馏水，双蒸水，无离子水等。 2、只能用烧杯溶解。注意加入溶剂只能加入总体积的2/3左右，剩余溶剂洗涤
烧杯三次左右，直到洗涤干净。
小常识:药品标签中一般标识有药品的溶解性能和分子式，可根据分子式和所学的常识判断药品的结构和性质特点(包括溶解性质)。
如酸碱两性物质的配制(AA、蛋白质、核苷酸等)如果溶解性能不好可以用稀酸或稀碱促进溶解，但pH应在被要求的范围内。
3、加热促进溶解，但注意应在配制的范围内有的药品还需水溶加热较好。如:
。配0.1%的淀粉，水裕加热(温度在80-90C)，过量会糊化。 (五)、定容:
1、用容量瓶定容;
2、用玻璃棒引流或用小漏斗;
3、用溶剂加入到接近刻度，然后用滴管加入到刻度。要求刻度与液体凹面相切
为止(眼睛可视);
4、上下窑洞容量瓶几次，混合均匀即可。(注意不再定容了，防止溶液漏掉。) (六)、装入试剂瓶，贴上标签。
标签应注明以下内容:药品浓度、名称、配制人、配制日期等。 (七)、清理实验场所。
二、磷酸缓冲液的配制。
(一)、配制0.2mol/L即0.2M pH=6.8的磷酸缓冲液。用磷酸氢二钠—磷酸二氢钠做缓冲液。
选用药品:NaHPO?12HO(碱)和NaHPO?12HO(酸)配缓冲液100ml。242242
书中说明。
(二)、计算 :
1、注:书中有注明配置的量。
2、计算:NaHPO?12HO称取71.64g/L×0.1L=7.164g 242
NaHPO?12HO称取 31.21g/L×0.1L=3.121g 242
3、含有不同结晶水的换算。
书中配1/15mol/L的缓冲液配1L，书中用NaHPO?2HO需要11.87g/L但用242
NaHPO?12HO需多少g, 242
11.87=(178/358)×X，X=23.87g。
(三)、分别配制缓冲液各100ml(根据需要确定配制的量)。 即:0.2M NaHPO?2HO和NaHPO?2HO100ml。 242242
(四)、按书中的量配制取量再混合。
如:pH=6.8，分别去缓冲对49ml和51ml。
(五)、用pH试纸ceni索赔的缓冲液的pH值，检测配置是否准确。 (六)如配50mM pH =6.8的缓冲液100ml ，以你配制的母液稀释即可。 计算:50×0.1=0.2×1000×X (L);X =0.025L;
取0.2M pH=7.2的缓冲液25ml，用蒸馏水定容至100ml即可。 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L)
pH值;0.2mol/LNa2HPO4溶液(mL);0.2mol/LNaH2PO4溶液(mL) 5.8 ;8.0; 92.0 5.9 ;10.0 ; 90.0 6.0; 12.3 ; 87.7 6.1 ;15.0 ; 85.0 6.2 ;18.5 ; 81.5 6.3 ;22.5; 77.5 6.4 ;26.5 ; 73.5 6.5 ;31.5 ; 68.5 6.6 ;37.5; 62.5 6.7 ;43.5 ; 56.5 6.8 ;49.0; 51.0
6.9; 55.0 ; 45.0 7.0 ;61.0 ; 39.0 7.1 ;67.0 ; 33.0 7.2 ;72.0 ; 28.0 7.3 ;77.0 ; 23.0 7.4 ;81.0; 19.0 7.5 ;84.0 ; 16.0 7.6 ;87.0; 13.0 7.7 ;89.5; 10.5 7.8 ;91.5; 8.5 7.9 ;93.5 ; 7.5 8.0; 94.7 ; 5.3
NaH2PO4•2H2O:Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L; NaHPO4•12H2O:Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L; NaH2PO4•2H2O:Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L; NaH2PO4•H2O:Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。
表A1-3B 25?下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制
pH 1mol/L Na2HPO4的体积/mL 1mol/L NaH2P04体积/mL 5.8 7.9 92.1
6.0 12.0 88.0
6.2 17.8 82.2
6.4 25.5 74.5
6.6 35.2 64.8
6.8 46.3 53.7
7.0 57.7 42.3
7.2 68.4 31.6
7.4 77.4 22.6
7.6 84.5 15.5
7.8 89.6 10.4
8.0 93.2 6.8
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