【doc】氨基酸在纸层析中的分离
氨基酸在纸层析中的分离
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.氨基酸在纸层析中的分离
山西医科大学(JShanxiMedUniv)1998.29(4 螂.
傅力明张爱萍
V温宝珍(山西医科大学化学教研室太原.3.001)
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摘要通过实验对展开剂的配比进行了广泛的选择.得出展开剂的最佳配比为4:1:5,并在此条件下对赖氨酸,苯丙氨酸和脯
氨酸等j昆合物进行了分离和鉴定.取得了较好的分离结果.
关键调色谱法.纸层展开剂氨基酸
中田号丽一
Sepe~tlonofaminoaelcbpaperchrematography FuLiming.zhngAiplng.wenB螂henIChemicald聊1.4medicalUniversity.Tai2man030001) AbstraaTheratioafunfold~]ventwasexte~ivelysdceted.Theconduslonis4:1:5Themixture
ofine,phenglamaniceand
prolinel1d3beenseparatedldidentifiedinthi*condition.AgoodreSUltbeenobtained.
Keywordschormatography.imper~unfoldsolv~at;aminoacids;shiftvalue
纸层析是一种微量混合物的快速分离技术,是
以层析纸上吸附的的水为固定相,沿纸条上行的有
机溶剂(叫做展开剂)为流动相,当流动相沿纸条上
行时.纸条上的试样斑点也逐渐向上移动,于是试样
与固定相(水)和流动相(有机溶剂)不断接触,由于
试样中各组分在两相间的分配系数不同,因此各组
分随展开剂移动的速度也不同.
溶质在层析纸上移动的速度或用比移值R, Rs=
R值与化合物结构,纸的质量,温度,展开剂等 因素有关,若滤纸,温度,展开剂等实验条件相同. R,值应是化合物的特性常数.但由于影响R,值 的因素较多难以准确测定,故一般采取在相同实验 条件下用标准试样作对比实验来进行化合物的鉴 定.即把未知混合物试样和已知的标准试样点加到 同一条层析纸上.苯丙氨酸和脯氨酸的混合物.同时 展开.对混合物中各组分进行鉴定.要分离的氨基 酸是赖氨酸,苯丙氨酸和脯氨酸的混合物. 1展开剂的配比选择[j0
我们进行了大量的实验,结果如表1所示.最 佳选择为4:1:5.
裹1展开剂的配比选择(体积比)
溶剂/溶荆上升高度体积(m1)/高度(cm) 2操作
1998—04—05,1998—04一l5进行实验操作 如下.
2.1点样,取一条用展开剂蒸气饱和过的层析纸 (约16cm×3cm)置于一张洁净的白纸上.在纸条 下端约2,3cm处,用铅笔画一横线,并在横线上 作出两个点样位置记号1,2.如图然后分别将l号, 2号样品点在1,2处.
点样时.用吸有少量样品的毛细管轻轻地和层 析纸接触一下,使样品的斑点直径在2,3cm之 间.待样点风干后,再复点一次.
2.2展开待样品斑点风干后.用铅笔在纸条上方
捅一小孔,挂在层析桶盖的钩上.然后把它垂直地放 入盛有展开剂的层析桶内.并使层析纸下端边缘浸 入展开剂液面下约1cm处.注意样品斑点必须在 展开剂液面之上,切勿浸入展开剂中.将层析桶盖 盖好.观察展开剂借层析纸的毛细作用,而向上移动 的情况,当展开剂从点样中心起上升6,7cm时, 取出层析纸,用铅笔画出溶剂前沿位置. 2.3显示图谱用喷雾器在滤纸上均匀地喷上水
,1IO'C的烘箱中 合茚三酮试剂,再将层析纸置105
烘干,直至出现有色图谱为止,并用铅笔色画出图谱 形状,并记下斑点颜色及颜色深浅.颜色愈深,说明 该组分浓度愈大.
2.4计算R,用米尺依次测出点样中心到图谱重 心的距离(A),点样中心到溶剂前沿的距离(B). f]转封三)
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