高效液相操作心得
我就自己在做实验过程中所掌握的东西归纳如下，希望对各位同学有帮助
操作过程:
1、 开机操作:
(1)、打开电源
(2)、自上而下打开个组件电源，Bootp Server里显示有信号时，打开工作站，先打开在线工作站;打开离线状态的工作站可以离线处理图谱与出
报告
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(3)、打开冲洗泵头的10,异丙醇溶液的开关(需用针捅抽)，控制流量大小，以能流出的最小流量为准;提到异丙醇溶液，我还学到一点就是，在用完反相后要换成正相时，我们需要用异丙醇过度30分钟左右，然后在换上正相柱
(4)、注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液;
(5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态，及时正确处理各种突发事件。 2、 先以所用流动相冲洗系统一定时间，如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相，正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命; 3、 建立色谱操作
方法
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，注意保存为自己清楚的方法名，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果; 4、 使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡; 5、 溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;
6、 实验结束后，如果有盐一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。如果是一般的溶剂系统就直接用甲醇冲洗，冲洗过程中关闭D灯、W灯;以延长灯的寿命
7、 关机时，先关闭泵、检测器等，再关闭工作站，然后关机，最后自下而上关闭色谱仪各组件，关闭洗泵溶液的开关;
8、 使用者须认真履行仪器使用登记
制度
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，出现问题及时向老师报告，不要擅自拆卸仪器。未经操作培训，不得擅自使用仪器。
流动相:
1、 流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;
2、 水相流动相需经常更换(一般不超过2天)，防止长菌变质;
3、 使用双泵时，最好不要有机相与水相直接调用，这样可能造成管路气泡，最好我们根据自己的需要配制一定浓度的有机相与水相的混合溶液，再与水相混合调用
4、换流动相后，要purge
样品:
1、 采用过滤或离心方法处理样品，确保样品中不含固体颗粒;
2、 用流动相或比流动相弱的溶剂制备样品溶液，若为反相柱，则极性比流动相大;若为正相柱，则极性比流动相小，尽量用流动相制备样品液; 手动进样时，进样量尽量小，使用定量管定量时，进样体积应为定量管的3,5倍;
色谱柱:
1、 使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等;2、
使用符合要求的流动相;
3、 使用保护柱;
4、 如所用流动相为含盐流动相，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水(如5,甲醇水溶液)，再用甲醇冲洗。
5、 色谱柱在不使用时，应用甲醇或乙氰冲洗，取下后紧密封闭两端保存; 6、 不要高压冲洗柱子;
7、 不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱，使用硅胶柱时还要特别小心流动相的PH范围在2~8之间;使用过程中注意轻拿轻放。
8、上柱时我们要注意柱子的方向，千万不要装反了
可能水平不太高，希望对你有点点帮助啊
浙公网安备 33021202002483