小鼠脑组织WB样品制作过程脑组织蛋白裂解过程。
1 提取新鲜的脑组织,ddwater清洗血迹。
2 在液氮下碾碎脑组织
3 加入适量的RIPA (购买)裂解液,加入蛋白酶抑制剂。冰上裂解20min-30min
4 最大速度离心30min,取上清,弃沉淀。
5 取适量上清用BCA法测量蛋白浓度
6 加入上样buffer 95-100°煮沸5-10min. 用于WB或者-80°储存备用。
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脑组织蛋白裂解过程。
1 提取新鲜的脑组织,ddwater清洗血迹。
2 在液氮下碾碎脑组织
3 加入适量的RIPA (购买)裂解液,加入蛋白酶抑制剂。冰上裂解20min-30min
4 最大速度离心30min,取上清,弃沉淀。
5 取适量上清用BCA法测量蛋白浓度
6 加入上样buffer 95-100°煮沸5-10min. 用于WB或者-80°储存备用。
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