肥料中蛔虫卵死亡率的测定
肥料中蛔虫卵死亡率的测定 GB/T 19524.2—2004 1 范围
本
标准
excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载
规定
关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定
了肥料中蛔虫卵死亡率的测定方法。
2 测定方法原理
将碱性溶液与肥料样品充分混合，分离蛔虫卵，然后用密度较蛔虫卵密度大的溶液为漂浮液，使蛔虫卵漂浮在溶液的表面，从而收集检验。 3 试验方法
3.1 仪器设备(略)
3.2 试剂(略)
3.3 检验程序
3.3.1 蛔虫卵分离
称取5.0,10.0 g样品(颗粒较大的样品应先进行研磨)，放于容量为50 mL离心管中，注入NaOH溶液25,30 mL,另加玻璃珠约10粒，用橡皮塞塞紧管口，放置在振荡器上，静置30 min后，以200,300 r/ min频率振荡10,15 min。振荡完毕，取下离心管上的橡皮塞，用玻璃棒将离心管中的样品充分搅匀，再次用橡皮塞塞紧管口，静置15,30 min 后，振荡10,15 min。
3.3.2 离心沉淀
从振荡器上取下离心管，拔掉橡皮塞，用滴管吸取蒸馏水，将附着于橡皮塞上和管口内壁的样品冲入管中，以2000,2500 r/ min速度离心3,5 min后，弃去上清液。然后加适量蒸馏水，并用玻璃棒将沉淀物搅
起，按上述方法重复洗涤三次。
3.3.3 离心漂浮
往离心管中加入少量饱和 NaNO溶液，用玻璃棒将沉淀物搅成糊状3
后，再徐徐添加饱和 NaNO溶液，随加随搅，直加到离管口约1 cm为止，3
用饱和 NaNO溶液冲洗玻璃棒，洗液并入离心管中，以2000,2500 r/ min3
速度离心3,5 min。
用金属丝圈不断将离心管表层液膜移于盛有半杯蒸馏水的烧杯中，约30次后，适当增加一些饱和NaNO溶液于离心管中，再次搅拌、离心3
及移置液膜，如此反复操作,,,次，直到液膜涂片观察不到蛔虫卵为止。
3.3.4 抽滤镜检
将烧杯中混合悬液，通过覆以微孔火棉胶滤膜的高尔特曼氏漏斗抽滤。若混合悬液的浑浊度大，可更换滤膜。
抽滤完毕，用弯头镊子将滤膜从漏斗的滤台上小心取下，置于载玻片上，滴加二、三滴甘油溶液，于低倍显微镜下对整张滤膜进行观察和蛔虫卵计数。当观察有蛔虫卵时，将含有蛔虫卵的滤膜进行培养。 3.3.5 培养
在培养皿的底部平铺一层厚约1 cm 的脱脂棉，脱脂棉上铺一张直径与培养皿相适的普通滤纸。为防止霉菌和原生动物的繁殖，可加入甲醛溶液或甲醛生理盐水，以浸透滤纸和脱脂棉为宜。
将含蛔虫卵的滤膜平铺在滤纸上，培养皿加盖后置于恒温培养箱中，
在28 ?,30 ? 条件下培养，培养过程中经常滴加蒸馏水或甲醛溶液，使滤膜保持潮湿状态。
3.3.6 镜检
培养10,15 d ，自培养皿中取出滤膜置于载玻片上，滴加甘油溶液，使其透明后，在低倍镜下查找蛔虫卵，然后在高倍镜下根据形态，鉴定卵的死活，并加以计数。镜检时若感觉视野的亮度和膜的透明度不够，可在载玻片上滴一滴蒸馏水，用盖玻片从滤膜上刮下少许含卵滤渣，与水混合均匀，盖上盖玻片进行镜检。
3.3.7 判定
凡含有幼虫的，都认为是活卵，未孵化或单细胞的都判为死卵。 3.3.8 结果计算
K=100(N-N)/ N 121
式中:
K —蛔虫卵死亡率(%)
N—镜检总卵数 1
N—培养后镜检活卵数 2
浙公网安备 33021202002483