实验动物模型的建立

实验动物模型的建立实验动物模型的建立转载自中国科技信息网斯氏狸殖吸虫引起的肺吸虫病,主要是由于童虫在体内游走、移行、串扰引起,表现为皮下游走性结节、包块,浆膜腔积液,颅内占位等病变。目前常用治疗斯氏狸殖吸虫病的药物是吡喹酮,吡喹酮对肺吸虫成虫疗效明显,但对童虫感染,需给较大剂量、多个疗程,常常出现不同程度的不良反应。吴玲娟等[1]发现青蒿琥酯具有杀体内尚未发育成熟的日本血吸虫童虫的作用,具有早期预防性治疗效果。青蒿素及其衍生物被用于卫氏并殖吸虫童虫和成虫[2]、曼氏血吸虫、阴道毛滴虫、弓形虫[3~6]、溶组织阿米巴、福氏耐...

实验动物模型的建立转载自中国科技信息网斯氏狸殖吸虫引起的肺吸虫病,主要是由于童虫在体内游走、移行、串扰引起,表现为皮下游走性结节、包块,浆膜腔积液,颅内占位等病变。目前常用治疗斯氏狸殖吸虫病的药物是吡喹酮,吡喹酮对肺吸虫成虫疗效明显,但对童虫感染,需给较大剂量、多个疗程,常常出现不同程度的不良反应。吴玲娟等[1]发现青蒿琥酯具有杀体内尚未发育成熟的日本血吸虫童虫的作用,具有早期预防性治疗效果。青蒿素及其衍生物被用于卫氏并殖吸虫童虫和成虫[2]、曼氏血吸虫、阴道毛滴虫、弓形虫[3~6]、溶组织阿米巴、福氏耐格里阿米巴、皮肤利什曼原虫、华支睾吸虫的体内、体外杀虫研究,均证明有效。本实验探讨青蒿琥酯对斯氏狸殖吸虫童虫的杀灭效果,并与吡喹酮进行对比实验观察。 1 材料与方法 1.1 实验动物模型的建立 1.1.1 实验动物Wistar大鼠70只,体重200~250g,雌雄不分。由该校实验动物中心提供。 1.1.2 斯氏狸殖吸虫囊蚴从四川省兴文县仙峰镇采集的溪蟹中分离。 1.1.3 动物感染70只鼠全部腹腔注射接种斯氏狸殖吸虫囊蚴(25个/只),将感染后的大鼠随机分成实验治疗组和对照组。 1.2 治疗方案 1.2.1 药物青蒿琥酯片由桂林南药股份有限公司提供,批号070602。吡喹酮片系南京制药厂有限公司产品,批号20061206。两药均用5% NaHCO3溶液溶解。 1.2.2 剂量与疗程所有的大鼠于感染后30d开始治疗。青蒿琥酯治疗方案I,设50 mg/kg、100 mg/kg、150mg/kg 3个剂量组,按每周各剂量给药1次,连续灌服4次,总剂量分别为200 mg/kg、400 mg/kg、600 mg/kg;吡喹酮治疗1组,按150 mg/kg×2d,隔日灌服用药,总剂量300mg/kg。青蒿琥酯治疗方案II,设50㎎/㎏、100㎎/㎏、150㎎/㎏3个剂量组,按每天各剂量给药1次×7d,总剂量分别为350 mg/kg、700 mg/kg、1 050 mg/kg;吡喹酮治疗2组,按150㎎/㎏经口灌服,隔日给药1次,共3次,总剂量450mg/kg ;青蒿琥酯和吡喹酮均用5%的NaHC03稀释,再用生理盐水配成所需浓度溶液。对照组,灌服5% NaHCO3。 1.2.3 疗效评价青蒿琥酯治疗结束后30d,解剖大鼠,分别将大鼠全身肌肉、肝脏、肺等撕成小块后,浸泡于生理盐水中,37℃放置4~8h,收集虫体。采用SPSS11.5统计分析软件做统计学处理,用χ2检验评价组间差异的统计学意义。 2 结果 2.1 青蒿琥酯方案I的治疗效果大鼠感染斯氏狸殖吸虫囊蚴后30d,青蒿琥酯用药后30d 剖杀,解剖所得虫体大部分发育为成虫。青蒿琥酯50 mg/kg、100 mg/kg、150mg/kg组、吡喹酮治疗组、对照组的检虫率分别为35.5%、37.0%、37.5%、19.5%和40.5%。青蒿琥酯各用药组检虫率与对照组相比差异均无统计学意义(χ2=0.477,P均> 0.05),而与吡喹酮治疗组相比差异有统计学意义(χ2=11.382,P < 0.05)(表1)。表1 青蒿琥酯每周1次给药对斯氏狸殖吸虫病大鼠的治疗效果组别鼠数/只感染总数/个检出数/条检出率/﹪ Art50㎎/㎏×4 8 200 71(8.86±2.27) 35.5 Art100㎎/㎏×4 8 200 74(9.25±1.98) 37.0 Art150㎎/㎏×4 8 200 75(9.43±3.74) 37.5 PQT 150㎎/㎏×2 8 200 39(4.86±2.41) 19.5 对照组8 200 81(10.13±2.05) 40.5 2.2 青蒿琥酯方案II的治疗效果大鼠感染斯氏狸殖吸虫囊蚴后30d,青蒿琥酯用药后30d 剖杀,解剖所得虫体大部分发育为成虫。青蒿琥酯50㎎/㎏、100㎎/㎏、150㎎/㎏组、吡喹酮治疗组、对照组的检虫率分别为26.0%、2 3.3% 、70.0%、22.7%、83.3%。青蒿琥酯50㎎/㎏组、100㎎/㎏组与对照组相比差异均有统计学意义(χ2=37,P < 0.05),与吡喹酮治疗组相比差异无统计学意义(χ2=0.012,P > 0.05),而青蒿琥酯150㎎/㎏与对照组相比差异无统计学意义(χ2=1.105,P > 0.05)。表2 青蒿琥酯每天1次给药对斯氏狸殖吸虫病大鼠的治疗效果组别鼠数/只感染总数/个检出数/条检出率/﹪ Art50㎎/㎏×7 6 150 39(6.42±2.21) 26.0 Art100㎎/㎏×7 6 150 35(5.86±2.32) 23.3 Art150㎎/㎏×7 6 150 105(15.83±3.26) 70.0 PQT 150㎎/㎏×3 6 150 34(5.56±2.16) 22.7 对照组 6 150 125(20.86±3.07) 83.3 3 讨论青蒿琥酯除具有抗疟作用外,尚有抗血吸虫、弓形虫、包虫等作用。有报道青蒿琥酯对小鼠体内不同发育阶段的日本血吸虫有杀灭作用,特别是对7~35d龄的虫体的杀灭效果更明显[7]。邢文鸾[8]等用卫氏并殖吸虫囊蚴腹腔注射法感染大鼠,10d后按不同剂量服用青蒿琥酯,首次剂量加倍,连用6d。30d后剖解大鼠,观察青蒿琥酯减虫率,并与吡喹酮比较;观察童虫在药液中的活动情况。结果服药后,青蒿琥酯低、中、高3个剂量组、吡喹酮组及对照组童虫检出率分别为26.1%、16.9%、15.9%、2.25%、83.6%;用药组童虫重量减轻,体形减小,童虫体棘有改变,证明青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫有一定的杀灭效果。该学者[2]用实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常规病理检查,取出的虫体作电镜观察,青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫有损伤作用。本实验中,大鼠感染肺吸虫囊蚴后30d用药,治疗方案I,青蒿琥酯每周1次给药,连用4次,对大鼠内斯氏狸殖吸虫无明显杀虫效果;治疗方案II,采用青蒿琥酯50㎎/㎏?d×7 d、100㎎/㎏?d×7d,对大鼠内斯氏狸殖吸虫有明显杀虫效果,检虫率分别为26.0%、23.3%,明显低于对照组,杀虫效果与吡喹酮相当。但青蒿琥酯150㎎/㎏?d×7d组对大鼠内斯氏狸殖吸虫无明显杀虫效果,可能与大剂量青蒿琥酯抑制免疫功能有关。青蒿琥酯对斯氏狸殖吸虫的作用还有待进一步研究。

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