复方降压片的药效学研究（可编辑）

复方降压片的药效学研究（可编辑） 吉林农业大学 硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 姓名:史艳宇 申请学位级别:硕士 专业:中药学 指导教师:孙晓波;徐惠波 20030601吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 要 摘 复方降压片由钩藤、罗布麻两味药组成。钩藤 属茜草科植物,主要分布于热带地区,其带钧茎枝入 药,具有清热平肝、活血通瘀、息风定惊的功效,在我国应用已有 悠久的历史。 主要用于治疗头晕目眩、惊痫抽搐、全身麻木、高血压等心脑血 管和神经系统疾 为夹竹桃科植物,广泛野生于盐碱沙荒地区, 病。罗布麻 其叶入药,具有平肝安神,清热利水之功效,主要用于治疗高血 压、哮喘及力强 免疫功能。 本实验主要研究由钧藤和罗布麻有效成分组成的复方降压片的降压作用和 其对高血压伴随症状的影响。钩藤以/经十二指肠一次性给药后,麻醉状 态下正常大鼠血压在给药?后持续下降,与对照组比较有明 显差异。另外,钩藤与罗布麻的有效成分以:、:、:进行配伍组合, 、 瓜、 即钧藤/,罗布麻用药剂量分别为 。对 进行观察,结果表明:各剂量组经十日肠给药后,均能明显降低正常大 鼠的血压,和空白对照组比较有明显意义...,因钧藤与罗布麻间 比例为:的用药量降压效果显著,药量适中,故确定该复方中两味药的比例 为:。通过小鼠急性毒性试验,确定其灌胃给药为./,该复 方最大给药剂量/远低于中毒剂量。 采用两肾一夹 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 复制高血压大鼠。模型,大鼠血压在术后三 周呈上升趋势,在术后四周血压明显升高并呈稳定状态。在一次性给药 后血压即明显下降.,连续给药十天后降到最低...,最大 降压幅度迭.%。且通过对该动物模型血浆中血管紧张素扣心钠素 含量测定表明,其对含量有增加的趋势,对含量无明显影响。 通过对动物模型降压作用的观察结果表明,/剂量组从给药第 三天开始,大鼠血压开始明显下降.?.,到给药第天降到最低 .,降压幅度达.%。/剂量组,从给药第二天开始降压 .?.。/剂量组降压效果不明显,仅在给药第三天和第二十天 出现显著降压作用.,呈明显的量效关系。复方降压片使含量显著 增高,对影响不明显,对含量有降低趋势,但无统计学意义.。吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药教学研究 提示,含量的增加可能是该复方制荆降低血压的机制之一。 通过对豚鼠眩晕模型的治疗作用结果表明,复方降压片可明显改善豚鼠的眩 晕症状,减少豚鼠自耳窝内滴注氯仿后、后的眼球震颤次数和头左 右摇摆次数。 同时本实验通过对血瘀动物血液粘度、血沉和红细胞压积测定及体外血拴形 成等观察表明,其可明显抑制体外血栓的形成。模型组和空白对照组的血栓长度 、湿重、干重分别为.?.、.?.、.?., 而/给药组,分别为.?.、.?..、?., /给药组分别为.?..、.?..、. ?.;/剂量组分别为.?.、.?..、.? ..,可见,给药组和模型组比较有明显差异,提示,复方降压片可 明显抑制大鼠体外血栓的形成,使血瘀动物全血比粘度、血沉与模型组比明显降 低,但对血浆比粘度及红细胞压积影响不明显。表明其可降低血液粘度,改善血 瘀动物血液流变性。提示对于防治心血管疾病有一定作用。 通过对小鼠急性高血脂模型的治疗作用的结果表明,复方降压片/ 可明显降低急性高血脂小鼠的胆固醇水平,和模型组比较有显著意义.; 同时,高剂量 /组可显著高血脂小鼠的甘油 /组和中剂量 三酯水平,和模型组比较,有显著意义.。结果提示,其可以从降低胆 固醇、甘油三酯的角度,防止动肪硬化的形成,有助于抑制高血压的形成,对高 血压患者的恢复具有重要意义。 关键词:复方降压片降压降脂 ?吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药鼓学研究:: :. . , , ?,,,,. ; . .,.,. 砂,/ ’.,:、:、: . ’ . : ., , ./, /, /. , ’ , . ./、/、/ . ,’ ... , .%., 复方降压片的药效学研究 吉林农业大学硕士学位论文 ’。 ;, 、、/ . ,, ., ’ . .%.,、、 , .,、 . ,’ , ’.’, .. 、 ., ., . , , . ’, , , , . , . .,, .独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的 研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外, 论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得吉林农业大学或其他教育机 构的学位证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均 己在论文中作了明确的说明并表示谢意。 签字日期: 一,矿弓年‖月‖日 学位论文作者签名:史扬守 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解吉林农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即 吉林农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许 论文被查阅和借阅。本人授权吉林农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书 学位论文作者签名:遭啪了 导师签名:轫、琏红红 签字日期: 签字日期: 口叫:年‖月‖日 一一年/月,日 学位论文作者毕业后去向 电话 工作单位: 邮编 通讯地址:吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 月 吾 高血压是常见的一种心血管疾病之一,它不仅患病率高, 且常引起严重的心、脑、肾并发症。因此,如何防治高血压病是国内外医学界非 常重视的课题,现代医学的发展使降压药也取得了很大的进展,降压效果也在不 断提高,现有的降压药可分为五类:利尿剂、受体拮抗荆、钙离子拮抗剂、转 换酶抑制剂和血管扩张剂。这些药物在显示了其良好降压效果的同时,也带来了 诸如影响脂质代谢,影响心血管、神经、血液系统功能的副反应。而医学的发展 使人们越来越认识到,不能单纯以降压作为治疗高血压的指标,而忽视了血压升 高是机体为了克服血流供需不平衡所产生的一种主动的调节过 程。单纯降压,只 能激起体内升压机制的反跳,加重了高血压的恶性循环。而中药通过辨证论治, 针对病变主要矛盾,予以调理阴阳气血,在恢复机体自身平衡、协调机能方面显 示出独道的优势。中医依其临床见症将高血压归属于“眩晕”、“头痛”等病范畴, 病之本为阴阳失调,病之标为内生之风、痰瘀。就脏腑理论而言,病变主要在心、 肝、肾。 中医药理论的最大特色就在于强调人的整体观,发挥药物的整体调节作用, 并用辨证施治的思维来处方用药。我国中医药学者在对高血压病的辨证论治的过 程中,总结出不少有一定效果的中药复方。 为了更有效的预防与治疗高血压疾病,同时为了更好的发挥中药复方所具有 的西医药某些无可比拟的优势,克服中药复方成分复杂,质量难以控制的不足, 我们根据传统用药规律将钩藤、罗布麻两味经典降压药的有效成分通过合理组方 构成复方五类制剂,以其达到治疗高血压及其伴随症状的目的。 近现代医学证明钩藤成分清楚,并有显著降压、抗惊厥、镇静等很多作用。 钩藤总碱是从钩藤中提出的生物碱,主要是钩藤碱,其分子式为。挪。。:。其降 压机理被认为是直接或间接抑制血管运动中枢及其对交感神经的阻断作用“。近 年的实验研究推测,钩藤碱也是一种钙离子拮抗剂。?。罗布麻在数百年的运用 历史中发现其有利尿、消肿、降压的作用。其降压有效成分为槲皮素,;? 和异槲皮甙。,?。,它们同为黄酮类化合物。其降压机理与抑制血管运动中 枢及血管扩张有关。临床上以罗布麻治疗高血压,降压效果达%以上,对头痛、 头晕、失眠、多梦等有明显改善。另外,罗布麻叶还能降低血清甘油三酯,改善 心功能,抑制血小板聚集,可能有抗衰老作用?。在本实验中,该复方降压片不 仅可以降低大鼠的正常血压,肾性高血压及原发性高血压,而且还可以降低血脂。吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 高血压联盟曾发表一个北京声明,即发展中国家应该研制自已的 复方制剂,这个 复方中要考虑到血压和血脂,用两三种药组成的复方,可能质高价廉,现该制剂 符合新复方降压药的要求,故有进一步开发的意义与广阔前景。复方降压片的药效学研究 吉林农业大学硕士学位论文 第一章复方降压片中钩藤、罗布麻的研究现状 复方降压片由钩藤、罗布麻所成,钩藤为茜草科植物 一,其带钩茎技入药,性?味甘,具有清泄肝火,平肝息风,定惊 的功效,但无钩钩藤不宜入药。钩藤碱系钩藤的主要有效活’『生成分之一, 近年来其药理研究很多,在化学成分和药理活性方面都有了很大的进展。 .其叶入药,性味甘、苦、?, 罗布麻为夹竹桃科罗布麻 归肝经,具有清火,降压,强心,利尿的功效。用于心脏病,高血压,神经衰弱, 肝炎腹胀,肾炎浮肿的治疗。 .钩藤的研究 .钩藤化学成分的研究 生物碱为钩藤的主要成分“,有钩藤碱、异钩藤碱 柯诺辛因碱、异柯诺辛因碱、 柯楠因碱、二氢柯楠因碱、硬毛帽柱木碱 、硬毛帽柱木因碱、阿枯米精、缝籽嗪甲醚 、斯垂特萨果碱、瓦塞乔特明碱、 、钩藤芬碱、哈尔满、安枯斯特 喜果甙 .二氢 林碱、安枯斯特定碱、卡丹宾碱、 一异二氢卡丹宾碱 卡丹宾碱 。、 一。大叶钩藤中含柯诺辛、柯诺辛/ 。此外,还从钩藤中分离鉴定出金丝桃甙和。 .钩藤药理作用的研究 ..对心脑血管系统的药理作用.降压作用钩藤碱具有明显的降压作用,其降压特点是先降压,继之快 速升压,然后持续下降。降压原理主要是直接和反射性的抑制了血管运动中枢, 以及阻滞交感神经及其神经节,使外周血管扩张,阻力降低‘”,其次钩藤碱通过 抑制细胞内十释放,产生直接扩血管作,但其作用较弱。但是,黄燮南等吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 口嗵过实验研究报道,钩藤碱可直接扩张小血管,且对多种激动剂所致血管收缩 有效,钩藤碱对在整体动物所致外周阻力的降低,主要是由于钩藤碱对血管床特 别是小动脉的直接扩张作用所致。为了增加药效,降低不良反应,很多药物经常 进行配伍使用。钩藤碱就可与双肼苯哒嗪配伍使用,使的降压效 应增加,并能对抗加快心率,增加心肌耗氧的不良反应揖】。 ...对心脏的作用钩藤碱对心肌细胞钾通道有抑制作用,不但抑制瞬间外 向电流,还抑制延迟整流电流,其对.型钙通道也有明显抑制作用。钩 藤碱能降低豚鼠心肌兴奋性、延长其功能性不应期,抑制其正阶梯现象,具有 还能延长心 明显的负性频率作用,降低心脏指数?。钩藤碱./ 电图..,.间期及增宽波,其作用类似奎尼丁?。说明钩藤总碱有抗 心律失常作用。 钩藤碱对自发节律右心房具有负性变时作用,此作用在/范围内 呈浓度效应依赖关系;对电驱动离体左心房,钩藤碱在浓度大于/时产 生负性肌力作用,其作用原理可能同抑制钙内流有关【 】。另有 报道,钩藤煎剂能 降低自发性高血压大鼠的收缩压,逆转其左室肥厚,其 作用机制可能与抑制原癌基因.表达有关【?。 ...对血流动力学的作用 钩藤碱/静脉注射给犬和猫,发现钩藤 碱能降低平均动脉压.并能使心脏后负荷降低,前负荷升高,并且能扩张血管, 减少外周阻力,使心率减慢,每搏输出量增加。麻醉犬给异钩藤碱后,心输出量 、心脏指数、及左心室作功指数降的同时,搏出量 和血液饱和指数不变,总肺血管阻力降低,反应心肌氧耗的时间张力 指数显减少【?。 ...抑制血小板聚集的作用浓度为.~./时钩藤碱对所 致血小板聚集有明显促进解聚的作用,此作用较略强。钩藤碱对正常血小 板内浓度无明显影响,但显著抑制血小板凝聚酶及所引起的血小板 内浓度下降。钩藤碱具有明显改善红细胞变形能力的作用四。 ...对脑缺血缺氧的保护作用钩藤碱可浓度依赖性抑制低氧状态下皮层 神经元.钙通道的激活。缩短其平均开放时间,延长其平均关闭时 间并降低其 开放概率,这表明钩藤碱对大鼠大脑皮层神经元.钙通道有阻滞作用,从而降 低细胞内钙超载,此为钩藤碱改善低氧性脑代谢紊乱的机制之?。钩藤碱有明 显抗小鼠缺氧的作用,但并非是增加脑血流量所致,钩藤碱有明显减少小鼠氧消 耗的作用,其延长缺氧小鼠存活期可能与同时减少整体氧消耗有关【。目前认为, 吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 脑缺血再灌注损伤与多种因素有关,其中脑内生成增多与之关系密切”, 钩藤碱可减少脑缺血一再灌注损伤中皮层和海马的生成,降低的损害作 用,降低脑内的活性,对脑缺血产生保护作用】。 ..中枢作用 ...钩藤碱/使脊髓去甲肾上腺素州的含量减少,脑干含量增 加。剂量增至/,下丘脑、皮质、杏仁核、脊髓及脑干含量显著下降。 在离体培养中,钩藤碱使下丘脑、杏仁核自发性释放减少并抑制高所致 下丘脑、皮质及脑干的释放这表明钩藤碱的中枢作用可能与中枢的变化 有关。高去极化所致流将使单胺类递质释放增加,某些通道阻滞剂 通过阻滞内流而抑制该种释放【】,钩藤碱是否通过阻滞内流或干扰 的合成与代谢而影响的含量及释放还有待进一步研究。 钩藤能降低至痫大鼠海马脑片区顺向诱发幅度,表明钩藤对中枢神 经系统的突触传递过程有明显的抑制效应,具有抗癫痫作用。钩藤碱为钩藤的主 要成分,钩藤的上述作用可能与钩藤碱的钙拮抗作用及通过对生成的抑制作 用,进而抑制其促进钙内流和谷氨酸释放的作用有关”。 ...镇静作用钩藤煎剂对小鼠.有明显的镇静作用,而无明显催眠 作用。剂量加大到倍也不加强戊巴比妥钠的催眠、麻醉作用。~倍也不 能使翻正反射消失,也不引起运动障碍【。钩藤煎剂可降低大鼠大脑皮层的兴奋 性,表现在使部分大鼠阳性条件反射延长或破坏,对分化抑制和非条件反射皆无 显著影。 . 对肺部的作用 钩藤碱已应用于临床治疗哮喘,对组织胺引喘的豚鼠,用钩藤总碱/ 和/,抑制率分别为.%和%口.,钩藤总碱的抑喘 常随给药剂量的加大而增加。利用内面朝外式膜片钳单通道记录法研究钩藤碱对 大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响,发现钩藤碱、、、 /可使的开放概率由加药前的.?.分别增加到.? .、.?.、.?.和.?.,.,说明钩 藤碱有增加肺动脉平滑肌细胞开放作用。钩藤碱在全细胞记录条件下或 组织水平、整体水平能否引起下放增加,还有待于进一步研究。 .,对坐骨神经的抑制作用 钩藤碱对蟾蜍坐骨神经动作电位具剂量依赖性 抑制作用,其半数有效浓度为./.弱于奎尼丁【。 ..对中枢运动。性 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 器的抑制作用钩藤对中枢运动性分析器兴奋性增高的吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药放学研究 状态有一定的抑制作用。 ..溶解结石的作用钩藤的水提取物与饲料混合其中提取物占%喂饲实 验性膀胱结石的大鼠,有明显的溶解结石的作用】。 总之,钩藤碱可能为一种钙拮抗剂,其药理作用比较明显,具有良好的镇静 安神作用,毒性低,副作用小,它还有子宫收缩作用和利尿作用,并且已经应用 于临床治疗高血压、癫痫、哮喘等疾病。钩藤碱在药代动力学方面也值得深入研 究,近年也有不少报道。 .罗布麻的研究 .罗布麻化学成分的研究 含正三十醇、羽扇豆醇棕榈酸酯、二十九烷田、棕榈酸蜂花基酯、正二十九 烷、正三十一烷、棕榈酸十六醇酯、.谷甾醇、槲皮素、异槲皮甙、中肌醇、 芦丁、儿茶素、金丝桃甙.~.%、新异芸香甙、莨菪亭、异秦皮定【”、 。”、鞣质.%。罗布麻叶水浸膏总黄酮含量按芦 延胡索酸、琥珀酸、绿原酸 丁计算为.%;槲皮素含量为.;水溶性碳水化合物总糖量平均 含量为.%;十五种氨基酸含量为赖氨酸.、精氨酸.、天冬氨 酸.、苏氨酸.、谷氨酸.、脯氨酸.、甘氨酸.、丙氨酸.、 胱氨酸.、甲硫氨酸.、异亮氨酸.、亮氨酸.、酪氨酸.、苯丙 氨酸.、缬氨酸.;无机元素有铜.、钾、钙、锰.、 铁.、锌.、硒、锶、溴?“。 .罗布麻药理作用的研究 ..对心血管系统的作用 罗布麻浸膏水滤液%给麻醉狗静脉恒速注射 ./、./,血压下降。以上,下降最大达.%,血压下降同 时伴有心率减慢.,心率减慢自给药后持续。血压降低同时心输出 量、心脏指数、心搏指数及冠状动脉左回旋支血流量减少。对心脏前后负荷无影 响。内心肌耗氧量减少。罗布麻叶煎剂./或其黄酮甙 ~/,后,心率明显减慢。后恢复,当煎剂剂量增至/, 黄酮甙增至/时,可出现心率失常,段压低,波变形,说明两者均 可引起心脏毒性反应??。 犬、猫罗布麻叶黄酮甙/,亦可使血压平均下降.~.%;一吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药效学研究 次给药降压作用维持~,但有快速耐受性肾性高血压犬罗布麻叶煎剂 、、,出现/可出现血压下降。给药后可以从/降至 /,三日后才回升口。每次灌流离体兔耳血管时具有明显扩张 血管作用口。 ..对脑内单胺类递质含量及细胞膜流动性的作用罗布麻叶浸膏可使脑内 及含量升高,其水溶性成分可使一、及含量升高,而 含量降低,醇溶性成分上述作用更明显。提示罗布麻叶浸膏可能含有兴奋中枢 一神经元功能及抑制中枢肾上腺素神经元功能的化学物质,这些化学物质为 水溶性及醇溶性。脑神经细胞膜脂质流动性测定结果提示罗布麻叶浸膏水溶性部 分可使膜流动性增加。?。 ..利尿作用 罗布麻叶水浸膏及浸膏灼烧残渣有利尿作用。大鼠罗布麻 叶水浸膏后~及总尿量分别增加.%及.%,与此同时尿钠及尿 钾排出量也相应增加,但给药组与对照组之间尿钾及尿钠浓度无显著差异。家兔 罗布麻叶水浸膏后,尿量明显增加尿量增加在~.%之间, 作用持续以上,而尿钠及尿钾排出量未见有明显增加尿钾排出量仅大内 有增加现象,尿钠及尿钾浓度均低于给药前水平。犬罗布麻叶水浸膏后 内的各时相尿量明显增加,尿钠、尿钾的排出量也相应增加,但尿钠及尿钾的浓 度均低于供药前水平。罗布麻叶浸膏灼烧残渣对家兔有快速而强烈的利尿作用, 但作用持续时间较浸膏剂为短【”。 ..降血脂作用 罗布麻叶水浸膏能显著降低造成高血脂症大鼠的血清 总胆固醇值、三酸甘油酯值,但未能降低小鼠园高脂饲料形成高胆固醇血症的胆 固醇值 .对血小板的解聚作用据顾振伦等动物实验结果表明,/的罗布麻 叶浸膏可明显地抑制凝血酶诱导血小板聚集作用。临床同步观察例,年龄为 ~岁之间,每人每天饮罗布麻茶,连服个月,结果服罗布麻前、后血小 板聚集差异明显.。免疫增强作用三十烷醇对正常幼鼠的生长无明显影响;对小鼠脾脏有增 重作用/尤为显著;对鼠胸腺影响不一致,成年鼠胸腺略有增重,幼鼠 则略降低;对环磷酰胺引起的脾脏、胸腺减重有明显对抗作用:对小鼠腹腔巨噬 功能有增强作用。 ,.延缓衰老作用 罗布麻叶提取物对果蝇、家蚕、小鼠有延缓衰老或延长寿 命作用。对小鼠内脏脂褐质有不同程度的降低作用,并可使不同年龄组小鼠复方降压片的药效学研究 吉林农业大学硕士学位论文 的肝脏和心脏的超氧化物歧化酶活力普遍升高。 ..镇静安神作用 罗布麻叶浸膏./给小鼠腹腔注射后,可使小 鼠自发活动明显减少,作用可持续小时以上,随着剂量增加作用更为明显。口 服给药作用出现较慢、且较弱,但也可见到自发活动减少现象。在对戊巴比妥协 同作用的实验中,以./剂量的罗布麻浸膏腹腔注射后,可使全部小鼠翻正 反射消失,作用甚为明显,而对照组动物中未见有翻正反射消失的现象。此外, 家兔以./剂量罗布麻叶浸膏静脉注射后,皮层呈现明显的高血压慢波,作 用可持续分钟左右。杜荣萃报道,动物实验腹注罗布麻浸膏对戊巴比妥的镇 静催眠作用有协同作用。腹注罗布麻浸膏对中枢兴奋药引起的惊厥有一定抗惊厥 作用。静脉注射罗布麻浸膏.分钟后,可使家兔皮层各区呈现高压慢波的瞌睡 型。临床普遍反映常饮罗布麻茶睡眠好【。 ..抗幅射作用罗布麻叶浸膏/灌胃,./腹腔注射每浸膏相当 射线照射小鼠的生存天数,增加存活 .生药,连续~天,可延长 率,使血液白细胞数增加。槲皮素/灌胃,连续天,也有同样作用, 认为罗布麻叶抗幅射作用与槲皮素相关。”。 吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药放学研究 第二章材料与方法 .试验材料 ..动物 大鼠,体重,雌雄各半;豚鼠,雌性,体重;昆 明种小鼠,雌雄各半,体重;以上均长春高新医学动物实验中心提供: 原发性高血压大鼠,购于北京维通利华实验动物技术有限公司。 .药品与试剂 复方降压片,由吉林省中医中药研究院新药中心剂型室提供。配药时,将钩 藤、罗布麻有效成分用蒸馏水和聚乙二醇:配制。以下用药配制方法均同, 对照组给以含有与给药组相同浓度的聚乙二醇水溶液。所有药物均灌胃给药。 脂必妥,成都地奥九泓制药厂,批号:; 降压号,北京双鹤药业股份有限公司,批号:; 牛黄降压胶囊,三九企业集团,北京东升制药厂,批号:: 血塞通胶囊,云南白药集团文山七花有限责任公司生产,批号:: 盐酸肾上腺素,天津金耀氨基酸有限公司原人民制药,批号:; 肝素钠,上海三浦化工有限公司生产,批号:; 氯仿,北京化工厂生产,批号:: 乌拉坦,中国医药集团上海化学试剂公司生产,批号:年月 日: 水合氯醛,河北高碑店春光方试剂厂,批号:: 总胆固醇试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司,批号:: 甘油三酯试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司,批号:: 血管紧张素放射免疫分析药盒,解放军总医院科技开发中心放 免研究所生产,批号:一.; 心钠素放免药盒,解放军总医院科技开发中心放免研究所生产, 批号: .; 内皮素放免药盒,解放军总医院科技开发中心放免研究所生产, 批号: .?。 ..仪器 吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药教学研究 /生理记录仪,由生产。 无损伤大鼠尾动脉测定仪,型,由无锡生产。 .型体外血栓形成、血小板粘附两用仪,中国石唐弯新光电子仪器 厂生 产。 .全自动血液流变快速仪,重庆大学维多生物工程研究所研制。 微量血液离心机,上海器械厂生产。 免疫计数仪,西安厂生产。 型分光光度计,上海第三分析仪器厂生产。 .试验方法 、.复方降压片中钩藤与罗布麻比例的确定 ...钩藤给药剂量的确定试验 大鼠只,分成四组,每组只。分别为空白对照组,钩藤/、/、 /三个剂量组。各剂量组大鼠分别用./乌拉坦麻醉后,仰卧固 定在手术台上,分离颈总动脉,插入动脉导管,将动脉导管与压力换能器相连, 记录仪描记血压曲线。在腹中线开一小口,取出十二指肠穿线以备给药。待动物 稳定后描记正常血压,并分别将钩藤按、、/剂量给药,观察并记录 各剂量给药后大鼠、、、、、、、、、、、 的血压变化。 ...钩藤、罗布麻两昧药中有效成分比例的确定试验 该复方中钩藤给药剂量确定后,因《药典》中钩藤常用剂量为?,罗布 麻用药剂量为~,结合古方中钩藤及罗布麻在治疗高血压时的常 用剂量,初 步确定该复方用药比例为钩藤:罗布麻:、:、:。同上实验方法也 采用对麻醉正常血压大鼠的急性降压方法。具体操作步骤同上。取大鼠 只,随机分成四组:空白对照组,复方降压片 璐钩藤/:罗 布麻/、/钩藤/:罗布麻/、 钩 藤/:罗布麻/三个剂量组。空白对照组通过十二指肠给予同体 积蒸馏水/。给药后,观察并记录各时间点血压。 . 对肾性高血压大鼠 模型影响 取只大鼠,雌雄各半,体重~,在动物室适应一周后,用无损 伤大鼠尾动脉测压仪一型测其正常血压作为术前血压值。测压前,先将 大鼠在加温装置内?预热,待大鼠尾动脉充血后,用尾动脉测压仪 复方降压片的药兢学研究 吉林农业大学硕士学位论文 测其收缩压,连续次,取均值作为其正常血压值。手术开始时以%水合氯醛 腹腔注射麻醉,将大鼠侧卧,消毒,开腹,取出肾脏,剥离肾动脉。 用 一内径.的银夹狭窄左肾动脉,右侧肾不触及。术后腹腔注射青霉素万 “只,共天。同时。术后第二天给予%盐水作为日常饮水,?天后,改用 %盐水。以此建立.模型。术后三周测其血压,观察大鼠血压上升幅 度与趋势。术后四周,测其血压,将血压升高大鼠视为高血压动物模 型。 取造模手术四周后,符合要求大鼠只,用尾动脉测压仅连续测量 次,取均值作为药前血压值,再据血压和体重将动物分为组,空白对照组.降 压号./组.复方降压片/、/、/三个剂量组。 空白对照组给同体积蒸馏水/,每天一次,连续天。于第一天给药后 、、、,第二天给药后及第三天、第四天、第五天、第八天、第 十天给药后,分别测量尾动脉血压。观察结束后腹主动脉采血,测其血浆中 血管紧张素和心钠素含量。 ..对原发性高血压大鼠的影响 取原发性高血压大鼠只,雌雄各半,在固定环境中适应一周后,用 无损伤 大鼠尾动脉测压仪测其血压作为药前值,测压时条件同前。按血压和体重将动 物分成组,每组只,雌雄各半,分别为空白对照组,阳性对照组降压号 .,组,复方降压片/、、/三个剂量组。各组 均灌胃给药,空白对照组灌胃同体积蒸馏水/,每日一次,共天。于 第一天给药后、、、,第二天给药后,第三天、第四天,第五天、 第八天、第天、第天、第天给药后测其尾动脉收缩压,观察各剂 量药对原发性高血压大鼠血压的影响。观察结束后,腹主动脉采血,测其血浆 或血清中血管紧张素、心钠素、内皮素的含量。同时, 对其血清中总胆固醇、甘油三酯含量进行测定。 ..对豚鼠眩晕模型的影响 取~豚鼠雌性,首先将其放入直径为的圆形铁皮圈内,观察动 物正常活动,正常者均可用于实验。将只豚鼠随机分成组,每组只,分 别为模型组.牛黄降压胶囊 /三 /组,复方降压片、、. 个剂量组。各组均灌胃给药,模型组灌胃同体积蒸馏水,每日一次,共 天。在给药第五天后,用微量移液器将三氯甲烷准确的注入外耳道深部, 再将其放入圆形铁圈内,观察其活动。实验以眼球震颤和头左右摇摆为观察指标,吉林农业大学硒士学位论文 复方降压片的药效学研究 从给药后开始观察,每隔记录一次眼球震颤和头左右摇摆的次数, 每次记录,观察。 ..对血瘀大鼠血液流变性的影晌 取只大鼠,雌性,随机分为六组,每组只,分别为空白对照组,模型 组,阳性药血塞通胶囊/组,复方降压片/、、/ 三个剂量组。各组均灌胃给药,空白对照组和模型组灌胃同体积蒸馏水/, 每日次,共天。在第二天给药后,除空白对照组外,其余各组均腹腔注 射.%的盐酸肾上腺素,/只,后,将动物投入.。的冰水浴中游泳, 后取出。在第三天给药后,模型组和各给药组以同样方法处理一次。在 第四天给药后,模型组与各给药组再次盐酸肾上腺素,但不游泳。以此建 立大鼠血瘀模型。在第五天给药后,腹主动脉采血,对各组血液粘度、血沉、 红细胞压积、凝血时间、体外血栓形成进行测定。 ..对小鼠急性高血脂模型的影响 取只小鼠,雌性,体重?,随机分为组,每组只,分别为空 白对照组、模型组、阳性对照组脂必妥 ,组,复方降压片/、 班、 三个剂量组。空白对照组和模型组灌胃同体积蒸馏水/, 其他组灌胃给各剂量药,每日次,共给药天。在第四天灌胃给药后,除 空白对照组外,模型组和其他各给药组均腹腔注射%的蛋黄乳液./只。同 时,禁食不禁水,后即末次给药后将小鼠断头处死,离心,取血清,测 其胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白含量。 .。小鼠急性毒性试验一灌胃给药;。测定 经预试验将复方降压片以. /作为动物%死亡剂量, ./作 为%死亡齐量,以高低剂量比值:.设八个组。取健康小鼠只,雌雄各 半,随机分为八组。按等比剂量配置药液,于小鼠灌胃给予不同浓度药液/, 观察动物反应情况,随时记录死亡动物数,连续观察七天,结果以法进行 统计学处理。 ..试验数据的统计学处理方法 实验数据实测值与对照组比较,进行组间检验,分析结果用?表示。吉林农业大学硕士学位论文 复方降压片的药教学研究 第三章结果与分析 .复方降压片中钩藤与罗布麻用药比例的确定 ..钩藤给药剂量的确定 由表、图可见,钩藤/十二指肠一次性给药后,对大鼠的急性降 压效果显著,与空白对照组比较有明显的降压作用,钩藤/、/两 剂量组与空白对照组比较无明显降压作用。同时,其降压特点主要表现在对大鼠 舒张压的降低上,而对大鼠收缩压影响较小。根据该实验结果确定钩藤用 药剂量为/。 ..钩藤与罗布麻用药比例的确定 由表、图可见,复方降压片/钩藤/、罗布麻、 /钩藤/、罗布麻/、/钩藤/、罗布 麻/三个给药剂量组经十二指肠给药后,对麻醉正常大鼠血压均有降压 作用,各剂量组在一次性给药后血压开始降压,到给药时血压降到 最低,与空白对照组比较,降压效果显著.~.,且以降低舒张压为主 要特征见图。在三个剂量中,/剂量组与/剂量组降压效果 与空白对照组比十分显著,因/剂量组给药剂量适中,降压效果稳定, 结合《药典》中二味药作用量及古方中显示二味药的降压效果的用药量确定该复 方中钩藤:罗布麻为:。 .复方降压片对肾性高血压大鼠 血压的影响 由表、图可见,术前大鼠血压在~之间,属正常范围。术后血 压逐渐升高,三周后血压明显高于术前.,术后四周,形成稳定高血压, 血压平均升高,视为模型成功。复方降压片/组对.一 次性灌胃给药后,血压明显下降.,与模型组比降压幅度达.%。 用药期间血压持续下降,连续用药五天后血压降到最低,降压幅度达.%。 /剂量组在给药后开始降压,降压幅度达.%,在连续给药五天 后血压降到最低.,降压幅度达.%。/剂量组在给药五天后 开始出现降压作用,降压效果显著.,幅度为.%。由表、图、 图可见,在对?血浆中血管紧张素和心钠素含量复方降压片的药 放学研究 吉林农业大学硕士学位论文 的测量结果表明,复方降压片对肾性高血压大鼠含量影响不明显,各给药 组与模型组比较,无显著差异.。而使含量则有增加的趋势。 .复方降压片对原发性高血压大鼠血压的影响 由表、图可见,/剂量组在第一天给药后的最大降压幅度为 . %。在连续给药后第三天血压开始显著下降..,最大下降幅度 达.%,到给药第天降到摄低.,降低幅度达.%。/ 剂量组第一天给药后最大降压幅度达.%,给药第二天开始显著降压 ..,降压幅度达.%,弱于/。/剂量组降压效果 不明显,仅在给药第三天和第二十天出现显著降压.,最大降压幅度达 .%。由表、图可见,对血浆中、、含量的测定结果表明, 血中与空白组比较有降低的趋势,则明显高于空白组,变化 不明显。复方降压片中,低剂量可使含量明显增加高剂量增加不明 显,这可能是试验误差造成的,对影响不明显,对含量有降低趋势。 .复方降压片对豚鼠眩晕模型的影响 由表可见,复方降压片可明显减少豚鼠自耳窝内滴注氯仿后、 后的眼球震颤次数和头左右摇摆次数,表明其可改善豚鼠的眩晕症状。提示,其 在临床上可缓解高血压患者的眩晕症状。 .复方降压片对大鼠血液流变学的影响 通过对血瘀大鼠血液粘度、血沉和红细胞压积测定,体外血栓形成试验等来 观察复方降压片对血瘀大鼠血液流变学的影响。 结果表明由表可见,大鼠血瘀症状出现后极易形成血栓。模型组和 空白对照组的血栓长度、湿重、干重分别为.?.、. ?.、.?.、.?.、.?.、.?.,均有明显差 异,表明大鼠血瘀模型复制成功。/给药组上述指标分别为..、 .?..、?.,/给药组分别为.?. .、.?..、.?.;/剂量组分别为. ?.、.?....?..,可见。给药组和模 型组比较有明显差异,提示,该复方制剂可明显抑制大鼠体外血栓的形成。 由表、表、图可见,其对全血与血浆粘度测定结果为,模型组全血粘度为复方降压片的药教学研究 吉林农业大学硕士学位论文 .?.高切、.?.中切、.?.低切、.?.血 浆粘度, /与/剂量组全血粘度各切变率下与模型组比较 均显著降低.;但对血浆粘度无明显影响。/剂量组可显著降低 血细胞下沉速度,和模型组比较有显著差异.。各剂量组对红细胞压积 均无明显影响.。由上可见该复方制剂可明显抑制大鼠体外血栓的形成. 同时可使血瘀动物全血比粘度、血沉与模型组比明显降低,但对血浆比粘度及红 细胞压积影响不明显。表明其可降低血液粘度,改善血瘀动物血液流变性。提示 对于防治心血管疾病有~定作用。 可见,该复方/与/剂量组可明显降低血瘀大鼠全血粘度, 改善大鼠的血液流变学。 .对小鼠急性高血脂模型的影响 由表、图可见,模型组与给药组小鼠腹腔注射%的蛋黄乳液后, 小鼠的胆固醇水平达到高峰,与空白对照组比有显著意义.,表明,小 鼠高血脂模型造模成功。复方降压片/剂量组小鼠灌胃给药后,可显著 降低小鼠血清胆固醇水平,与模型组比较有显著意义.,复方降压片 /和 /剂量组分别对小鼠灌胃给药后,均可显著降低小鼠血清中 甘油三酯水平,和模型组比较有显著意义.。三个剂量组对血清中 高密 度指蛋白水平均无明显影响。 .小鼠。。确定 表见动物死亡分布情况及计算结果。实验过程观察到:各组动物 在:服 给药后当天精神萎靡,一天后除死亡动物外,其余动物均活动恢 复正常,进食、 进水、排便均正常。死亡动物多集中在小时内。经法计算小鼠 ./,%可信限为.?. ,【。 譬.干. ??制?寸?. 口.皂.,口一 .晓一.『【刊?.寸一 ;一干,一 ?一.一一刊?”. 镑.一。【 葛.?,?.寸 ?.千.”~ ?.【? 虮小.?棚?.寸 ?『州。叼 卜卜【刊?吼.?一 ?.【鬲口.? 司 超罱 巴?啸口若一丑一对七翟霉 口,鬲.? 耋垂 .?。 口..口.【. 譬.【?, 一出目薯一《星窖叵恃昙螺豁 葛 一“ 型罩晒一 畸『制卜冀? 【.州. 一们刊。?一誉蘸蛊雌目艴日暖靛罐罪一僻 ?.一州. ?.%一.【。 口.一制.【 口?.干.一 靼柱糯 .干口.兰 ??,午一口, 千冷.口一 ?”.一?寸”一 岜%目, 吣《?吕 吲甏按皿删 ?,??楼窜一 兰警 崇鬲 鎏三 ?口.千芏 ?.州【州”.【 《:觜岛?. 司司司”.一卅寸。一 .有.” 西.【制。寸口『 ?.【州咕”【 ?一州寸.” ,.卜制西【. 【忘.葛 乱.母州卜 .?气一 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.?. .?. .?. 中剂量组 低剂量组 .?. .?. 鼍 固 已 模型组 降压号 / / / 图复方降压片对肾性高血压大鼠含量的影晌 .鼍 。 模型组 降压号 / / / 图复方降压片对肾。生高血压大鼠含量的影响 . 帐鞋 ?.?刊.卜 【『刊?. ?『甜??.卜 ?.刊一?.?一 ,州寸.?一 。。.甜器.霉 ??.?刊?竹节 ?刊寸小一 ?卜.刊甘 .剞?一 翟 一一 霉器 ?.刊? 吣竹.?刊“ ??.譬刊卜?, 卜.?刊.. 甘州【世. ?.?『制旧可.卜 ??.【坩?刊 .?刊兮『 寸.刊小?一 ?纠“刊。叶?一 吕崔目目《垦曾叵恃呈『豁船一辑 ?斟卜簟。 一.啦口 ??.【刊?.卜 ?.【刊寸。昏一 一?刊卜.?一兽醛器瞪目至?噬坦目姬型氯隧靛扯出世恹州求 蚓柱躲 甘甘.【剞卜.刊 ??刊 . 【.【刊寸?“ ? 口 甘 ?,宕 删磊乌差船 蕞蚓 匪禽?弘 妒。出壁 《咖罹博 删幕子 蠹唰属单 帐转 ?刊一?乱 ”刊?. 叶州.?『 .刊??. 。乱.一刊卜也? 口.一制端竺 ;?.刊?? “.?刊饥.一 :. 制寸.?. ?刊蜀.” 帐口一躲 ?.一刊. 寸一刊?寸 .?州?. 节『【槲卜口. 一.卜刊? .母. ;。?刊器. 卜.州竹叼口一 ;口?.刊篙。一 一刊.?一 日。心.一刊一?一 怅躲 卜.?刊卜 .一引 口.一刊。一.一 卜刊寸.“ ?.刊.. :心乱.刊?吐?『 刊?冀 :西刊一峙. 州,一 日日日窝.刊荨.葛 嗽?姝 寸卜州。心.寸 ?一.刊.一 卜乱.?刊寸【 :刊.?『 .刊?. 奇.“刊卜.?一 .一州?? .一.刊”.?一 ;日?.刊寸 .刊.一 墨墙崩《垦曾叵岖‰繇 。日叶刊 帐?躲 卜一.『【刊一 呐?夺州寸岫.. :?.制. 。节刊寸寸?. .卜刊寸 ?,刊。小.?一 吼一.一制口.乱一 ;葛一刊 ?.州葛.?一 .. 怅日瓣 卜.一刊?凸. 崞一剞心? ?乱.口制寸 ?州荨.? .?.一刊口?. 百.『州口一 .【刊叶【 .奠刊?吨?一 :叶吨四一州.口一 。一【刊乱.『一 骷蜮 删 吕 上 苦 “ 磊 点 宅 一 吕口??厶【.?苗品。善口甚曼王呐?舌品萎山芦铺磊《警孟 巷 广 。出 喜 兽罐幽目一量?一噎趟目怔掣弼隧靛止龃世牝聪匝 茬 糯 艇 鹳 。 盎岳 ?.?一刊卜吼.一 蛩萎 卜叫.釉釉州?.昏 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