中国两性生殖卤虫各品系碱性磷酸酶_酸性磷酸酶同工酶基因的
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
达特征
V o l1 18 N o 14 18 卷第 4 期 第 东 海 海 洋 Ξ D ec. , 2000 2 0 0 0 年 12 月 DO NGHA IM A R INE SC IENCE
() 文章编号: 1001290920000420022207 X
中国两性生殖卤虫各品系碱性磷酸酶、
酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征
1 2 3 侯 王 林,熠, 邹向阳
(11 辽宁师范大学 生命科学学院, 辽宁 大连 116029; 21 大连市卫生防疫站, 辽
)宁 大连 116021; 31 大连医科大学, 辽宁 大连 116027
摘 要: 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法, 对中国两性生殖卤虫 的 14 个品系 A r tem ia s in ica 的碱性磷酸酶、 酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征进行了
分析
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, 并与 的碱性 A r tem ia u rm iana 磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征进行了比较研究。结果表明: 中国两性生殖卤虫各 品系的 、同工酶的酶谱相同, 均为单体酶。、同工酶分别由 2 1、A L PA C P A L PA C P A L P A C P 2 1, 2 2、2 2, 2 3、2 3 三个基因座位编码, 2 1、2 1 座位存在 A L P A C P A L P A C P A L P A C P 、 两个共显性等位基因, 2 2、2 2 存在 、、三个等位基因, 2 3、2 3 ab A L P A C P abc A L P A C P 座位存在 、两个等位基因。共发现 7 种基因型: 11 01 01 01 0ƒƒ, 2ƒƒ, 3ƒƒ, 4ƒ ab ccbb bb bb aaaaƒ1 0ƒƒ1 0ƒƒ1 ƒƒ。仅在 1中发现 0ƒƒ、0ƒƒ基因 , 5, 6, 7ab aaacab acaaab ab aaA u rm iana ccbbbb bb 型, 而 1的主要基因型为: 0、 0、 0。 仅 品系的 2 1、ƒƒƒƒƒƒA s in ica acaaab aaaaaaGN A L P A C P
2 1 有基因座位表达。
关键词: 中国两性生殖卤虫; 碱性磷酸酶; 酸性磷酸酶; 同工酶; 基因表达特征中图分类号: 9591223, 786 Q Q 文献标识码: A
()()同工酶的 中国两性生殖卤虫 1各品系碱性磷酸酶 、酸性磷酸酶 A s in ica A L P A C P
1, 2 3, 4 研究仅见侯林等、高明君等的报道。但对中国两性生殖卤虫各品系 、同工 A L PA C P
酶基因的表达特征、基因型的分布特征、各等位基因的分布特征等较深入的研究在国内、外
尚未见报道。对中国两性生殖卤虫各品系 、同工酶基因表达的深入研究将对揭示A L PA C P
中国卤虫种群的遗传多样性、 各品系的遗传变异特征具有重要的理论意义, 同时可对其它
无脊椎动物的遗传多样性的研究提供参考资料。
1 材料与方法
本文共研究了中国两性生殖卤虫种群 14 个品系。采用时间、地点、卤虫品系的倍性组
Ξ 207220 1999收稿日期:
( )基金项目:国家自然科学基金资助项目 39807118, 39200015
( ) 作者简介:侯林 1957- , 男, 天津市人, 辽宁师范大学生命科学学院副教授, 理学博士, 主要从事甲壳动物
成等基本情况见表 1。卤虫的培养、卤虫卵的孵化、养成及倍性检查、酶液的提取、电泳方 法、酶的染色、酶谱的分析及等位基因的命名见文献 1, 2 。为了比较中国两性生殖卤虫 与 1碱性磷酸酶、 酸性磷酸酶同工酶基因表达特征的异同, 特选取了伊朗的 A u rm ia n a
1品系。A u rm ia n a
表 1 研究的材料
品 系 采集地点 采集时间 数量 生殖方式 倍性 采集人
内蒙纳林淖 1991 年 10 月 30 两性生殖 作者 2n N L A r tem ia sin ica 内蒙杭锦旗 内1991 年 10 月 两性生殖 作者 作30 H JQ 2n 蒙苏贝淖 内蒙1991 年 10 月 两性生殖 者 作者 230 SB n 白彦淖 内蒙察 两性生殖 作者 作1991 年 10 月 30 2B Y n 汉淖 内蒙努合两性生殖 者 作者 1991 年 10 月 30 2n CH 图 内蒙水泉子 两性生殖 作者 蔡1991 年 10 月 山西运城盐湖 两性生殖 含筠 蔡30 2N H n 1991 年 10 月 吉林工农湖 青两性生殖 含筠 作1991 年 10 月 2SQ 30 n 海小柴旦湖 河两性生殖 者 蔡含1991 年 10 月 YC 30 2n 北尚义 西藏玛两性生殖 筠 蔡含1991 年 10 月 2GN 30 n 多湖 西藏乌兰两性生殖 筠 蔡含 1995 年 10 月 2CD 30 n 湖 新疆阿尔泰 两性生殖 筠 1996 年 10 月 两性生殖 2SY 30 n 1997 年 10 月 两性生殖 2M D 30 n 1997 年 10 月 2W L 30 n 230 A T n
1 ? 30 1提供 A u rm iana A U 两性生殖 so rge loo s P 伊朗 U rm ia 湖 2n
结果 2
211 中国两性生殖卤虫各品系 和 同工酶等位基因的表达 A L P A C P
在中国两性生殖卤虫各品系 、的研究中发现 、的酶谱相同, 均为 A L PA C P A L PA C P
单 体酶。、同工酶分别由 2 1、2 1, 2 2、2 2, 2 3、A L PA C P A L P A C P A L P A C P A L P A C P 2 3 三个基因座位编码, 2 1、2 1 座位存在 、两个共显性等位基因, 2 2、 A L P A C P ab A L P
2 2 存在 、、三个等位基因, 2 3、2 3 座位存在 、两个等位基因。通 A C P abc A L P A C P ab
1 5过对酶谱的研究共发现 7 种基因型: 11 01 01 01 0ƒƒ, 2ƒƒ, 3ƒƒ, 4ƒƒ, ccb b b b b b aaaaab aa01 01 。仅在吉林工农湖卤虫品系中发现 2 1、2 1 座 ƒƒ, 6ƒƒ, 7ƒƒacab acaaab ab aaA L P A C P 位, 而且表达产物均为杂合体 在中国两性生殖卤虫各品系中发现品系间的多态现象, 仅 , ab
()在 、、品系发现品系内的多态现象 图 1、 表 2。N L CDW L
212 中国两性生殖卤虫各品系 A L P、A C P 同工酶的基因型的分布
中国两性生殖卤虫各品系 A L P、A C P 同工酶的基因型的分布情况见图 2 和表 2。其中
0、0基因型仅在伊朗的 1品系中发现, 而 基因型仅在 ƒƒƒƒƒƒccb bb b b b A u rm ia n a ab ab aa GN品系中表达, 0acab 基因型仅在 N L 品系中出现。 ƒƒ
通过表 2、图 2 可以清楚地看出 H JQ 、N H、SQ 、YC、SY 品系主要的基因型为 0ac ƒƒ
11 01 01 01 01 01 01 ƒƒ, 2ƒƒ, 3ƒƒ, 4ƒƒ, 5ƒƒ, 6ƒƒ, 7ƒƒ,下同。 ccbbbb bb aaaaab aaacab acaaab abaa
图 1 中国两性生殖卤虫各品系 、同工酶的表现型和基因型A L PA C P 。 该基因型在 14 个品系中占 381333 6% , 、、品系与其它品系有明显的区别, aaSBB YCH
间 全部为 0ƒab ƒaa 基因型。青藏高原产的卤虫品系 CD、W L 大多以 0ƒaaƒaa 基因型为主,
品系以 0 ƒ或出现 0ƒacƒaa 基因型, 这也表现出与其它卤虫品系的亲缘关系和联系。 而 A U
ƒ基因型为主、品系以 0ƒƒ为主。ccb b N L acab
表 2 中国两性生殖卤虫各品系 、同工酶基因型的分布A L PA C P
1 2 3 4 5 6 7 基因型编号
11066 7 01933 3 0A sin ica N L
11000 0 H JQ
11000 0 SB
11000 0 B Y 11000 0 CH
11000 0 N H
11000 0 SQ 11000 0 YC
11000 0 GN
01800 0 01200 0 CD 11000 0 SY
11000 0 M D 01833 3 1166 7 0W L
11000 0 A T
1 01866 7 01133 3 A u rm iana A U
图 2 中国两性生殖卤虫各品系 A L P、A C P 同工酶的基因型分布 213 中国两性生殖卤虫各品系 、同工酶的等位基因频率 A L PA C P
各品系等位基因的分布情况见表 3。由表 3 可见, 中国两性生殖卤虫种群中仅 GN 品系
表 3 中国两性生殖卤虫各品系 、同工酶等位基因频率A L PA C P
座位 A U N L H JQ SB B Y CH N H
a ƒƒƒƒƒƒƒ2 1A L P b ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ
01500 01500 1500 1500 1500 1500 0 0000a
2 201033 01500 01500 01500 1133 0 0 0 A L P b
01500 01500 01867 01467 0 0 0 c
0 a 01533 11000 11000 11000 11000 11000 2 3A L P 11000 01467 0 0 0 0 0 b
ƒƒƒƒƒƒƒa 2 1A C P b ƒƒƒƒƒƒƒ
0 1500 1500 1500 1500 1500 1500 000000a
2 2 01133 01033 01500 01500 01500 A C P 0 0 b
01500 01500 01867 01467 0 0 0 c
0 0a 1533 11000 11000 11000 11000 11000 2 3A C P 11000 01467 0 0 0 0 0 b
座位 SQ YC GN CD SY M D W L A T
a ƒ ƒ 01500 ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ 2 1A L P ƒ ƒ 01500 ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ b
01500 1500 1500 1900 1500 1000 01917 1000 000011a
2 2A L P 0 0 0 0 0 0 0 0 b
01500 01500 01500 01100 01500 01083 0 0 c
01533 11000 11000 11000 11000 11000 11000 a 0 2 3A L P 11000 01467 0 0 0 0 0 0 b
0a 1500 ƒƒƒƒƒƒƒ2 1A C P 01500 ƒƒƒƒƒƒƒ b
01500 1500 1500 1900 1500 1000 01917 1000 000011a
2 20 0 0 0 0 0 0 0 A C P b
01500 01500 01500 01100 01500 01083 0 0 c
0 01533 11000 11000 11000 11000 11000 11000 a 2 3A C P 11000 01467 0 0 0 0 0 0 b
的 2 1、2 1 座位有基因表达, 而且 、 基因的频率相等, 均为 01500。 在 A L P A C P ab A L P
为 01133; 2 2、2 2 座位中 品系 基因不表达, 基因表达程度较低, SB、B Y、CH A C P A U a b
品系 c 基因不表达, a、b 基因频率相同; H JQ 、N H、SQ 、GN 、SY、YC 品系 b 基因不表
达而 、基因频率相同, 均为 01500; 、品系 基因表达程度非常高, 为 019 左右,ac CDW L a
为 011 左右, c 基因表达程度较低, b 基因不表达; M D、A T 品系仅 a 基因表达, N L 品系 、 、个基因均表达。2 3、2 3 座位仅 品系 基因表达而 基因不表达, 3 abc A L P A C P SQ b a
品系 基因不表达, 、品系 、基因的表达程度基本相同, 均为 015 左右, 其 A U a N L YC ab
它品系均为 基因完全表达而 基因不表达。a b
3 讨 论
两者间的亲缘关系也 1在中国两性生殖卤虫的进化过程中起着重要的作用, A u rm ia n a
2 5 6 较近, 有一些同工酶等位基因的表达特征是相同的。2等、等、 A b reu G ro bo is So rge loo s
7 8 2 等曾认为 . 与中国两性生殖卤虫为同一个种, 但蔡亚能、侯林等则认 P illa A u rm ia n a
为后者是独立于世界五大两性种之外的一个新种, 虽然中国两性生殖卤虫与. 的A u rm ia n a 亲缘关系较近, 但存在生殖隔离, 而且二者在同工酶等位基因的表达特征、 染色体等方面
与中国两性生殖卤虫的 、同工酶等位均存在较大差异。在本研究中 A .u rm ia n a A L PA C P
基因的表达特征截然不同, 在 .品系中共发现两种基因型: 0、0ƒƒƒƒ,A u rm ia n a ccb bb b b b 这两种基因型在中国两性生殖卤虫品系中是根本不存在的。 在中国两性生殖卤虫各品系中 主要的基因型为 0ƒacƒaa、0ƒab ƒaa、0ƒaaƒaa, 而 ab ƒab ƒaa 基因型仅在 GN 品系中表达, 0ƒ acƒab 基因型仅在 N L 品系中出现, A . u rm ia n a 与中国两性生殖卤虫在 A L P、A C P 同工酶 等位基因表达方面存在的差异也说明了中国两性生殖卤虫为不同于 . 的中国两 A u rm ia n a 性生殖卤虫。
在研究中还发现中国两性生殖卤虫各品系间也存在多态现象, 在 、、、A U N L CDW L品系发现品系内的多态现象。 本研究所采集的卤虫, 其生活环境均为高盐水体, 由于受盐 度的限制, 动植物群落结构相对简单, 群落多样性指数较低, 所以环境因子成为促进卤虫
种群变异的主导因素。 如我国内陆的山西运城盐湖等, 全年盐度变化与季节性盐湖相比幅度较小, 季节特征主要表现在温度和盐度的周期变化上, 随着冬季的到来, 盐度增高, 温 度降低, 自然其食物也随之减少, 环境条件随之恶化; 而一些季节性盐湖湖水很浅, 在这 些生境中盐度的变化是剧烈的, 例如我国内蒙的一些季节性盐湖, 冬季湖水干涸, 夏季有 些年份因暴雨形成洪水, 致使盐度降低, 卤虫种群因此而消失; 有些年份因高温干旱, 致 使湖水的盐度增高, 卤虫只能维持生命, 仅春秋 5 个月的时间里卤虫能完成 2, 3 个世代的 繁衍。 在这种环境压力下极易使得卤虫种群产生适应于这种环境的突变和变异。 由于作为
一个多肽的氨基酸顺序是由结构基因 m RN A
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的 DN A 分子的片段或基因为结构基因,
的核苷酸顺序决定的, 因而, 氨基酸顺序的任何变化都是 DN A 突变的结果。两性生殖卤虫 种群的 、同工酶研究所检测到的多态现象, 正说明了种群为适应这种不利的环境 A L PA C P
而产生的遗传变异, 同时产生了基因的多样化及基因的突变、变异。由于基因的多样化, 使
保存下来并维持一定遗传帄衡, 这种帄衡使卤虫群体中多态个体数量相对稳定, 提供了个 体的遗传变异水帄, 使有利基因保存下来, 增强了群体适应环境的能力, 这也是基因多态、 蛋白质多态现象能够保存下来的主要机制。
研究中发现, 在中国两性生殖卤虫种群中编码 、同工酶的等位基因数为 14A L PA C P
2 1、2 2、、2 3、2 1、 , , ; 个, 每种酶存在 7 个等位基因: A L P ab A L P abcA L P abA C P a
2 2、 、 2 3、 。 这种基因的多样性也为中国两性生殖卤虫种群适应于 , , b A C P abcA C P ab
不良环境而产生的突变和变异提供分子生物学的证据。
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() Expre ss ion cha ra c ter iza t ion s of a lka l in e pho spha ta se AL P
() an d a c id pho spha ta se ACPisozym ic gen e s of b isexua l
A r tem ia popula t ion s f rom Ch ina
1 2 3, , 2HOU L in W A N G Y iZOU X ian gyan g
( 1. , , 116029, ; 2. C ol leg e of L if e S c ien cesL ia on in g N orm a l U n iv e rs ity D a l ia n C h in aD a l ia n
116021, 3. S a n ita t ion a n d Ep id em ic P rev en t ion S ta t ion , D a l ia n C h in a; D a l ia n M ed ica l
), 116027, U n iv e rs ity D a l ia n C h in a
() () : A bstra c tE xp re ssio n o f a lk a lin e p ho sp h a ta se A L P an d ac id p ho sp h a ta se A C P iso zym ic
14 gen e s o f b isex u a l A rtem ia st ra in s f rom C h in a w e re stu d ied b y m ean s o f po lyac ry lam ide
( ) . 1 ge l e lec t rop ho re sis m e tho dT h e exp e r im en ta l re su lt s show s th a t th e re a re sam e
. . geno typ e s an d p h eno typ e s in A s in ica an d A u rm ia n a an d a lk a lin e p ho sp h a ta se an d ac id
( )2 1, 2 A L P an d A C P a re co ded b y A L P p ho sp h a ta se iso zym e s a re m o nom e r iso zym e s;
2 1, 2 2, 2 2, 2 3, 2 3 , , 2 1, A C P A L P A C P A L P A C P lo c ith e re a re ab a lle le s in A L P 2 1, 2 3, 2 3 , , 2 2 2 2. A C P A L P A C P lo c iab an d c a lle le s in A L P an d A C P T h e seven
1 5: 11 01 01 01 0ƒƒ, 2ƒƒ, 3ƒƒ, 4ƒƒ, k in d s o f geno typ e s w e re d isco ve redccb b b b b b aaaaab aa
01 01 11ƒƒ, 6ƒƒ, 7ƒƒ. acab acaaab ab aaA s in ica an d A u rm ia n a h ave th em se lve s ch a rac te r ist ic
, A L P an d A C P iso zym ic p a t te rn sth is p ro v ide s p rec ise b io ch em ica l in dex fo r d ist in gu ish in g
( ) 11ƒƒƒƒ; 300d iffe ren t A s in ica an d A u rm ia n a st ra in sccb b an d b b b b w e re fo u n d o n ly in
1ƒƒƒƒƒƒ1ƒ 0, 00A u rm ia n a an d acaaab aa an d aaaa geno typ e s w e re fo u n d in A s in ica an d ab
1ƒ. ab aa geno typ e in A s in ica GN st ra in o n ly
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