【doc】野马追一般药理作用实验研究
野马追一般药理作用实验研究 四川生理科学杂志2005;27(1)41
中药药效物质基础研究的新思路探讨.
张艺,王平,张静,孟宪丽
(成都中医药大学药学院,成都610075)
中药药效物质基础研究是实现中药现代化的重要内容和 关键问题之一.在回顾国内外中药药理和中药化学研究现状 的基础上.认为闷前中药药效物质基础研究没能很好地将中医 理论与现代药学理论结合.化学成分
分析
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与药理效应研究结 合.动物实验与临床药理研究结合.所取得的结果难以揭示中 药作用原理.不能有效地提高中医临床疗效,指导现代中药新 药的研制.
提出中药药效物质基础研究应在肯定中药I临床疗效的前 提下.从整体动物实验,器官和组织,细胞,分子生物学四个水 平上筛选研究中药有效组分.结合中药化学指纹图谱(HPLC- MS等色谱指纹图谱)和中药生物指纹图谱(中药基因组学指纹 图谱,中药蛋白组学指纹图谱等).建立能同时体现有效组分和 分子生物药效信息的中药药效组分指纹图谱.在分子水平L建 立和完善整个中药药效指纹图谱研究体系.并据此考察中药 胃肠动力学,血清药化学等有效组分动态变化的主要过程.应 用数学计算机技术和方法研究中药有效组分指纹图谱与其药 效的相关性.实现中药药效物质基础的现代化学,药理学和分 子生物学等多学科方法的
表
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达.进而探索中药的药效物质基 础,代谢过程及作用机理,最终阐明中药治病原理.创建中药药 效物质基础的现代研究体系.
该体系的建立对于中药药效物质基础和作用机理,中药方 剂配伍规律及中药创新药物的研究和开发也具有非常重要的
指导意义.对于让全世界更多的人了解中药理论的实质.促进 中药走向世界.贡献全人类.弘扬中华民族灿烂的中医药文化 具有重要的历史和现实意义.
抗真菌研究中体癣模型研究现状及方法学思考
曾勇
(成都中医药大学药理教研室,成都610075) 皮肤癣菌病由皮肤癣菌侵犯表皮的角质层,毛发和甲板引 起进行抗真菌研究包括体外实验和体内实验.H前体外抗真 菌实验报道较多,进行动物模型实验报道极少.本实验室研究 人员杳阅近年抗真菌实验参考文献和结合自身工作中实践,总 结了体癣模型实验的常用方法并提出几点方法学思考. 1体一模型常用造模方法
实验一般选用健康白色豚鼠.在背部局部脱毛.形成直径 约3,5cm的无毛区域.24小时后用无菌细砂纸檫破皮肤,以轻 度渗血为宜.接着用配好的真菌菌株孢子茵丝混悬液0.1m1.均 匀接种于破损皮肤上.然后每天观察局部皮肤病损程度.当局 部出现红肿后.分组给药并每2天取标本做真菌镜检和培养.观 察药物的抗真菌作用和豚鼠的病变程度.
2方法学思考
(1)真菌菌株的选择:文献报道多选用石膏样毛癣菌,在实 验中我们发现石膏样小孢子菌,羊毛状小孢子菌和红色毛癣荫 也能引起病变.成功造成体癣模型.但菌株可能因为来源不l--1 而致病强弱差异很大,所以抗菌研究需要结合相应体外实验进 行.
(2)真菌混悬液中真菌定量:很多文献报道缺乏接种真菌 混悬液中菌丝和孢子数量.我们发现数量不同肘病变程度影响 较大,菌株不同需要的数量级也不同.最好先做好预试.一般以 105—108数量级为宜.
(3)皮肤病变程度的评价:很多文献资料以某天治愈率和
病变局部直径为主要指标判断病变程度.这缺乏相应的客观性 和影响因素较大,我们采用日本文献报道的评分来衡最.具体 如下:无病变为0,有少数"小红斑"性丘疹或病变倾向痊愈或出 现新生毛发者为1,红斑面积扩大.周围发红者为2,红斑全面扩 大.有大量鳞屑及厚痂皮形成者为3,出现出血者为4.这种标 准能较好反映局部病变程度.统计也方便.
野马追一般药理作用实验研究
李剑平,周远大,曾敏莉
(1重庆南川市人民医院内科;重庆医科大学附属第一?医院临床药理研究室)
1,野马追为菊科泽兰属植物二叶尖佩兰,多年生草本植物.以全草人药.所含化学成
分主要为黄酮类,生物碱类,挥发
?国家自然科学基金资助项目(基金嫡号:3037175630271581)
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油和香豆精等.文献报道.野马追能提高体液免疫和细胞免 疫,对流感病毒有一定的抑制作用,对非典型肺炎冠状病毒有 预防作用,对临床常见革兰阳性菌和阴性菌及白色念珠菌均有 较好的抗菌作用.此外.能平喘止咳祛痰,抗炎消肿,已在临床 广泛应用.特进行野马追一般药理作用实验研究. 2,野马追:野马追提液.棕黑色液体,味苦涩,由江苏安格药 业有限公司提供.批号003086.含量2.56g(生药)/mI. 健康合格一级Wistar大鼠和昆明种小鼠.雌雄各半,体重 220,250g和18--22g.均由重庆医科大学实验动物中心提供. LMB-2B二道生理
记录
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仪(成都仪器厂生产)
MPA-V型多导生物信号分析系统(第二军医大学生产) t~_J6511型心电图机(上海光电医用电子仪器有限公司生产) 3,选取健康合格昆明种小鼠160只,随机分为神经系统,自 主活动,激怒反应和爬杆运动四组,每组40只.分别灌服野马追 大剂量组(剂量为小鼠LD50的115,即45g(生药)/kg),中剂量
组(剂量为小鼠LD50的1/10.即22.5g(生药)/kg),小剂堵组 (剂量为小鼠LD50的1/20.即12g(生药)/kg),空白组(生理盐 水).给药容量0.5ml/10g.
结果:结果表明.野马追对动物自主活动,激怒反应,爬杆 运动,神经精神活动元明显影响.
4,选取健康合格一级Wistar大鼠40只,雌雄兼用.随机分 为野马追大剂量组(剂量为小鼠LD50的115,即45g/kg).中剂 量组(剂量为小鼠LD50的1/10,即22.5g/kg)J.小剂量组(剂 量为小鼠LD50的1/20,即12g/kg),空白组(生理盐水)共4组, 每组10只大鼠.各组试验动物均行口服给药,给药容量lml/ 100g,经10%乌拉坦溶液lg/kg体重复腔注射麻醉后,右股动 脉插入塑料导管连接于MPA-V型多导生物信号分析系统(第 二军医大学生产).管内用50u/ml肝素生理盐水抗凝,记录血 压.先记录给药前基础血压.待血压稳定后,分别记录口服给 药后0.5,1,2,4h动脉血压(平均动脉压MAP).分组统计各组 动物MAP变化.行给药前后以及生理盐水组问t检验.判断药 物对MAP的影响,同时用E(511型心电图机(上海光电医用 电子仪器有限公司生产)测定给药前后?导联心电图变化.分 组统计各组动物心率,ORS波群时间(ms),R波电压(mv),ST 偏移幅度,T波(m)和心律变化.
结果表明.野马追口服给药后.血压,心律,心率均未见明 显变化.组间无明显差异.提示野马追口服药对正常心血管系 统无明显影响.
5,小结:野马追对实验动物神经精神系统,心血管系统和 呼吸系统正常生理活动无明显影响.
人宫颈粘液抗菌机制:抗菌多肽的分离鉴定
李明,潘小玲,王莉莉,冯云,黄宁,吴琦,王伯瑶
(四川大学华西医学中心感染免疫研究室;华西第二医院妇产科,成都610041)
目的:从人的了宫颈枯液分离鉴定抗菌多肽.探讨了.宫颈
粘液抗菌机制方法:用5%乙酸提取人子宫领枯液可溶物,应 用电泳凝胶抗菌蛋白分析法(gdovedaya~say)分析其抗菌蛋 白,制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU.PAGE)及反相高 效液相色谱(}{】LC)分离纯化抗菌多肽.凝胶琼脂糖弥散法抗 菌检测抗菌活性.纯化的抗菌多肽进行氮端氨基酸序列测定. 根据其序列设计简并引物,利用3'-RACE-PCR技术扩增其全长 cDNA.通过BLA_Sq"程序分析比较与已知蛋白的同源性.进 —步应用常规基因重组技术构建其原核表达质和制备重组多 肽.采用(Minim-,dInhibitoryConcentration)和MBC(Minimal tctericidalConcentration)检测重组多肽的抗苗效能.结果:从 宫颈枯液中分离纯化到一个具抗菌活性的多肽.其氮端氨基酸 序列和cDNA序列与HMG-17相同.制备获得了重组蚺17 多肽.SDS-PAGE显示其纯度较高.重组HMG-17抗大肠杆菌 和绿脓杆菌的MIC分别为10.42?3.13和27.78?8.33~e,/L' 与中性粒细胞抗菌肽HNP1.3相当;MBC分别为20.83?6.25 and55.56?16.67mg/L.结论:除已知的抗菌肽外,HMG-17亦 可能是宫颈枯液含有的抗感染效应分子之一.
人I3防御素一2与前列腺癌特异性膜抗原嵌合蛋白真核表达 质粒构建及其诱导的小鼠特异性免疫应答
李明,黄宁,吴琦,王伯瑶
(四川大学华西医学中心感染免疫研究室,成都610041) 探索人口防御素2(hBD一2)和前列腺特异性膜抗原(PS. MA)共表达重组核酸疫苗对前列腺癌的免疫治疗.研究以 pcDNA3.1为载体,构建重组质粒pcDNA3.1/PSMA和I)cD. NA3.1/hB『)-2.PSMA,通过RT-PCR和免疫组化检测其表达. 并免疫小鼠,进行血清中抗体检测.CT)4,(瑚T淋巴细胞数 目测定及CTL特异性杀伤作用检测.结果显示构建的质粒转 染?S7细胞后能表达目的基因,免疫小鼠后能在体内持久表 达.可以诱导产生特异性抗体.能有效的刺激T细胞增生.诱导
特异性CTL反应.当以hBD-2作为免疫佐剂时.CTL活性增 强.本研究成功的构建了含PSMA的表达质粒,免疫小鼠可以 诱导出有效的体液和细胞免疫.为前列腺癌的免疫治疗奠定了 一
定的实验基础.