精液的透射电镜制样方法

精液的透射电镜制样方法精液的透射电镜制样方法精子属游离细胞 , 故较分散 , 不易行常规电镜制样处理 , 且精液中含有较多的精浆成分 , 会影响电镜观察 , 所以在精液透射电镜样品制备时 , 必须对其进行特殊处理。 1 材料和方法取临床病人精液 , 约 1 ml 左右 , 置清洁干燥的盘尼西林小瓶中 , 放 37 ?温箱约 40 min 液化后 , 移至离心管中 , 并加入约 2 倍于精液体积的 019 %生理盐水或 01067 mol/ L 磷酸缓冲液 , 用吸管上下抽动将其混匀。然后采 ...

精液的透射电镜制样方法精子属游离细胞 , 故较分散 , 不易行常规电镜制样处理 , 且精液中含有较多的精浆成分 , 会影响电镜观察 , 所以在精液透射电镜样品制备时 , 必须对其进行特殊处理。 1 材料和方法取临床病人精液 , 约 1 ml 左右 , 置清洁干燥的盘尼西林小瓶中 , 放 37 ?温箱约 40 min 液化后 , 移至离心管中 , 并加入约 2 倍于精液体积的 019 %生理盐水或 01067 mol/ L 磷酸缓冲液 , 用吸管上下抽动将其混匀。然后采用低转速、短时间离心图 1较完整精子 , 可见精子头、颈、尾部×10 000 () 1 500 r/ min , 5 min。再弃上清。共重复 3 次离心。离心完毕后 , 将离心管中上清液弃去 , 加入 ( 311 %戊二醛 1,2 ml p H 712,714 , 01067 mol/ L ) () 磷酸缓冲液配制, 置冰箱 4 ?, 固定保存。固定 () 2 h 后 , 用适当的工具可自制将离心团块轻轻挑 3 取出来 , 规整修块成约 1 mm方块 , 然后将其移至 ( 标本瓶中 , 再用 01067 mol/ L 缓冲液 p H712 , ) 714 , 加蔗糖清洗 3 遍 , 置 4 ?过夜。以后步骤按 1 透射电镜常规制样技术操作。即经 1 %OO后固 S4 定、乙醇或丙酮梯度脱水、Epo n 812 包埋聚合、超图 2 精子头部 , 可见精子顶体及其内外膜及腔隙 ×20 000薄切片、铀铅双染色 , 最后电镜观察。之离心时转速较低 , 时间也较短 , 故人为损伤较小 , 2 观察结果 ( ) 各种细胞器的保存较完好病理因素应排除在外。通过以上方法观察到的精子超微结构如图 1,4 图示可见精子顶体的内膜和外膜以及二者之间的腔所示。由于采用了近似生理环境的体外处理 , 加隙 , 轴丝的 9 组双管和中央的两条微管 , 以及大量参考文献生的学习 , 改进讲课方法 , 认真备课以每一手术为1 陈光华 1 联想推理法用于临床护理教学 1 护理学杂志 , 1 出发点 , 应用联想推理法教导学生 , 使他们的() 1996 ; 1 1: 56,57 知识由薄 ?厚 ?薄 , 强调掌握基础知识的前提下 ,1997 205205 收稿] 强化实践操作。电镜观察提供了多方面的观察之内容。 3 讨论以上结果证明 , 本方法制备的精子样品 , 在超微结构保存上还是比较优越的 , 且操作也较简单可 2 靠 , 比琼脂预包埋等方法要方便。另外由于采用了多次清洗离心将精浆去除 , 所以 , 样品观察中其背景较干净 , 非常有利于观察分析。在进行上述方法制备电镜样品时 , 有以下体会 ?因精子对固定液的渗透压特别敏感 , 所以要严格控制固定液的及缓冲液的浓度和离子强度。 ?离心 3 精子细胞 , 周围可见精子各段的横断面 ×7 500图时转速不宜过高 , 时间也不宜过长。 ?脱水包埋换液时 , 要沿管壁缓缓的加入液 , 注意不要打散离心团块。 ?离心次数不应少于 3 次 , 以防精浆成分去除不充分而影响观察。 ?挑取及夹取样品团块时 , 动作一定要轻柔、防止破碎。 ?因是人为离心成块 , 故细胞间无天然联系且较散 , 所以在切片时 , 块不宜修的过大 , 并要适当改变切速 , 刀角和厚度。参考文献应国华主编 1 医学生物学电镜技术与细胞超微结构 1 香 1 港 : 香港现代出版社 , 1993 : 30,55 图 4 精子轴丝的 9 + 2 结构及中段的线粒体鞘 ×12 000 洪涛主编 1 生物医学超微结构与电子显微镜技术 1 第 2 2 线粒体围绕外周致密纤维形成的螺旋排列的线粒体版 , 北京 : 中国科学院科学出版社 , 1984 : 124,126 鞘都清晰可见。再者由于离心时是一种自然随机沉 1997 208220 收稿] 降 , 所以精子的各部分各段基本上都可见到 , 且有的呈横切面 , 有的呈纵切面 , 这样就为胃癌术前 X 线内镜联合检查的评价 121 2 () 李秀莲张伟山西省第二监狱医院内科临汾 041000 临汾市第二人民医院消化科摘要胃镜和 X 线消化道造影联合检查 , 可提高确诊率和对早期胃癌的发现 , 为手术提供更可靠的依据。结果表明 , 28 例中早期胃癌 2 例 , 进展期 26 例 , 经手术病理证实 , 单纯 X 线检查漏诊 3 例 , 单纯胃镜检查漏诊 1 例 , 而两者综合检查术前 100 g 确诊。关键词胃镜术放射造影术胃肿瘤中图号 R73512 ) 并经手术病理证实后的做此两项检查者未算在内胃癌的早期发现 , 早期手术治疗 , 是提高胃癌 28 例做一报告。患者生存期 , 生活质量的前提。而 X 线消化道钡 1 临床资料餐造影与胃镜联合检查可提高胃癌的检出率 , 防止本组 28 例 , 男 22 例 , 女 6 例 , 男?女 = 36 ?1 误诊漏诊 , 作者总结 1990,1996 年全部经 X 线低发病年龄为 36,78 岁 , 其中发病率最高者为 51, (张气钡双重造影与胃镜联合检查确诊胃癌未同时

                    本文档为【精液的透射电镜制样方法】，请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑，
                    图片更改请在作品中右键图片并更换，文字修改请直接点击文字进行修改，也可以新增和删除文档中的内容。 
 该文档来自用户分享，如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服，我们会及时删除。

                    [版权声明] 本站所有资料为用户分享产生，若发现您的权利被侵害，请联系客服邮件isharekefu@iask.cn，我们尽快处理。

                    本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权，请谨慎使用。

                    网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传，仅限个人学习分享使用，禁止用于任何广告和商用目的。
                

下载需要：免费已有0 人下载

立即下载

精液的透射电镜制样方法

你可能还喜欢