欧洲人类生殖及胚胎学会PGS相关指南

欧洲人类生殖及胚胎学会PGS相关指南摘要:2005年，欧洲人类生殖及胚胎PGD（移植前基因诊断）学会出版了一套PGD最佳实践指南，为潜在的、现有和初步的PGD计划提供信息，支持和指南。随后可以发现新技术的引进和现有技术的发展。另外，最近根据人类生殖及胚胎学（ESHRE）关于如何编写/制定实践指南的建议,PGD协会认为是时候更新PGD指南。与之前一套指南覆盖PGD所有部分不同，新的指南被分为四套，包括一套关于PGD中心组织和三套关于方法的使用：DNA扩增，荧光原位杂交和活检/胚胎学。在这里，我们更新了PGD中心组织的部分。PGD中心组织包括一个持续扩大的PGD转移，在这里患者可以接受IVF中心的治疗，而他们的配子/胚胎可以在任何不依赖于PGD中心的地方进行检测。PGD/PGS（胚胎植入前遗传学筛查）有一系列关于样本的性质和快速周转时间的独特挑战。PGS（胚胎植入前遗传学筛查）目前是有争议的。在这里我们考虑了实验专家和临床专家关于PGD和PGS的意见。现有的证据表明PGS在卵裂期是无效的，但是PGS是否在胚泡期或极体中显著提高分娩率还不是太清楚。在这份修订本中包括PGS。这个文件应该可以帮助对PGD/PGS感兴趣的所有人去开发最好的实验和临床实践的可能。关键词：欧洲人类生殖及胚胎学会、移植前基因诊断（PGD）中心组织、胚胎植入前遗传学筛查、训练、意见前言植入前基因诊断（PGD）/植入前遗传筛查（PGS）快速变化的性质，特别是与其运用相关的技术和接触患者的增加，需要回顾和修改ESHREPGD协会指南。结果，ESHREPGD协会准备了四套指南：一套关于PGD中心的组织，三套是关于使用方法：基于扩增的PGD,基于荧光原位杂交（FISH）的PGD和PGS，胚胎学，包括胚胎活检。方法指南需要和这个指南一起阅读。在这个指南中，执行诊断的实验室被称为PGD/PGS中心，而执行IVF（体外受精一胚胎移植技术）的中心被称为IVF中心。本准则涵盖的主题包括人员，纳入/排除 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 ，遗传咨询和知情同意，设立IVF或PGD中心，运输PGD,质量保证/质量控制（QA/QC）和认证（由Harper等人，2010a在文中进一步讨论）。PGS在原始指南中被称为“低风险PGD”,针对进行体外受精的不育症患者，目的是增加体外受精妊娠和分娩率。PGS的引用适应症包括高龄产妇（AMA），重复植入失败（RIF）,严重男性不育症和伴有复发性流产（RM）的正常核型的夫妇。迄今为止，已经进行了11项RCTs观察PGS的各种适应症，未能在预后不良和良好预后的患者中显示出分娩率的改善。这些发表的文章引起了关于PGS和它在IVF中的作用的公开讨论。一般的共识是，由于在10个卵裂期活检/PGS的RCTs试验中没有显示益处（可能由于卵裂期的高度嵌合和非放射性原位杂交技术FISH的局限），因此进一步的PGS的RCTs试验应该集中在极体或滋养外胚层活检和全染色体分析。一个ESHRE的PGS任务组正在支持双中心试点RCT，以确定极体PGS是否可以通过使用阵列比较基因组杂交来改善AMA患者的IVF结果。通过进行多中心随机试验来表明其适用性。虽然PGD协会呼吁，这只能在正确构建的试验而不是观察性研究的范围内进行PGS，但是仍然有一些IVF和PGD中心进行实践。协会认为，必须就PGS实验室和PGD实验室应遵循的最佳做法提出自己的意见。与其他形式的诊断测试相比，PGD/PGS仍然相对不受管制，缺乏标准化；然而，更多的联邦，州和地方政府开始对PGD感兴趣，有些已经开始认可提供PGD的实验室。将单细胞作为PGD/PGS的一部分与常规的基因检测比较，比较难的是获得其在最高水平上的准确性和可靠性的。在主流诊断社区中存在许多法规，法律和志愿网络，以保持诊断测试的最高质量。例如，欧洲质量分子网络试图改进和标准化欧洲的分子诊断测试。为PGD/PGS提供更高质量的整体和标准化的一个步骤是就PGD/PGS社区中的最佳实践建立共识；是该协会使命的组成部分。协会认识到由于地方和国家规定以及特殊实验室实践的多样性,PGD和PGS的实施将保持不同（来自初次转诊的通过IVF治疗，单细胞分析应用到到妊娠，出生和儿童）。但是，这并不排除最佳做法是基于经验和现有证据的一系列共识。事实上，美国生殖医学学会（ASRM）早在2008年就发表了关于PGD的实践委员会报告从根本上回顾了美国在PGD上的实践。同时PGD国际协会（PGDIS）制定了指南并持续更新，它比ASRM报告介绍更深，简明扼要，并在最新的修订本中仍然如此。我们在文件和随附指南中提供的共识意见不仅反映了PGD的当前使用，而且还提供了如何基于临床经验以及已发表和未发表数据实现最佳实践临床PGD的基于共识的具体指导。协会希望为临床上提供PGD的所有中心都能达到的最低标准。即实现这一目标最终应确保所有患者都得到最佳护理，而不受治疗中心的影响。不是偏向最低的共同点，而是希望已建立起来的和新兴的中心都可以从全球经验中学习，并以共识为指导。这些意见不是作为必须遵守的规则或固定协议，也没有法律约束力。个别患者的独特需求可能有理由偏离这些意见，并且必须根据个人患者的需要使用专业判断来应用。然而，可以使用指导方针和意见来制定法律和法规，从业人员应确保他们遵守本国的法定要求或临床实践指南。1.人员人员配备1・1为了确保PGD的胚胎活检和诊断由合格的工作人员执行，提出以下建议：1.1.1活检应由临床胚胎学家进行，他们需要每天进行胚胎学操作并在持有任何一个有或没有使用临床胚胎学家的ESHRE认证的国家的相关认证。1.1.2荧光原位杂交技术FISH应由具有细胞遗传学知识的合格人员进行，或在有能力的细胞遗传学家的监督下进行，或者经过认证进行临床诊断；最重要的是，执行诊断测试的人员应该在单细胞诊断中进行适当的记录培训。FISH的扩散或细胞修复可以由胚胎学家或FISH人员进行，只有他们进行了具体的培训和评估才能做到这一点。1.1.3DNA扩增程序应由具有分子生物学知识的合格人员进行，或由有能力或经认证的分子生物学家监督进行临床诊断；最重要的是，执行诊断测试的人员应该在单细胞诊断中进行适当的记录培训。将细胞放入PCR管进行扩增可以由胚胎学家或分子生物学PGD人员进行，只要他们进行了具体的培训和评估即可。1.1.4建议PGD实验室应由具有执行责任人员和对所提供服务承担责任的人员执行。经常是国家专业团体。员工培训和能力1.1.5执行临床工作的实验室工作人员应该有认可的培训和评估计划。建立胚胎学培训计划，但目前还没有针对单细胞诊断的官方培训计划。需要由PGD中心制定培训和质量保证计划，以涵盖所有工作领域，例如使用所有设备，所有相关的标准操作程序，数据保护和IVF中心的培训。1.1.6培训应由适当的人员进行监督和记录在工作人员自己的日志中。所有工作人员应记录他们持续专业发展的日志，以确保持续记录和更新其能力1.1.7只要每个学科都有训练计划和评估计划，培训两门学科（基于FISH和扩增的PGD/PGS）是可以接受的，以表现出熟练掌握所有必要的技能和技术以及能独立完成一个或两个部分的能力。1.1.8所有人员在被允许处理临床标本前应表现出相应的能力。经过培训后，员工每年至少进行一次关于接受的临床程序各个方面训练的能力评估。并建议建立内部持续的培训计划和工作人员的能力评估。患者转诊的纳入/排除标准：一般纳入或排除转交的决定应由一批专门的科学家和临床医生进行，包括临床遗传学家或遗传学顾问，分子生物学家/细胞遗传学家，临床IVF专家和胚胎学家。当地道德委员会，国家立法或地方/国家管理机构也可以考虑推荐。纳入协会了解到，当地法规从中心到中心将不同，例如纳入和排除患者的标准。这些是作为讨论的总体起点。2.2为了纳入PGD,建议在原则上诊断技术精确性和诊断可靠性很高（每个诊所应了解其错误率并与患者进行沟通）的情况下同意进行进入周期。大多数PGD中心的当前技术允许错误率低至1-2％。此外，建议不孕不育患者仅在IVF/ICSI克服生育问题的可能性不大时才进行PGD。2.3如果当前疾病状态的技术诊断在技术上不可行，或者PGD中心不提供可以准确诊断患者胚胎疾病状态的测试，则患者应被排除在PGD计划之外此外，每个IVF中心都应该根据成功或安全的可能性考虑PGD患者的排除标准，排除标准还应该包括他们的年龄，减少的卵巢储备，IVF/ICSI的禁忌症和不健康的BMI患者。2.4如果女性患有常染色体显性遗传或X联合障碍（需要PGD）的严重体征和症状，可能会在卵巢刺激，卵母细胞检索（OR）或怀孕期间引入并发症,而使出生的孩子带有患病的风险时应从PGD计划中排除。每个具体实例都需要由IVF和PGD中心进行评估，并可能受到当地，州或联邦法律的约束。如果受影响的配偶有与遗传疾病有关的严重身心/精神/心理问题，PGD可能不适当。基于扩增的PGD特异性的包含/排除标准纳入可以对确定的致病性种系突变进行检测，这些突变在一个亲本被认定为主要遗传性疾病或每个父母中分别为隐性遗传性疾病，疾病复发风险分别为50％或25％。已知种系突变可在出生时，儿童期或成年时可能出现的严重健康问题。2.8对于隐性和一些X连锁（例如杜氏肌营养不良）诊断，其中在先证者中诊断出单个种系突变并且只存在父母中的一方。如果致病基因型可归因于单个基因，并且存在足够的家族史来与种系突变相关的单倍型，那么可接受诊断。2.9排除测试可以对迟发性疾病（例如亨廷顿病）进行检测，以避免患有家族病史的伴侣的症状发生。2.10有部分是遗传诊断不能确定的，例如由于遗传/分子异质性或不确定遗传模式和复发风险低（＜10%）。PGD用于染色体疾病线粒体疾病的PGD检测可能很困难，因为遗传诊断可能不确定。纳入2.11当线粒体疾病的致病突变由核DNA编码的情况时，检测与其他单一疾病相同2.12在显示同质性的突变的情况下，采用性别来降低疾病的临床风险是可以接受的，但突变的外显率是性别依赖性的则不行。应该指出的是，这种使用测试只会降低后代的风险，但并不能消除这种风险。2.13PGD也可以在罕见的情况下应用，例如在严重影响了特定突变的减数分裂分离与突变负荷和疾病严重性指尖的相关性的情况。组织相容抗原分型纳入2.14当所有其他临床选择已经用尽时，PGD也适用于已经有一个有恶性疾病或遗传病的孩子而患病的儿童很可能被治愈或者通过来自HLA匹配的同胞的脐带血干细胞移植大大延长生命的父母。2.15当疾病的复发风险低可以单独进行HLA分型检测，或与常染色体隐性遗传性或X连锁隐性疾病的突变检测结合使用。排除2.16应该考虑到PGD检测的开发和应用和为已出生的兄弟姐妹的HLA匹配所需要的时间。因此，应排除存在急性医疗状况而禁止安全干细胞移植或预期寿命极低得患病儿童的病例。应排除在没有特定遗传疾病的情况下，为同胞创造未来供体的HLA分型的请求。PGS特有的纳入标准虽然PGS在临床实践中仍然存在争议（参见摘要和介绍），但已经报道了以下适应症：2.17AMA（＞36岁——确切的年龄有每个中心自己确定）2.18RIF（例如，＞3个具有咼质量胚胎的胚胎移植或以每个中心确定的多次转移精确数量的＞10个胚胎的转移）。植入失败定义为在胚胎移植后5周或以上在超声下不存在妊娠囊。2.19RM（＞3每个中心要确定流产精确数）。应该注意的是，具有RM历史的患者自然受孕的机会很大。PGS患者的特殊考虑提出以下建议：在与患者协商后，妇科医生与胚胎学家和遗传学家合作，进行了三步的决策过程：2.20在控制卵巢刺激开始之前，应该讨论PGS是否适合这对夫妇。2.21在OR之后，应该讨论是否应该执行卵母细胞或胚胎的PGS和/或复查受精和胚胎发育进展后是否应该进行胚胎的PGS。2.22遗传结果的回顾之后应该讨论哪种卵母细胞或胚胎可以被选择用于培养和转移。遗传咨询和知情选择推荐使用PGD测试开始PGD测试的相关文件包括：遗传咨询报告。3.1.2DNA测试或指数患者，配偶或伴侣，儿童或其他家庭成员（如适用）的其他特定测试的原始结果。3.1.3完整谱系和家族资料。3.1.4关于女性和男性伴侣健康问题的数据，以及可能影响遗传诊断或IVF成功和怀孕（适当时）的专家咨询。3.1.5女性生殖史，妇科和生育状况。3.1.6男性生殖史，生殖状况，精子分析结果（特别是在需要PGD的遗传疾病对精子参数有影响的情况下，如单因素疾病，如肌强直性营养不良和囊性纤维化/先天性双侧不存在输精管和一些罗伯逊易位）。3.1.7对于HLA测试，受影响儿童的医疗报告，现状，预后，PGD以外的治疗选择，干细胞移植适用性，受影响的儿童，父母和兄弟姐妹以前的HLA分型结果（血清学和/或DNA标记）。3.1.8PGD规则在国际上不同。应当验证在特定国家进行PGD的合法性，如果需要，在IVF刺激开始之前应获得执行特异性障碍或HLA分型的PGD的许可或批准。有关咨询的一般问题：3.2.1由于PGD治疗涉及夫妇的双方，双方应在可能的情况下参加磋商。3.2.2遗传咨询应由合格的临床遗传学家或遗传咨询人员提供。生殖医学专家应提供关于IVF周期的信息，以确保患者在开始治疗前完全了解PGD的各个方面。3.2.3应规定确保患者在可能的情况下可以使用独立的口译员，但家庭成员在没有替代 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 的情况下可以担任翻译。3.2.4应提供有关治疗的书面信息在咨询和个性化咨询信之前，应包含会议期间口头提供的信息。3.2.5书面信息必须是由外行人员理解的语言，因为技术术语可能导致患者误解。3.2.6提供的辅导应该是非指导性的，使患者能够自己得出关于治疗适宜性的结论。3.2.7应在IVF/PGD周期之前和之后提供咨询，而在完成预检实验室的后续工作后可能需要额外的咨询，以讨论测试设计的预期效率限制，产前或产后跟进。心理估测需要给这些父母进行心理估测3.3.1具有生殖障碍史的患者。3.3.2具有创伤经历史的患者。3.3.3遗传学家，妇科医生或IVF/PGD小组其他成员对现有或未来儿童的福利/未来父母心理健康/心理能力疑虑的夫妇。3.3.4情侣积极要求心理干预。3.3.5未来父母之一的夫妇是常染色体显性障碍的携带者，并且可能具有由适当的专科医师确定的例如神经退行性/精神疾病这种障碍的体征或症状3.3.6正在接受HLA匹配PGD的夫妇，以评估他们的“孩子愿望”。3.3.7应在IVF/PGD周期之前和之后提供辅导。遗传风险评估患者讨论应该包括：3.4.1同时对遗传风险和分子或细胞遗传学确认诊断进行适当的评估。这应由合格的临床遗传学家或遗传咨询师进行。3.4.2复发的风险，也应该记录在案。3.4.3条件的严重程度和变异性以及基因型/表型相关性的限制。生殖选择3.5应讨论PGD的替代方案，包括产前诊断，配子捐赠，收养，接受风险和没有（额外的）儿童。应在PGD的成功和局限性的背景下讨论这些。3.6应该询问这对夫妇是否考虑PGD的原因，以确保他们对可以提供的内容有切合实际的期望。如果在治疗前和治疗期间不使用避孕 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 ，则应讨论自发怀孕的风险以及随后遗传风险的后代。IVF相关的咨询生殖医学专家应考虑以下项目的讨论：3.8.1IVF/ICSI程序的描述和细节。3.8.2卵巢刺激或OR下妇女出现并发症的风险3.8.3使用新鲜或低温保存的精子或精子通过经皮精子抽吸或睾丸精子提取技术检索。3.8.4受常染色体显性遗传或X连锁遗传疾病影响的妇女的手术和怀孕的额外的短期或长期医疗风险（例如血友病携带者的分娩期间出血的风险；凝血障碍妇女的血栓形成，例如因素VLeiden突变）。3.8.5PGD治疗后妇女未来生育能力和健康状况的不确定性。3.8.6在等待时间或IVF治疗期间自发怀孕的机会，需要避孕。PGD咨询合格的临床遗传学家或遗传咨询师应考虑以下项目的讨论：3.9.1要检索的卵母细胞数量以及需要在医疗实践的安全限度内达到最大化。3.9.2要活检的胚胎数量和错误率，待活检的细胞数量以及预计活检的胚胎的百分比。3.9.3一些胚胎可能不适合活检，一些胚胎可能无法在活检中存活。3.9.4对于所有活检的胚胎，诊断可能是不可能的，并且有一些胚胎未被诊断或产生不清楚的可能性。3.9.5转移未受影响的胚胎的可能性以及所有胚胎可能受到影响的可能性。3.9.6如果所有的胚胎在遗传和/或胚胎学上都不合适，则不具有转移胚胎的可能性。3.9.7正在测试哪种情况以及测试中无法检测到哪些情况。3.9.8PGD诊断的可靠性，误诊或不良结局的风险。错误率表示为假阴性或假阳性结果应基于特定诊断测试或策略“内部”检查和后续分析。3.9.9应明确说明测试方法和样品需求来发展检查。3.9.10对于结构染色体重排，应使用足够的FISH探针组合并验证其能够检测不平衡重排（有关更多信息，请参考基于FISH的PGD指南）。3.9.11对于特异性单基因或线粒体突变，确认家族中的突变以及连锁标记的信息性（参见基于扩增的PGD指南）。3.9.12对于突变具有可变重复大小的条件，例如亨廷顿氏病，脆性X,检测正常等位基因的信息。测试结果的可靠性应设计为实现最高可能的准确度。目前的技术允许测试性能在98-99％的精度范围内。测试的任何限制应该清楚地解释给这对夫妇。患者应该明白误诊是可能的，并且怀孕后可供他们选择的选项应该包括产前检查和遗传咨询。每个PGD中心必须报告预期和观察到的误诊率（有关更多细节，请参阅基于扩增的PGD指南和基于FISH的PGD指南）。测试和开始治疗的预期时间段应该适合这对夫妇。如果测试开发的时间框架对治疗成功有影响，那么应该考虑诸如女性年龄等限制因素。如果特定的单细胞分析在内部不可用，并且设置时间是重要的，则应该讨论将这对夫妇推荐到另一个中心。如果所要求的遗传分析不是在内部进行的，那么可能会选择转移到另一个可以进行测试的中心或“运输PGD”。如果在PGD之前没有使用避孕方法，则自然受孕受遗传疾病的风险。3.9.17成本。3.9.18如果预先存在的生育问题或IVF的要求而不考虑PGD的需要，则取消政策。3.9.19对于X连锁疾病，性别的优缺点（随后的女性转移假定不受影响），与允许转换未受影响的男性和女性的特异性突变检测不同。胚胎选择3.10在治疗周期开始之前，应与患者讨论哪些胚胎可接受移植的决策，并可能需要在该周期期间重新审视。3.11应当就转移的胚胎数量和中心选择性单胚移植政策进行讨论。3.12对于常染色体隐性和X相关隐性疾病，应讨论带菌胚胎的移植。选择不替代带菌胚胎的夫妇在理论上具有较少的可用于移植的胚胎，这可能降低其在任何给定周期中成功的机会。3.13在X联系的隐性疾病中，只有性别选择才能获得，夫妻需要被告知，受影响或不受影响的所有男性胚胎将被丢弃，并且运输女性不能与未受影响的雌性胚胎区分开。在下决定治疗之前，应始终与患者讨论替代性直接突变测试（可能在另一个中心）的可用性。3.14对于已知所有胚胎的表型的X连锁隐性疾病，除了表型外，选择胚胎性别的问题应在相关管辖范围的法律限制内讨论。病人应该清楚可以获得什么结果，并根据他们希望知道的信息给出选择。选择应该在不了解胚胎性别的情况下讨论。3.15对于可能已经测量突变大小并且可能具有表型/基因型相关性的动态突变，在治疗开始之前应该与患者讨论这个问题，以便在作出替代胚胎的决定之前完全知情。PGD随访在进行PGD周期之前，应与患者讨论以下问题：3.16每周期的开始和每次转移中怀孕/活产的几率，以及流产的风险，与母亲年龄和特定疾病有关。3.17PGD后的保留作用以及从低温保存和活组织切片胚胎预测的妊娠成功率。3.18未受影响的和/或非HLA匹配的胚胎的命运。3.19未诊断或不可转移的胚胎的命运。3.20确认未转移，非冷冻保存的胚胎的PGD诊断和这些结果的可用性。3.21不转移或冻结胚胎的选择以供将来使用，包括捐赠研究。3.22关于产前诊断和从PGD出生的妊娠和儿童随访的决策。PGD影响多胎妊娠3.23在治疗周期开始之前，应与夫妇讨论怀多胎的风险。应该了解母体和胎儿的风险。与夫妻有关的因素也应该被提出：如家庭动态，家庭单位中患病儿童的存在，父母的健康状况（主导性疾病）以及管理多胎妊娠相关的经济和心理社会问题。3.24应考虑到成功怀孕的机会与一次或多次胚胎移植后多胎妊娠的风险，同时考虑到相关因素，包括患者年龄，生殖史和影响植入的其他因素。患儿3.25请求PGD的夫妇通常需要对可能需要护理的患儿负责。在治疗前应先讨论PGD治疗周期的影响，旅行时间，家庭时间，母亲的OHSS潜在后遗症和兄弟姐妹在特殊护理中的影响。应鼓励夫妻在进行治疗周期之前确保他们对现有孩子的支持。PGD婴儿的小儿随访3.26与PGD相关的儿科风险，包括出生体重偏低，围产期死亡率和先天性异常，应与被告知这些风险因素与IVF/ICSI后出生的儿童相似的患者进行讨论。此外，尽管现在有在PGD儿童长期健康，正常生长发育参数的证据，但是应提出PGD长期影响的不确定性，鼓励提供PGD的中心获取治疗后出生婴儿的后续数据。建议的最小数据集应包括：出生时间、出生体重、妊娠、新生儿问题、先天异常。3.27长期随访应由提供治疗和参与的中心考虑，协同前瞻性和回顾性研究得到鼓励。产前诊断3.28产前诊断应该提供给所有在PGD后成功受孕的妇女。有关可用的测试讨论应由合格的专业人员进行，以确保提供所有可用的选项，包括侵入性测试，如绒毛取样和羊膜穿刺术，超声扫描或非侵入性产前检测，如无细胞胎儿DNA测试。3.29如果拒绝产前诊断，则可以选择（或鼓励思考）脐带血采样，以确定核型或基因型。应与患者明确安排分享结果，因为不利结果的影响可能对父母和孩子产生重大影响。3.30对迟发性疾病进行产前检测或脐带血采样，增加与当地法规差异较大的道德问题。不建议对没有临床益处的迟发性疾病的未成年人进行检测。咨询单基因疾病特异性问题3.31应该使用特定遗传分析来解释诊断测试的原理，以靶向突变和/或紧密连锁的标记。3.32需要讨论是否需要研究家族成员，以确定男性与新生突变相关的标记物或精子中的等位基因。3.33做出处理带菌胚胎和受影响胚胎或未诊断胚胎的命运的决定时，考虑地方和国家的规定。针对HLA的问题咨询3.34对于单独的HLA分型，平均25%的胚胎将适合转移。3.35如果HLA分型和针对隐性遗传病的PGD诊断相结合，那么平均16个中只有3个（18.8%）的胚胎适合移植。3.36如何HLA分型和X染色体相关遗传病相结合，平均只有八分之一（12.5%）的胚胎适合移植。夫妻应被推荐到干细胞移植中心，以获得有关脐带血干细胞成功移植机会，可用的替代治疗方法以及干细胞/骨髓移植可能的并发症以及干细胞移植的最佳时机的全部信息。对IVF和PGD中心的基本要求胚胎的取卵，受精和培养应在符合欧盟组织和细胞指令或其他当地法律的具有合适的实验室场所，设备和经过培训的工作人员的机构进行。由于极体，卵裂期或囊胚活检需要进行基因检测，这些技术在标准IVF单位可能不一定可用，应由经过适当培训的个人进行，其能力定期评估为所需检查过程的一部分。应该训练不止一个人，以避免缺席或假期的困难。必要时应当获得当地批准胚胎活检。4.3应采取适当的预防措施，以防止外来细胞或DNA污染样品，通过物理隔离（在清洁通风罩或隔离器中工作），并检测任何此类污染物，例如父母和母亲的DNA标记。应建立质量管理体系，确保将结果适当地分配给采集诊断样本的胚胎（卵）。一旦进行了活组织检查，可以在与IVF/PGD单位密切关联或地理附近的单位中进行分析，但也可以将其发送到远距离或其他国家的遗传检测单位。应建立和记录特定胚胎样品准确分配系统，并建立测试发送样品，收货确认和转移结果的标准操作规程。应与进行适当遗传咨询的遗传学部门建立密切的工作关系（区别于不孕不育咨询），同时工作人员应该熟悉植入前测试的技术，潜力和局限性。必须使用适当的标记系统将细胞诊断结果与该细胞活检的胚胎相匹配。标签和样品标识应该在关键的和高风险的步骤进行确认。建议特殊的患者识别码和胚胎/细胞数量在下面的时期应该进行双人符合和标记：4.8.1活检后立即确认胚胎和细胞数量的匹配。4.8.2在固定/铺展或将细胞放入管中以确认细胞与相关载玻片或管上的标记相符。4.8.3诊断结果需要进行记录以确保与正确的细胞和/或胚胎鉴定的准确性和相关性。IVF中心PGD怀孕率基线4.9应该认识到，PGD计划的结果取决于相关IVF中心的成功率。最低可接受的怀孕率应由每个中心决定。4.10对胚胎进行基因检测的实验室应按照遗传疾病类型（如染色体重排，常染色体显性遗传，常染色体隐性，X连锁）与公布的数据（ESHREPGD联盟数据）及其自己未活检的IVF/ICSI数据进行比较。4.11执行PGS的中心应将怀孕率与正在接受IVF/ICSI的等效组比较。PGD中心特殊说明4.12如有可能，由当地或国家机构认可。4.13遗传胚胎分析需获得地方或国家批准（如适用）。4.14遵守公布的PGD/PGS指南。4.15不断意识到可能的误诊原因，并采取预防措施保护他们。5.PGD运输5.1建议IVF和PGD中心就处理法律，保险和问责问题的官方协议达成一致。IVF和PGD中心应在任何临床样品出货之前就一套临床/实验室协议达成一致。建议（在可行的情况下）所有参考IVF中心使用相同的协议。在进行PGD治疗的各个阶段，应特别注意谁负责。建议IVF和PGD中心使用知情同意书。5.3建议IVF和PGD中心在任何临床样品出货之前来回预约现场访问。对于每个参考IVF中心，PGD中心应验证用于评估近似运输时间的运输协议，并确保样品的运输不会影响细胞形态,FISH杂交或DNA完整性。5.5发送固定在显微镜载玻片上的细胞的IVF中心应根据PGD中心规定的程序进行活检和固定程序的训练。如果条件不允许，该IVF中心应安排一个有适当资格和训练有素的胚胎学家进行活检和卵裂球准备。5.6在PCR管中发送细胞的IVF中心应根据PGD中心规定的程序进行胚胎活组织检查和细胞置入管中的培训。如果没有条件，则该IVF中心应安排一个有适当资格和训练有素的胚胎学家进行活检和卵裂球准备。5.7在实施临床标本发送/接收之前，应安排IVF中心参与至少一个，最好是多个“运行练习”来评估PGD程序的实际运行。这次练习应该评估胚胎质量和卵裂球/细胞核的处理，适当（唯一的）标本标签和样品的运输（包括运送样品的数量），并证明测试中心能够从活检和产生PGD结果并随后运输核的能力。此外，试运行将通过阴性对照标本评估IVF中心的可能污染和DNA清洁度。5.8建议PGD中心掌控PGD运行周期的时间（包括初始启动和实际细胞运输）。相关IVF中心应遵守PGD中心在给定日期或给定时间内可以运行的最大运输周期数的规则。5.9建议IVF和PGD中心在运输PGD治疗的所有阶段中绘制清晰和足够的沟通线（如书面程序所述）。IVF和PGD中心都必须确保患者进行足够的PGD咨询（见其他地方）和检测后预回收（见其他地方）。建议所有诊断结果和报告以书面形式（传真或电子邮件/安全线）发送，并且不会通过电话传达详细的结果。报告应该有一个固定的格式，并且内容清楚和用词友好。在与患者讨论结果之前，建议IVF中心的合格专业人员对结果进行审查。5.12建议IVF和PGD中心同意负责PGD数据的收集（ESHREPGD联盟）和PGD儿童的后续行动。6.QC，QA和鉴定QC和QA是PGD服务的一个重要方面。认证认证，以及通过外部质量评估（EQA）的能力测试，提供了实现和维持最高实验室标准的手段。认证是正式认可，当实验室/部门/中心表现出执行明确任务的能力并涉及管理的所有方面以及技术要求时，权威授权机构向实验室/部门/中心提供认证。ESHREPGD联盟建议，如果可能，PGD实验室应在规定的时间内被认证或努力认证。PGD实验室应符合ISO15189或等效的当地标准，并与国家诊断实验室认可计划（如果有的话）一起工作。6.3为此，联盟为PGD实验室认证准备了“初学者指南”。6.4根据实验室认证，PGD实验室必须与其他主流诊断实验室一样达到最高标准，并具有标准操作程序和经过适当培训的人员。质量管理通过结果的质量确保患者的安全，应该是所有医学实验室的目的。这只能通过在实验室设置中建立质量管理来实现。质量管理包括维护和提高质量所需的所有系统和程序。QC，QA和质量改进构成了全面质量管理的一部分，建议将这套系统集成到PGD中心，［欧洲议会2004/23/EC指令（关于设定人体组织和细胞的捐赠，采购，检测，加工，保存，储存和分配的质量和安全标准）］。质量管理方面包括文件管理，质量 手册 华为质量管理手册 下载焊接手册下载团建手册下载团建手册下载ld手册下载 ，质量方针，投诉解决，持续改进，审计和管理审查。技术要求包括人员，实验室条件和环境，实验室设备，检测程序的各个阶段，结果报告和质量保证。内部QC和QA内部QC/QA应该是一个持续的过程。还应保持内部质量保证/质量管理，文件和审核工作应包括误诊诊断和评估的确认。草案6.8.1临床检测方案应包括明确说明，包括来自化验开发验证步骤，评分标准，报告程序以及为诊断结果咨询患者的框架的结果摘要。6.8.2应对所有协议文件进行控制，以确保使用最新版本。6.8.3相关工作人员应该能轻松理解所有协议。6.8.4应记录与协议的偏差。6.8.5如果发生频繁的偏差，应该有一个机制来相应地改变程序。6.8.6所有协议应至少每年审查和更新，通知所有有关工作人员任何协议。外部质量评估EQA(externalqualityassessment)形成质量监控中的重要部分，也是认证计划中所必需的。6.9协会建议每个中心都成为EQA计划的一部分。ESHREPGD协会已经设立了PCR的EQAs(与英国国家EQA计划和与FISH进行细胞遗传学欧洲质量评估合作)。6.10建议每年至少一次自愿参加EQA。