HPLC-MS-MS法测定人血浆中尼可地尔浓度 &nbsh1; HPLC-MS/MS法测定人血浆中尼可地尔浓度 [摘要]目的 建立高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中尼可地尔药物浓度。方法 色谱柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm, 5 µm），流动相为乙腈：0.1%甲酸=50：50，流速为0.3 mL·min-1，用正离子扫描多反应监测方式检测(MRM)，测定血浆样品中尼可地尔药...
[摘要]目的 建立高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中尼可地尔药物浓度。方法 色谱柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm, 5 µm），流动相为乙腈：0.1%甲酸=50：50，流速为0.3 mL·min-1，用正离子扫描多反应监测方式 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 (MRM)，测定血浆样品中尼可地尔药物浓度。结果 尼可地尔 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线线性范围为0.5～520 ng·mL-1（r=0.9985），低、中、高浓度样品日内和日间精密度均小于10.00%，且各种条件下尼可地尔血浆样品稳定性良好。结论 本法适用于尼可地尔血药浓度测定。
关键词：尼可地尔；血药浓度；HPLC-MS/MS
1 仪器与试剂
1.2试剂 尼可地尔原料药对照品（纯度＞99%，批号：070602A），内标物：丁洛地尔对照品（纯度99.5%，批号：20170628）；色谱纯乙腈、甲醇、甲酸、甲基叔丁基醚(MTBE)等试剂均购自广州迪马公司。
2方法和结果
2.1测定条件 色谱条件：色谱柱为Thermo Hypurity C18柱（2.1´150 mm, 5 µm）；流动相为乙腈：0.1%甲酸＝50：50；流速为0.3 mL·min-1; 柱温为40℃，自动进样瓶温15℃。质谱条件：离子检测方式为多反应离子检测(MRM)；离子极性为正离子(positive)；离子化方式为气动辅助电喷雾离子化(ESI)；毛细管电压3.0 kV；锥孔电压 15.00 V；源温度100 ℃；去溶剂温度350 ℃；锥孔气 50 L/Hr；去溶剂气 450 L/Hr；；碰撞气压 4.0×10-3 mbar。
表1 尼可地尔HPLC-MS/MS检测质谱条件
药物 |
监控离子(0.3 amu) |
采集时间(ms) |
碰撞能量(-eV) |
保留时间(±0.3 min) |
尼可地尔 |
212→79，136 |
300 |
20，10 |
1.49 |
丁洛地尔 |
308→140，237 |
300 |
15，18 |
1.11 |
2.3 样品处理 精密移取血浆500 mL，加入内标丁洛地尔 15 ng·mL-1 100 μL，混匀后加5 mL 甲基叔丁基醚（MTBE），震荡2 min后3000 r·min-1离心10 min, 转移上清液3 mL至另一干净EP管中，水浴氮气挥干后，200 μL流动相复溶解，取10 μL进样分析。
2.4 方法专属性分别取6个不同来源空白血浆500 mL，除不加内标溶液外，按“2.3样品处理”项下操作，进行LC/MS/MS分析，其中一份空白血浆进样分析结果见色谱图2-A；配制尼可地尔终浓度为0.5 ng·mL-1的血浆标样，按“2.3样品处理”项下操作，获得相应色谱图2-B1；配制尼可地尔终浓度为16 ng·mL-1的血浆标样，按“2.3样品处理”项下操作，获得相应色谱图2-B2。尼可地尔和内标保留时间约为1.49 min、1.14 min。结果表明，空白血浆中的内源性物质不干扰尼可地尔及内标的测定。
浙公网安备 33021202002483