007HIV和其他传染病原体的筛选血站培训

nullHIV和其他传染病原体的筛选HIV和其他传染病原体的筛选陈 曦 湖南省疾病预防控制中心 第二章 传染与传染病原体第二章 传染与传染病原体传染病基本知识（1）传染病基本知识（1） 传染病(Communicable diseases)：由病原微生物和寄生虫感染人体后产生的有传染性的疾病。 传染病的特征：  有病原体  有传染性  有流行病学特征  有感染后免疫 传染病的基本知识（2）传染病的基本知识（2） 传染病的发生四个条件  病原体的数量  病原体的毒力与变异性  入侵门户  机体的免疫状况 感染过程的临床表现  病原体被清除  隐性感染  显性感染  病原携带  潜伏性感染传染病的基本知识（3）传染病的基本知识（3）传染病流行的三个基本条件  传染源 传播途径  易感人群 传染病病程发展阶段 潜伏期 前驱期 症状明显期 恢复期 复发和再燃 后遗症与传染病相关的病原微生物与传染病相关的病原微生物 病原微生物：  病毒  细菌  原生生物  真菌 可经血液传播的传染性病原体：  病毒  细菌  原生生物 病原微生物的特点（1） 病原微生物的特点（1） 病毒： 基本结构与功能： 外膜：识别宿主细胞 衣壳：刺激机体产生免疫应答 核酸（RNA或DNA）：繁殖 生物学特征： 结构简单 细胞内寄生 常见与血液传播的病毒性传染病：HIV，HAV，HBV，HCV，HTLV，CMV，TTV病原微生物的特点（2）病原微生物的特点（2） 细菌 基本结构与功能 细胞壁 细胞膜 细胞浆 细胞核 鞭毛 荚膜 菌毛 芽胞 常见的细菌性传染病：梅毒，霍乱，破伤风病原微生物的特点（3）病原微生物的特点（3） 原生生物  生物学特征 真核细胞 细胞核 细胞膜 常见的相关的传染病：疟疾、利什曼，锥虫等 病原微生物的特点（4）病原微生物的特点（4） 真菌 基本结构 菌丝 孢子 可引起的传染病：癣，组织细胞浆菌病，念珠菌病 传染病的基础免疫学（1）传染病的基础免疫学（1）免疫：就是机体所具有的对来自机体外的物质（如细菌，病毒等）识别、清除体外、维持机体平衡的能力的保护性免疫应答或促进病理生理过程及组织损伤的变态反应。 保护性免疫应答 非特异性 特异性 变态反应  特异性传染病的基础免疫学（2）传染病的基础免疫学（2）非特异性应答：不涉及抗原的识别和二次免疫应答增强 天然屏障 吞噬作用 体液因子 特异性应答：参与这一过程的细胞主要有T淋巴细胞，B淋巴细胞等。  T淋巴细胞来源与胸腺，参与细胞介导的细胞免疫  B淋巴细胞来源于骨髓，产生抗体，分布在血液和淋巴液中  抗体，即免疫球蛋白，按化学结构包括：IgM，IgG，IgA，IgE，IgD 免疫学关键词免疫学关键词抗原 抗体 细胞毒T细胞 T辅助细胞（CD4） T抑制细胞（CD8） 其他特异细胞：K细胞，NK细胞，巨噬细胞 杀伤因子：IL,TNF,干扰素等传染病原体经血传播的三要素传染病原体经血传播的三要素病原体必须存在血液中 献血员为隐性感染者 病原体可在血液细胞或血浆中自然存活一段时间血库传染病原体筛选血库传染病原体筛选 目的 在发血前对血液中可能存在的病原体进行相应 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 ，及时检出相关的病原体，保证所供应的血液不带有这些病原体。 内容 财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容 筛选传染病的标志物，一般为病原体或特异性抗体 null 病原体感染过程中免疫学标记物HIV 抗原人 IgG感染人IgM天 周 月 年减低经血液传播病原体的 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 减低经血液传播病原体的措施 可控制的条件 献血员的选择 血液中传染病原体相关指标的筛选 除去血液中被认为含有传染病原体的特殊成分 用物理方法灭活传染病原体 不可控制的条件 窗口期 未知病原体第三章 人类免疫缺陷病毒（HIV）第三章 人类免疫缺陷病毒（HIV）基本概念基本概念艾滋病:全称“获得性免疫缺陷综合” (Acquired Immuno-deficiency Syndrome, AIDS) HIV感染者 null至2007年底，估计存活的感染者和病人：3320万，其中： —成年人：3080万 —妇女： 1540万 —15岁以下儿童： 250万 2007年新感染人数： 250万，其中： —成年人：210万 —儿童：42万 2007年死亡人数： 210万 —成年人：170万 —儿童： 33万全球艾滋病流行情况null疫情报告 截至2008年底，累计报告艾滋病感染者/艾滋病病人276335例，其中艾滋病病人82322例，死亡 38150例 2008年报告HIV 45572例， AIDS 14509例（其中由HIV发展为AIDS 3844例），死亡9748例。 平均每月新报告HIV约3800例 全国艾滋病null *1985-2008年全国历年报告HIV/AIDS变化趋势null全国累计报告HIV/AIDS分布地图（截至2008年12月31日） null累计报告2008年新报告报告HIV/AIDS传播途径构成湖南省流行概况湖南省流行概况到2008年12月底,累计报告现住址在本省的HIV/AIDS病例6955例。其中, AIDS1906例,死亡1240例 感染途径仍以注射吸毒为主，占34%，其次为异性传播，占30.6% 近年，临床病人及外出返乡农民工报告比例逐渐增高 我省实际艾滋病病毒感染者可能有2-3万，感染者已逐步从嫖娼卖淫、吸毒、采供血等高危人群向一般人群扩散。 历年病例报告情况历年病例报告情况流行特点流行特点吸毒感染人数报告在2005年后开始有所下降； 性接触感染人数快速上升，比去年上升了61.5%，报告人数超过吸毒人数；MSM人群感染到到79例； 母婴途径上升，达到44例； 50岁以上组增加较快，达到三位数 年龄分布年龄分布性别分布性别分布面临高危险因素面临高危险因素吸毒人数较大，尤其是注射吸毒； 卖淫嫖娼现象普遍存在； 大量的流动人群； 男男性接触者与双性恋人群； 未发现的感染者； 某些医源性感染的潜在危险； 性病诊治的不规范等HIV/AIDS: 报告人数仅为冰山一角HIV/AIDS: 报告人数仅为冰山一角报告估计65万Icebergnull 人类免疫缺陷病毒 人类免疫缺陷病毒 人类免疫缺陷病毒逆转录RNA病毒 主要存在血液，精液，阴道分泌物和母乳 已发现HIV-1和HIV-2 HIV-1亚型：A~J（M），O和N HIV-2亚型：A~FHIV 的机体构造HIV 的机体构造Gp120 壳糖蛋白 Gp41 壳糖蛋白 P17 基质蛋白 P24 内膜蛋白 逆转录酶 蛋白酶 脂质膜层9 种蛋白质 HIV传播途径 HIV传播途径性接触 血液与血液制品 母婴 HIV感染引起的身体免疫系统的变化HIV感染引起的身体免疫系统的变化HIV进入人体后，主要侵入T4淋巴细胞。T4淋巴细胞在体内主要作用是介导细胞免疫的功能。这类细胞表面存在CD4抗原，可以被HIV识别. HIV通过识别与CD4位点结合，进入T4细胞内，通过逆转录酶，将病毒RNA转录为DNA，整和到细胞DNA上潜伏。 在感染的后期，病毒在T4细胞中增殖，最终杀死T4细胞。 随着T4细胞数量的减少，人体出现免疫功能降低，进而导致出现临床感染。 一般从HIV感染至出现临床体征大约需要5~10年。 null HIV 感染的免疫学标记物HIV 抗原人 IgG感染人IgM天 周 月 年HIV感染发展过程HIV感染发展过程急性感染：大多数HIV感染者在感染的开始，并不知道已经感染。从HIV感染到出现抗体大约需要6周~3个月。一部分人可能有全身不适、发热、出现皮疹和乏力等感觉，但这些感觉均为一过性的，很快就消失了。所以，很容易造成误诊和漏诊。 无症状感染：在成年感染者中，此时无任何临床表现，仅HIV抗体阳性。这种状态可持续许多年。但儿童病例则潜伏时间较短，母婴途径感染HIV的儿童，其预期寿命一般低于5岁。 艾滋病:机会性感染与肿瘤 艾滋病常见的临床表现艾滋病常见的临床表现呼吸系统:PCP,细菌性肺炎,结核; 消化系统与肝脏疾病:腹泻,肝炎,吞咽困难等 神经系统:脑膜炎,神经炎等 肿瘤:KS实验室检查实验室检查血清学试验:EIA,WB 病原学:病毒分离,P24抗原,核酸检测等 免疫功能测定:CD4/CD8 机会性感染病原检测 生化试验nullHIV抗体的检测方法快速血液检测法 快速唾液检测法 标准血液检测法nullnullHIV-1 蛋白印迹试验gp120/160gp41p24判断标准 阳性 :至少 2/3 之 p24, gp41, gp120/160 蛋白带 阴性 : 无病毒特异带 可疑 : 有病毒特异带，但不符合阳性的标准nullHIV血清学实验的临床意义HIV血清学实验的临床意义阳性反应：表明受检对象已感染了HIV。但对其目前疾病发展情况无法解释 阴性反应： 受检对象未被HIV感染过 受检对象已被感染，但此时处于“窗口期” 处理建议：通过询问流行病学史，排除献血者预防预防强化宣传教育和行为干预 预防经血传播 预防母婴传播 预防经性传播第八章 其他传染病原体的筛选第八章 其他传染病原体的筛选乙型肝炎病毒（HBV）乙型肝炎病毒（HBV）病毒特征： 颗粒直径42nm 包膜：HBsAg 核心：DNA，DNAP，HBcAg 抗原与抗体 HBsAg与抗-HBs HBcAg与抗-HBc HBeAg与抗-HBe HBV的传播途径HBV的传播途径血液 性接触 母婴丙型肝炎（HCV）与非甲非乙型肝炎丙型肝炎（HCV）与非甲非乙型肝炎E型 C型 其他散发梅毒梅毒病原体：苍白螺旋体 临床分期： 一期 二期 晚期 胎传 实验室检查 反应素试验 抗原试验 其他螺旋体感染与预防措施其他螺旋体感染与预防措施其他病原体：雅司，品他，地方性螺旋体感染 预防措施： 加强献血员的体检与实验室的筛选 在血前将血液保存在4℃24-28小时 疟疾疟疾病原体：疟原虫（间日，卵型，三日，恶性） 传播媒介：蚊子 生活周期： 人类宿主：孢子体，滋养体，裂殖体，雌雄配子 蚊子：雌雄配子，接合子，幼和子，卵母细胞，孢子 体 临床表现：发热和发冷，贫血 实验室筛选：涂片，标记抗体恰家斯病恰家斯病锥虫病 利什曼病艾滋病的 全球战略艾滋病的 全球战略HIV抗体检测方法的选择与应用HIV抗体检测方法的选择与应用 检测的目的 所用方法的敏感性与特异性 被检人群众的 流行情况检测目的检测目的献血安全 流行病学调查 临床诊断 科学研究敏感性与特异性敏感性与特异性敏感性 真阳性 敏感性= 真阳性 + 假阴性 特异性 真阴性 特异性= 真阴性+假阳性 世界卫生组织推荐的检测策略（1）世界卫生组织推荐的检测策略（1）Ⅰ 所有血清用ELISA或快速方法检测，阳性结果认为HIV感染，阴性结果认为阴性。 Ⅱ 所有血清先用一种ELISA或快速方法检测。第一次检测阳性血清用第二种ELISA或快速方法重复检测。但二次试剂制备原理和反应原理必须不同（如采用间接法与竞争法）。二次检测结果阳性认为阳性，第一次结果阴性认为阴性或二次结果前后不一致，但第二次检测为阴性仍认为阴性。 Ⅲ 在Ⅱ的二次检测基础上，增加第三次检测，第三次检测的试剂抗原制备方法和反应原理不同于前二次检测用的试剂。二次检测全部阳性，判断为阳性。前二次为阳性，判断为可疑。 注意：我国要求所有筛选阳性样本必须确认世界卫生组织推荐的检测策略（2）世界卫生组织推荐的检测策略（2）我国HIV抗体检测要求我国HIV抗体检测要求初筛阳性样本的 处理： 阳性样本由初筛实验室在6小时内送确认实验室确认 确认结果的处理： 确认实验室确认阳性的结果，及时反馈到送检初筛实验室，同时抄送当地疾病预防控制机构，当地疾病预防控制机构接到确认报告后，应在6小时内对感染者进行流行病学调查 不确定结果的处理： 因多种原因，也可能会出现确认结果不确定的情况，应要求检测对象在2周后重复检测；仍不确定，在3个月后，重复检测；带型仍无变化，判为阴性艾滋病EIA方法发展艾滋病EIA方法发展HIV “窗口期”HIV “窗口期”第一代 HIV Ab: 6 - 8 星期HIV “窗口期”HIV “窗口期”第一代 HIV Ab: 6 - 8 星期 第二代 HIV Ab: 4 - 5 星期HIV “窗口期”HIV “窗口期”第一代 HIV Ab: 6 - 8 星期 第二代 HIV Ab: 4 - 5 星期第三代 HIV Ab: ± 3 星期HIV “窗口期”第四代 HIV Ab/Ag: ± 2 星期HIV “窗口期”第一代 HIV Ab: 6 - 8 星期 第二代 HIV Ab: 4 - 5 星期第三代 HIV Ab: ± 3 星期每一代 HIV 试剂实验原理 每一代 HIV 试剂实验原理 固相载体血清样本YY第一代,第二代结合物微孔板HIV抗原抗-人 IgG酶抗体每一代 HIV 试剂实验原理 每一代 HIV 试剂实验原理 固相 载体血清 抗体YYY第一代,第二代第三代结合物微孔板HIV抗原抗-人IgG酶抗体每一代 HIV 试剂实验原理 每一代 HIV 试剂实验原理 固相 载体血清 抗体YYYYYY第一代第二代第三代第四代结合物微孔板HIV抗原抗-人IgG酶抗体抗-p24单抗null检测 BBI HIV-1 血清转换 panels Vironostika® HIV Uni-Form II Ag/Ab1534?115652.5感染传染性 血液RNA Ag, DNA3rd AbAg1st Ab2nd Ab4th gen Ag/AbRNA3rd Ab4th gen HIV Ag/Ab 与3rd gen HIV Ab比较: “窗口期”缩短4天Published in “Interface” by Dr Zaaijer检测 anti-HIV 抗体亚型样品 Vironostika® HIV Uni-Form II Ag/Ab检测 anti-HIV 抗体亚型样品 Vironostika® HIV Uni-Form II Ag/Ab HIV-1 subtype n positive in HIV UF-II Ag/Ab A (Group M) 8 8 B (Group M) 100 100 C (Group M) 29 29 D (Group M) 7 7 E (Group M) 10 10 F (Group M) 8 8 Group O 15 15 Total 177 177检测 HIV-1 抗原亚型样品 Vironostika® HIV Uni-Form II Ag/Ab检测 HIV-1 抗原亚型样品 Vironostika® HIV Uni-Form II Ag/Ab HIV-1 antigen result with subtype HIV UF-II Ag/Ab A (Group M) + B (Group M) + C (Group M) + D (Group M) + E (Group M) + F (Group M) + G (Group M) + H (Group M) + HIV 抗原敏感性 HIV 抗原敏感性 Assay pg HIV Ag/ml Vironostika HIV UF-II Ag/Ab 150Data by Dr Courouce in “La Gazette de la Transfusion” (1999)