【doc】 精子形态、顶体反应与卵子受精率的相关性研究

【doc】 精子形态、顶体反应与卵子受精率的相关性研究 精子形态、顶体反应与卵子受精率的相关性 研究 第26卷第5期 2005年1O月 同济大学(医学版) JOURNALOFTONO]IUNIVERSITY(MEDICALSCIENCE) V01.26No.5 Oct,2005 文章编号:1008—0392(2005)05—0010—03 精子形态,顶体反应与卵子受精率的相关性研究 钱宪明,匡延平2,吴乾渝,刘岚 (1.同济大学附属东方医院生殖医学中心,上海200120;2.上海市交通大学医学院第九人民医院生殖中心,上海200011) 摘要:目的研究体外受精(invitrofertilization,IvF)中精子形态,顶体反应与卵子受精率之间的关系,分析精子 各参数在IvF受精率方面的参考意义.方法分析男方精液标本125份,进行常规精液分析,精子形态及精子顶 体反应分析.观察受精卵1475个,记录受精和未受精卵的数目,并分析精子各参数与卵子受精率之间的相关性. 结果根据精子形态分析将精子正常形态分为4 组,<14%,14%--24%,25%--34%和?35%,其相对应的卵子受 精率分别为61.5%,66.7%,74.8%和79.1%,各组间相比差异有显着性,精子形态与卵子受精率有明显的相关性. 精子的顶体反应率分为3组,分别为?3%,4%,7%和?8%,其对应的卵子受精率分别为75.2%,75.0%和 74.5%,各组间相比差异无显着性,在体外精子顶体反应率与IVF受精率无明显的相关性.结论在IVF中,精子 的形态对卵子的受精率有着明显的影响,卵子对正常形态的精子有一定的选择性.在体外,精子顶体反应率的高低 与卵子受精率没有明显的相关性.因此,精子形态分析和顶体反应二项参数,在自然周期和IVF周期中,对受精功 能的评价有着不同的参考价值和意义;同时,在人类辅助生殖技术实施过程中可以作为选择不同辅助生殖技术的依 据 关键词:精子形态;顶体反应;卵子;受精率 中图分类号:R714.12文献标识码:A 精子的形态和顶体反应是衡量精子功能的两项 重要指标.精子形态,顶体反应和IVF受精率这三 者之间的关系以及在IVF技术中,如何提高受精率 和减少受精失败,许多学者进行了大量的研究,尤其 对精子的顶体结构和功能已有了深人的了解.世界 卫生组织也在1976年制定了精子形态的分析 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 . 本文将应用这些分析标准,对精子形态,顶体反应和 IVF受精率这三者之间的相关性进行分析,以及如 何对精子形态,精子顶体反应的各项参数在IVF技 术的应用中作出准确的评价进行讨论.为此本文着 重对125例IVF—ET中男方的精子形态,顶体反应 和受精率的相关性以及如何对这些参数作合理的评 价进行了研究,现报道如下. 1材料与方法 1.1样本来源 选择2003年1月至2004年8月第九人民医院 生殖中心常规体外受精一胚胎移植(IvF—ET)125个 周期(不包括少精症患者).分析了125份男方精液 收稿日期:2004—1O一13 作者简介:钱宪明(1954一),男,主管技师,学士 ? 10? 标本,观察了l475个卵子的受精情况. 1.2精液分析方法 精子的活动率,密度,精子形态等项目的分析方 法,均按世界卫生组织的”人类精液及精子——宫颈 黏液相互作用实验室检验手册”的方法操作. 1,3精子处理方法 应用洗涤上游法或密度梯度离心法处理精液, 收集高活动力精子,用于IVF. 1.4精子顶体反应测定 按世界卫生组织的”人类精液及精子——宫颈 黏液相互作用实验室检验手册”的方法操作【引. 1.5体外受精方法 应用洗涤上游法或密度梯度离心法收集高活动 力精子,用HTF培养液调整精子密度,每一个卵子 培养液中加入2万条精子,然后将含有卵子和精子 的培养皿置于37?二氧化碳培养箱中,经16~20h 培养后,取出培养皿观察卵子受精情况.卵细胞内 原核?2个(2PN)为受精,并记录受精卵和未受精 卵的数目. 1.6培养液 精子和卵子培养使用HTF培养液. 第5期钱宪明等:精子形态,顶体反应与卵子受精率的相关性研究 1.7统计方法 数据统计采用)[检验. 2结果 2.1125例IvF_ET中男方的精液分析结果( 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1) 表1125例I,,F.ET男方的精液分析结果 2.2125例IET精子形态与受精率的分析结 果(图1) 精子正常形态率<14%时,卵子的受精率为 61.5%(32/52),精子正常形态率在14%,24%时, 卵子的受精率为66.7%(112/168),精子正常形态 率在25%,34%时,卵子的受精率为74.8%(190/ 254),精子正常形态率?35%时,卵子的受精率为 79.1%(659/’833).结果分析表明,各组间P< 0.O1,受精率与形态有着明显的相关性.结果表明, 随着精子正常形态率的增高,卵子的受精率也明显 增高. 90 80 70 60 褂50 o 30 20 l0 0 图1精子形态与受精率的关系 2.3125例IET精子顶体反应与受精率的分 析结果(图2) 顶体反应小于?3%时,卵子的受精率为 75.2%,顶体反应在4%,7%时,其受精率为 75.0%,顶体反应?8%时,其受精率为74.5%.结 果分析表明,各组间P>0.O1,受精率与顶体反应 无显着的相关性. 3讨论 3.1精子形态分析在IET技术中的应用价值 精子形态与IVF的受精率有着非常密切的相关 性[1,6l,也是常规精液分析当中最重要的一项检查指 标.在术前做详细的精子形态分析,可以为选择不同 的辅助生殖技术治疗方法提供有价值的诊断信息[. 图2精子顶体反应与受精率关系 精子的受精能力,首先取决于精子固着于透明 带能力的获得.为了能使卵子受精,精子首先必须 能识别卵子的透明带并与之结合.这种识别过程是 精子表面的糖基被透明带的糖基结合蛋白(ZP3)所 识别….当精子的形态发生改变时,就会影响到精 子表面的糖基和糖基结合蛋白质的结构,影响到精 子固着于透明带能力的获得,而使精子无法穿透卵 子透明带和卵膜,达到受精的目的. 正常形态精子的顶体结构,表现为完整的双层 膜性结构,呈平行贴于核表面.顶体内含有受精时 所必需的酶.而形态异常精子的顶体结构,经常会 出现顶体与核膜分离,双层膜性结构部分消失,顶体 反转与核分离等现象_5].这些顶体结构异常的精 子完全丧失了受精功能.如大头,小头,尖头,无定 型头,圆头等精子由于顶体异常或没有顶体而没有 受精能力[卜3,5l. 本文的研究结果表明,当精子正常形态率<14% 时,卵子的受精率为61.5%,低于目前国内外制定的 IvF受精率>65%的标准.精子形态异常是造成 IvF受精率偏低或不受精现象的重要因素之一.因 此,在术前要对精子形态作出详细分析,并根据形态 分析结果可以选择相应的辅助生殖技术方法.如:当 精子正常形态率<5%时可选择卵胞浆内单精子显微 注射(intracytoplasnaicsperminjection,I(23I)的治疗方 法;当精子正常形态率在6%,15%时,要结合其他精 子功能试验,可选择IVF或I(23I的治疗方法;当精子 正常形态率>15%时可选择I?的治疗方法,从而避 免或降低不受精现象的发生. 3.2精子顶体反应在IET技术中的应用价值 同济大学(医学版)第26卷 顶体反应是精子受精过程中一项非常重要的生 理功能.精子顶体反应检测技术是了解精子受精功 能的一项重要手段,同时也是术前预测精子受精情 况的一种有效方法,为我们合理选择辅助生殖技术 的治疗方法提供了有价值的参考依据. 目前精子顶体反应检测技术包括;观测精子顶体 的完整,测定顶体酶活性,精子一透明带结合试验, 透明带诱导顶体反应或应用钙离子诱导剂,卵泡液和 孕酮试剂诱导精子顶体反应,精子一透明带穿透试验 等.其中精子一透明带结合试验,透明带诱导顶体反应 试验是精子受精功能最有效的测定方法n,7l. 本文的研究结果表明,精子顶体反应率与IVF 受精率无显着的相关性.这可能是精子顶体反应实 验,并不能完全反映精子在女性生殖道内或在自然 条件下顶体反应功能.因此,要更准确地了解精子 的受精功能,还需要做精子一透明带结合试验,精子一 透明带穿透试验,透明带诱导精子顶体反应试验 等l,这样才能客观地,正确和科学地反映精子的 受精功能. 因此,在术前对精子顶体反应功能作详细分析, 我们就可以根据顶体反应结果来选择相应的辅助生 殖技术方法.如:当精子无顶体反应或顶体反应率 <3%时应选择ICSI的治疗方法;当精子顶体反应 率在4%,7%时,应结合其他精子功能试验,可选 择IVF或ICSI的治疗方法;当精子顶体反应率> 8%时可选择IVF的治疗方法. 3.3精子形态,顶体反应在自然周期和IVF周期 中不同的评估价值及参考意义 在自然周期和IVF周期中,精子的整个受精过 程是不同的.在自然周期中,精子完成整个受精过程 需要经过三个阶段;(1)精液射人女性生殖道,精子 准备脱离精浆,穿过子宫颈和宫颈黏液.(2)精子进 人官腔后,逆行而上穿过官腔和输卵管,最终到达输 卵管壶腹.在运行过程中,完成精子获能.(3)在输 卵管壶腹部,精子完成顶体反应和受精过程.在整个 受精过程中,精子需要消耗大量的能量.同时,还受 到女性生殖道中的各种因素的影响,最终能够到达受 精部位的精子只有几百条,在自然受精过程中将淘汰 大量不合格的精子,这在某种程度上是降低了自然受 孕的机率.因此,在自然周期中,精子的各项质量指 标及其功能,必须要在正常值范围之内或高于正常值 的范围,精子才能完成整个受精过程. 而在IVF周期中,由于精子完成整个受精过程 都是采用人工受精方式;(1)尽可能多的收集活动 ? 12? 精子,但其中大部分精子在自然周期中可能是被淘 汰的精子;(2)缩短了精子受精过程,降低了能量消 耗;(3)在人工加精中,数百倍地提高了受精精子数 量,增加了精子受精的机率l.因此,在IVF周期 中,当精子的各项质量指标及其功能低于正常值时, 是可以在实验室里通过人工的方法进行调整后,来 完成精子的受精过程. 本文的研究结果表明,精子形态分析和顶体反 应二项参数,在自然周期和lVF周期中,对受精功 能的评价有着不同的参考价值和意义.使用有效的 精子受精功能测试技术和结合精子质量综合分析方 法,能准确地对精子受精功能作出判断.在人类辅 助生殖技术实施过程中可以作为选择不同辅助生殖 技术的依据. 参考文献: [1]RobertW,MartineA.Influenceofthenumberofmotile spermatozoainseminatedmadoftheirmorphologyonthe successofintrauterineinsemination[J].HumanRepro— duction,2004,19(9):2060—2065. 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[9]金帆,石一复.精子质量和数量对体受精率,卵裂率 和卵裂胚胎的影响[J].中华妇产科杂志,1998,33(1): 28—3O. f下转第l6页J 同济大学(医学版)第26卷 pressionofendothelialnitricoxidesynthase[J].Cardio— vascRes,2003,57(1):55—62. [4]YanY,DavaniS,ChccronS,eta1.EffectsofL-arginine administrationbeforecardioplegicarrestonischemia reprfusioninjury[J].AnnThoracSurg,2001,72(6): 1985—1990. [5]DesroisM,SciakyM,LanC,eta1.L-arginineduring long-termischemia:effectsoncardiacruction,energetic metabolismandendothelialdamage[J].JHeartlung Transplant,2000,19(4):367—76. DiscussiononOptimalContentofL-arginineinCardiac Ischemia-Reperfusion CAIJian—zhi,WANGYong-wu (Dept.ofThoracicandCardiovascularSurgery,TongiiHospital,TongjiUniv ersity,Shanghai200065,China) ABSTRACt:ObjectiveTodiscusstheoptimalcontentofL-arginineonmyocardialischemiarepeffusloninjuryinrat. MethodsLangendorffmodelswereusedwithprovisionofdifferentcontentsofL-argininebeforemyocardialischemia. Duringreperfusion,cardiacfunctionindexandlacticdehydrogenase(LDH)activity,NOlevel,myocardialMDAetc.were observed.ResultsLowcontentL—arginine(10,30,50mmol/L)coulddecrea semyocardialischemiarepeffusioninjury,a— mongwhich30mmol/LL-argwasthebest,whilehighcontentL-arginine(100mmol/L)couldincreasemyocardialis— chemiareperfusioninjury.ConclusionItseemsthatoptimalcontentofL-argexists.HighcontentL-argininehastoxic effectswhilelowcontentL—argininehasbeneficialeffects. KEYWORDS:L-arginine;NO;myocardialischemiareperfusioninjury;rats (上接第12页) TheRelationshipbetweenAcrosomeReaction,SpermMorphology andOvumFertilizationRateinIVF QNXian—ruing,KUANGYan—ping,WUQian-yu,L,ULan (ReproductiveMedicineCenter,ShanghaiOrientalHospital,affiliatedtoTongjiUniversity,Shanghai200120,China) AINI’RACT:ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenovu_rnfertilizationrateandspermmorphology,acrosome reactioninIVFandtoexploretheinfluenceofparametersofspermonfertilizationrate.Methods125semensamples wereanalyzedwithroutineanalysis,spermmorphologyandacrosomereactionand1475ovaeitherfertilizedorunfertilized wereobservedinordertoexploretherelationshipbetweenthespermparametersandOVUlTIfertilizationrate.Results Fourgroupsweredividedaccordingtothepercentageofnormalspermmorphology:<14%,14%,24%,25%,34% and?35%,theovumfertilizationratewas61.5%,66.7%,74.8%and79.1%corresponding.Therewassignificant differenceamongthesefourgroups.Theresultshowedthattherewaspositivecorrelationbetweenspermmorphologyand ovumfertilizationrate.Then,threegroupsweredividedaccordingtospermacrosomereactionrate:?3%,4%,7%and %,theovumfertilizationrateswere75.2%,75.0%and74.5%corresponding.Therewasnodifferenceinthree groups.Theresultshowedthattherewasnocorrelationbetweenspermacrosomereactionandovumfertilizationratein vitro.ConclusionInIVF,thespermmorphologymayhavesignificantinfluenceonovumfertilizationrate.andhuman ovaareselectiveforspermswithnormalmorphology.Invitro,theacrosomereactionofspermdoesnotinfluencetheovum fertilizationrate.Themorphologyandacrosomereactionofspermmaybetwoimportantparameterstoevaluatethefunc— tionoffertilization. KEYWOI江Is:spermmorphology;acrosomereaction;ovum;fertilization ? 16?