【doc】 参芪五味子胶囊的镇静、抗应激和免疫调节作用

【doc】 参芪五味子胶囊的镇静、抗应激和免疫调节作用 参芪五味子胶囊的镇静、抗应激和免疫调节 作用 第3o卷第20期 2005年10月 中国中药杂志 Chip.aJournalofChillt~eMateriaMediea Vo1.30.Issue20 October.2005 参芪五味子胶囊的镇静,抗应激和免疫调节作用 曹永孝,郑建普,刘静,姚鸿萍 (西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室,陕西 西安710061) 参芪五味子胶囊是由参芪五味子片改变剂型的 新制剂,有健脾益气,宁心安神之功效,用于心悸气 短,动则气喘易汗,少寐多梦,倦怠乏力,健忘等症. 本实验拟研究其主要药效学,为临床应用提供实验 依据. 1材料 1.1主要仪器YLS一1A多功能小鼠自主活动记 录仪,山东省医学科学院设备供应站生产. 1.2试剂和药物参芪五味子胶囊和参芪五味子 片,均由甘肃独一味生物制药有限责任公司提供,批 号分别为02o90309和020517. 1.3动物ICR小鼠,体重l822g,雌雄兼用,购 于西安交通大学实验动物中心,合格证号:陕动证字 08—004号. 2方法与结果 每项试验均取小鼠50只,随机分5组:正常对 照组(0.5%羧甲基纤维素钠);参芪五味子胶囊(含 生药)2.0,1.0和0.5g?kg组;参芪五味子片1.0g ? kg组;各组均按10mL?kg灌胃给药,每天1次, 连续5d. 统计学处理:时间资料采用序值法检验;比率资 料采用确切概率法进行检验;其他数据采用t检验. 2.1镇静作用 2.1.1对戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响_1J 末次给药1h后,各组均ip戊巴比妥钠45mg?kg,, 观察小鼠睡眠时间,翻正反射消失至恢复时间为睡 眠时间. 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1结果显示,参芪五味子片组,参芪五味 子胶囊3个剂量组与正常对照组比较,入睡潜伏期 均缩短,睡眠时间均显着延长,表明参芪五味子胶囊 与戊巴比妥钠有协同催眠作用,相同剂量的参芪五 味子胶囊和参芪五味子片的入睡潜伏期和睡眠时间 均无显着性差别. [收稿日期]2004.06.15 [通讯作者]曹永孝,Tel:(029)82655140,E-mail:yxy@xjtu edu.cn 2.1.2对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡的影 响_1J末次给药45min后,各组均ip戊巴比妥钠35 mg?kg,, 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 睡眠小鼠只数(以注射戊巴比妥钠后 10min内翻正反射消失1min以上者确定为人睡), 计算各组睡眠率.结果显示,参芪五味子片组,参芪 五味子胶囊1.0,2.0g?kg组的睡眠率分别为 50%,50%和60%,与正常对照组睡眠率0%比较 (确切概率法检验),小鼠睡眠率均显着提高,表明参 芪五味子胶囊有催眠作用. 2.1.3对小鼠自主活动的影nl~E:J用小鼠自主活 动记录仪记录清醒状态下小鼠30min内自主活动 的次数(每个计数室放1只小鼠,5个计数室同时使 用),按自主活动次数将小鼠分层随机分组.末次给 药后45min再用同法记录各组小鼠30min内自主 活动的次数,结果以差值(药前一药后)表示.表2 结果显示,参芪五味子片组,参芪五味子胶囊3个剂 量组与正常对照组比较,小鼠自主活动次数均有减 少趋势,但无统计学意义. 表1参芪五味子胶囊对戊巴比妥钠致 小鼠睡眠时间的影响(露-I-s,n=10) 注:与正常对照组比较1P<0.05,2P<0.01 表2参芪五味子胶囊对小鼠自主 活动的影响(露-I-s,n=10) 2.2抗应激作用 2.2.1对小鼠游泳时间的影响[.]玻璃缸 ? 163l? 第30卷第2o期 2005年10月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica V01.30.IssIle20 October.2O06 (40cmX30cmX20cm)内注水,水深15cm,水温18 ?.末次给药45min后,将小鼠放人玻璃缸内游 泳,以小鼠没水15S不出水面为终止时间,计时. 表3结果显示,参芪五味子片组,参芪五味子胶囊 2.0,1.0g?kgI1组与正常对照组比较,小鼠游泳时间 均显着延长;参芪五味子胶囊0.5g?kgI1组有延长 游泳时间趋势,但无统计学意义.表明参芪五味子 胶囊具有抗疲劳作用.相同剂量的参芪五味子胶囊 和参芪五味子片的游泳时间无显着性差别. 2.2.2对小鼠常压耐缺氧时间的影响L4J末次药 后45min将小鼠放人盛有10g钠石灰的广口瓶 (125mL)中(每瓶1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口盖 严,立即计时.以呼吸停止为指标,观察小鼠因缺氧 而死亡的时间.表3结果显示,参芪五味子片组,参 芪五味子胶囊2.0,1.0g?kgI1组与正常对照组比 较,均有显着性差异;参芪五味子胶囊0.5g?kgI1组 有延长存活时间趋势,但无统计学意义.表明参芪 五味子胶囊能延长常压缺氧小鼠的存活时间,具有 抗应激作用.同剂量的参芪五味子胶囊和参芪五味 子片的存活时间无显着性差别. 2.2.3对氰化钾(KCN)中毒小鼠存活时间的影 响LJ于末次给药1h后各组小鼠腹腔注射KCN10 II1g?kg_.,立即观察记录其存活时间.以停止呼吸作 为其死亡 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 ,若10min不死亡,按10min计.表3 结果显示,参芪五味子片组,参芪五味子胶囊3个剂 量组与正常对照组比较,均有显着性差异.表明参 芪五味子胶囊可延长KCN中毒小鼠的存活时间,具 有抗应激作用.同剂量的参芪五味子胶囊和参芪五 味子片的存活时间无显着性差别. 2.2.4对小鼠耐寒时间的影响末次药后1h, 将小鼠放人一4?冰箱内,计时.于放人冰箱后1, 2,3h后分别将小鼠取出,统计各组小鼠存活数,计 算各组小鼠存活百分率.表4结果显示,小鼠在 一 4?环境下1h各组小鼠均存活;2h后各组均有 死亡,但存活率的差异无统计学意义;3h后,参芪五 味子片组,参芪五味子胶囊2.0g?kg-1组与正常对 照组比较,差异显着,表明大剂量参芪五味子胶囊有 耐寒作用,而参芪五味子片的耐寒作用强于参芪五 味子胶囊. 2.3免疫调节作用 2.3.1对网状内皮细胞吞噬碳粒的影响【0J末次 ? 1632? 表3参芪五味子胶囊对小鼠游泳时间和常压缺氧及KCN 中毒存活时间的影响(?s,n=10) 注:与正常对照组比较P<0.05,P<0.O1 表4参芪五味子胶囊对小鼠耐寒 时间的影响(?s,n=10) 注:与正常对照组比较”P<0.05,’P<0.O1 药后45min,尾静脉注入印度墨汁(用生理盐水稀释 4倍)10zllL?kg,,于注入墨汁后30s及8min从小 鼠眼眶后静脉丛取血25止,立刻吹人0.1%Na2CO3 液2mL中,吸管于该液中吸人,吹出数次以充分洗 出吸管壁附着之血液,取血完毕以25止正常小鼠 血溶于2mL0.1%Na2CO3液校零,于630Rill处比 色,计算吞噬指数.表5结果显示,参芪五味子片 组,参芪五味子胶囊2.0,1.0g?kg-1组与正常对照 组比较,有显着性差异.表明参芪五味子胶囊具有 加速静脉内注入异物在血液中的廓清速度,从而提 高机体网状内皮系统吞噬异物的能力,具有提高机 体非特异性免疫功能的作用. 2.3.2对绵羊红细胞诱导的特异性循环抗体水平 的影响按文献[7]方法制备绵羊红细胞(SRBC) 20%和10%悬液和豚鼠血清.取小鼠50只,随机 分组同前.均按10mL?kgI1分别灌胃,每天1次,连 续8d.于第3天,每只小鼠均ip20%SRBC悬液 0.2mL/只.末次给药后1h,按文献[3]方法进行溶 血素测定,计算每只小鼠样品的半数溶血值(HC?). 表5结果显示,参芪五味子片组,参芪五味子胶囊3 个剂量组与正常对照组比较,均有显着性差异.表 明参芪五味子胶囊对抗SRBC抗体形成有明显的促 进作用,其作用与参芪五味子片相当. 3讨论 参芪五味子胶囊是由五味子,黄芪,党参,酸枣 第3O卷第20期 2005年lO月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica V01.30.Issue20 October,2005 表5参芪五味子胶囊对小鼠网状内皮细胞 吞噬碳粒和溶血素水平(Hc50)的影响(牙?S,n=10) 注:与正常对照组相比较”P<0.05,2P<0.01 仁(炒)组成的中草药制剂.五味子具有润肺,滋肾, 止汗,止泻,涩精之功效,可以增强机体免疫功能,抑 制中枢神经系统,抑制呼吸系统,还有抗应激作用. 黄芪是临床上常用的中药,具有补气,固表,利尿,生 肌的作用.党参有补中益气,生津养血之功效,主治 气短心悸,体倦无力,食少便溏.酸枣仁有安心养 神,益阴敛汗,补中益肝等功能. 本实验发现,参芪五味子胶囊能明显缩短入睡 潜伏期,延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间,增加戊巴比 妥钠阈下睡眠剂量引起入睡的小鼠数,即对小鼠睡 眠的影响与戊巴比妥钠有协同作用;同时,还有减少 小鼠自主活动次数的趋势.结果提示参芪五味子胶 囊有镇静,催眠作用,因此可用于阴虚火旺之失眠患 者,起到定悸安神作用. 应激反应是机体受到各种有害刺激后产生的一 种非特异性紧张反应,长期在应激状态下生活可引 起人体气机紊乱,脏腑阴阳气血失调,导致机体免疫 力下降.疲劳,寒冷,缺氧均是应激原,因此抗疲劳, 耐寒,耐缺氧三项实验是反应机体抗应激功能的重 要指标,而抗应激功能的优劣可直接体现机体对外 界抵抗力的强弱.本实验发现,参芪五味子胶囊能 延长小鼠游泳时间,延长小鼠耐组织缺氧时间,增强 小鼠耐低温能力,表明此制剂具有增强体质的功能. 巨噬细胞的吞噬活性是机体非特异性免疫功能 的重要指标,参芪五味子胶囊能明显增强小鼠网状 内皮系统巨噬细胞的吞噬功能.另外,参芪五味子 胶囊还能使小鼠血清溶血素水平明显升高,使小鼠 分泌抗体功能增强.结果提示参芪五味子胶囊具有 增强非特异性免疫功能和体液免疫功能的作用. 总之,参芪五味子胶囊有明显的镇静作用,抗应 激作用,并能显着增强机体免疫功能.其作用与原 剂型参芪五味子片相当. [参考文献] [1]张智,闪增郁,陈燕萍,等.中药日月静对戊巴比妥钠小鼠 入睡个数和睡眠时间的影响.中国中医基础医学杂志,2002, 8(1):l8. [2]魏凤环,莫志贤,王永刚.灌胃刺激对小鼠自主活动计数的影 响.中国药理学通报,2004,20(3):356. [3]陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1994. 780,750. [4]张玉亮,张贞,朱成全,等.荣向路平衡阴阳口服液抗疲劳, 抗应激的实验研究.海军医学杂志,2002,23(1):6. [5]吴俊芳,史以菊,刘天培.小檗碱对小鼠和大鼠脑缺血的保护 作用.中国药理学与毒理学杂志,1995,9(2):100. [6]徐宇杰,王枫,罗文纪,等.太子健冲剂对气虚小鼠抗应激 反应的影响.浙江中医学院,2001,25(5):53. [7]张光茹.藏药乙肝清胶囊对小鼠免疫功能的影响.青海医学 院,2002,23(1):8. [责任编辑古云侠] (上接第1623页) EffectofKanglaiteinjectiononcyclooxygenaseactivity inlungcarcinomaA549cell DONGQing-hua,ZHONGXian,ZHENGShu (The2a~iatedHosphalofZhejiangUniversity,CancerInstitute,Zh~jia,gUmversity,Ha,~.hou310016,Ch/na) [Abstract]Objective:TostudytheeffectofKanglaiteinjectiononcyclooxygenaseactivityinlungcarcinomaA549ceUs.Methods: TheexpressionofmRNAofCOX-1andCOX-2weremeasuredbyRT-PCR.TheexpressionofCOX-2proteinwasmeasuredbyWestern-blot. Result:KanglaiteinjectioncouldselectivelydecreasedCOX-2mRNAexpressionandproteinexpressionwhileCOX-1mRNAexpressionwas unch~cd.Col~on:Kanglaitei~ectionisselectivelyinhibitoryagentofCOX-2,andpossessinhibitoryeffectsoncyclooxygenase2. 1KeywordsJKanglaitei~ection;cyclooxygenase;lungcancer [责任编辑古云侠] ? 1633?