促甲状腺激素
概述
促甲状腺素TSH是垂体前叶分泌,分子量为30000的一种糖蛋白激素。由a和B两个亚基组成。A亚基与FSH、LH的a亚基结构相似,而与HCG的a亚基结构略不同。B亚基为激素特异性,结构各不相同。原发性甲状腺功能低下时血清中TSH升高。TSH升高可确定因总T4或游离T4值低诊断的明显(overt)甲低。仅的测定总T4或游离T4难以诊断甲状腺功能低下,因为总T4或游离T4可在正常值范围内。这些情况下测定TSH特别有利于诊断,因为TSH水平升高。在甲高时T3和T4升高而TSH受抑制。
血清中TSH是研究下丘脑——垂体——甲状腺轴之间相互关系的主要指标。用于鉴别诊断原发性和继发性甲状腺功能低下、诊断甲亢、甲状腺肿、甲状腺癌等甲状腺疾病以及术后和疗效监测。
原理
本公司的促甲状腺素试剂盒采用双抗夹心法测定人血清TSH。将抗一a亚基的单克隆抗体包被于微孔板上,用辣根过氧化物酶标记抗一B亚基的单克隆抗体为示踪物。若检测标本中含有TSH,则在反应板中形成a亚基单抗——TSH——B亚基单抗*HRP;再加入底物后显色。人血清中TSH的浓度与OD值成正比。
试剂组成
1、微孔反应板:48孔,2-8?干燥保存,有效期内保持稳定。
2、酶结合物:一瓶,2-8?保存,有效期内保持稳定。
3、标准品:6瓶,浓度分别为0,0.5,1.0,5,15,30uIU/ml(1stIRP
68/38)[IuIU/ml(1stIRP68/38)=1uIU/ml(2ndIRP80/558)],2-8?保存,有效期内保持稳定。 4、显色A:2-8?保存,有效期内保持稳定。
5、显色B:2-8?避光保存,有效期内保持稳定。
6、洗液:一瓶,使用前用蒸馏水稀释10倍,2-8?保存,有效期内保持稳定。 7、终止液:一瓶,2-8?保存,有效期内保持稳定。
操作步骤
1、 在反应孔中依次加入50ul标准品及待测标本。
2、 每孔加入100ul酶结合物,轻轻振荡,充分混匀。
3、 在37?水浴箱中温育60分钟。
4、 将各孔液体弃尽,用洗液冲洗五次,并拍干。
5、 向各反应孔中加入1滴显色液A及1滴显色液B,充分混匀,室温(18-28?)避光反应
15分钟
6、 每孔加入1滴终止液,混匀。
7、 以显色液A、B、纯利润2液(各1滴)的混合液体作空白孔,用微孔型酶标仪在450nm
波长下依次以空白、标准品,标本的顺序读记吸光度;
8、 反应终止后的30分钟内
记录
混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载
各反应孔的OD值。
结果计算
1、 以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在普通坐标纸上绘制标准曲线。 2、 在标准曲线上查出待测标本浓度。
正常值范围
每个实验室都应根据本实验室条件及接触的人群作出自己实验室正常值范围 。以下正常值为本公司提供,仅供参考:
正常范围:0.5-5.8uIU/ml
甲抗:0-0.5uIU/ml
甲低:?7.5uIU/ml
质控血清参考值:I=5.0(4.0-6.0)
II=20.0(15.0-25.0)