青钱柳叶片次生代谢产物含量分析

青钱柳叶片次生代谢产物含量分析 青钱柳叶片次生代谢产物含量分析 第27卷第3期 2007年5月 浙江林 J0UR.0FZHEJIANG 业科技 F0R.SCI.&TECH. VO1.27NO.3 May,2007 0012.03 文章编号:1001.3776(2007)03— 青钱柳叶片次生代谢产物含量分析 金则新,李钧敏,丁军敏 (台州学院生态研究所,浙江临海317000) 摘要:对5个样地青钱柳叶片的鞣质,生物碱,总黄酮,游离蒽醌,绿原酸,皂甙,总酚7种次生代谢产物的含 量进行了测定和分析.结果表明:(1)青钱柳叶片中总次生代谢产物的含量在各个样地存在一定的差异,其中天 台县华顶山的总次生代谢产物含量最高,其它样地相对较低,其高侧l颐序为华顶山>钱江源>四明山>庐山>大 盘山;(2)相同成分在不同的样地也有差异,青钱柳叶片鞣质含量最高的样地是庐山,生物碱,总黄酮,游离蒽 醌,皂甙含量最高的样地是钱江源,绿原酸,总酚以华顶山样地最高;(3)不同样地叶片中各次生代谢产物含量 的相关性不高;(4)系统聚类分析显示,5个样地可聚为二类,华顶山,四明山,庐山聚成一类,钱江源,大盘 山聚成另一类. 关键词:青钱柳;营养器官;次生代谢产物;含量 中图分类号:$792文献标识码:A 青钱柳(Cyclocaryapaliurus)系胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属高大乔木植物,现仅存一种,为我国所特 有[1].长期以来民间用其叶片做茶,因其味甜有清热解暑,降压,降糖等保健功效,又称为甜茶,神茶等.国 内外对青钱柳的化学成分,生理和药理功能,组织培养和栽培技术等进行了较多的研究,积累了一些资料[2, 但系统测定不同样地青钱柳叶片次生代谢产物的含量至今未见报道. 植物次生代谢产物是指植物体中一大类并非生长发育所必需的小分子有机化合物,它在维持植物自身的生 存和发展中具有重要作用,可提高植物对环境的适应性,抵御天敌的侵袭,增强抗病性,提高植物种间竞争能 力,维系植物与其他生物间的互惠关系等[1.本研究通过比较分析不同样地青钱柳叶片鞣质,生物碱,总黄酮, 游离蒽醌,绿原酸,皂甙,总酚7种次生代谢产物的含量,确定青钱柳叶片次生代谢产物的分布规律,寻找出 高次生代谢产物含量的适生区域,为青钱柳的开发利用提供理论依据. 1材料与方法 1.1材料 实验材料于2005年7月采集自浙江省天台县华顶山(HDS),浙江省开化县钱江源(QJY),浙江省磐安 县大盘山(DPS),浙江省宁波市四明山(SMS),江西省九江市庐山(LS)等样地,各样地环境条件见表1. 选取生长正常的青钱杉P植株,采 集叶片用保鲜袋封装,立即带回 实验室.将材料洗净,自然风干, 105oC杀青5min,75oC干燥至恒 重,研磨后经过0.25mm金属网 表1青钱柳不同样地的环境条件 收稿日期:2007.03.23;修回日期:2007.04.09 基金项目:浙江省自然科学基金项目(Y504220) 作者简介:金则新(1960一),男,浙江临海人,教授,硕士,从事植物生态学研究. 3期金则新,等:青钱柳叶片次生代谢产物含量分析13 筛,将烘干样品放入磨口广口瓶,置于干燥器中保存,备用】. 鞣质,生物碱,总黄酮,游离蒽醌,绿原酸,皂甙,总酚等标准品没食子酸,小檗碱,芦 丁,3,5.二羟基蒽 醌,绿原酸,人参皂甙Re购自中国药品生物制品检定所,纯度为定量分析用. 1.2方法 鞣质,生物碱,总黄酮,游离蒽醌,绿原酸, 皂甙,总酚等次生代谢产物的含量参照文献[15,21】 测定,分别以各类标准品为标样,制定标准曲线, 得回归方程(表2). 1.3数据处理 试验处理及数据测定均重复3次,取平均值. 平均值及标准差采用Excel软件计算,单因素方差 表2各类次生代谢产物的回归方程 鞣质 生物碱 总黄酮 游离蒽醌 绿原酸 皂甙 总酚 没食子酸 小檗碱 芦丁 3,5.二羟基蒽醌 绿原酸 人参皂甙Re 没食子酸 y=0.018lx+0.68810.9995 Y=0.0048x+0.00570.9986 v=0.0154x一0.00450.9969 v=0.0256x一0.O0060.9994 v=11.550Ox一0.04680.9984 v=0.018lx+0.O0020.9999 v=0.0498x一0.00500.9931 分析(analysisofvariance,ANOVA),Duncan新复极差法检验,相关系数,系统聚类分 析均采用DPS统计软 件完成'. 2结果和分析 2.1不同样地青钱柳叶片次生代谢产物的含量 对5个样地青钱杉11叶片的7种次表3不同样地青钱柳叶片次生代谢产物的含 量 生代谢产物含量进行测定,结果如表 3所示. 由表3可知,7种次生代谢产物 总量,I-IDS样地最高,DPS样地最低, 其高低顺序依次为HDS>QJY>SMS >LS>DPS.不同样地青钱杉11的叶片 鞣质,生物碱,总黄酮,游离蒽醌, 14浙江林业科技27卷 注:极显着相关;显着相关. 碱与游离蒽醌,皂甙与总酚之间具有极显着性相关(P<0.01). 2.3不同样地青钱柳次生代谢产物含量的系统聚类分析 对5个样地青钱柳叶片的7种次生代谢产物含量计算欧氏距离,运 用UPGMA法进行系统聚类,结果可分成二大类(图I).SMS样地与 LS样地先聚成一起,再与HDS样地聚在一起,组成一类;QJY与DPS 样地则聚成另一类. 3结论与讨论 HDS SMS LS QJ-,f DPS 图1青钱柳叶片次生代谢产物含量 的系统聚类图 一 些植物不论环境如何,都会合成,积累次生代谢物质.然而,对大多数植物而言,次生代谢产物的合成与 积累往往受制于所处环境的变化.它们根据所处环境的变化来决定合成次生代谢产物的种类和数量】.不同样地 青钱柳叶片的鞣质,生物碱,总黄酮,游离葸醌,绿原酸,皂甙,总酚7种次生代谢产物的总量差异较大,以华 顶山样地最高,钱江源次之,大盘山最低.表明同种植物相同器官,由于所处的生长环境不同,对环境会产生不 同的反应,也就是环境不同会导致其J听含的化学成分产生差异.相同成分在不同样地也有较大差异,青钱柳叶 片鞣质含量最高的样地是庐山,生物碱,总黄酮,游离蒽醌,皂甙含量最高的样地是钱江源,绿原酸,总酚含量 最高的样地是华顶山,可见植物的次生代谢产物受地理环境因子影响较大,不同次生代谢产物在不同样地的含量 差异较大.由于次生代谢产物在植物体内的代谢途径不同,其次生代谢产物含量之间的相关性也不相同.系统聚 类分析显示,5个样地可聚为二类,华顶山,四明山,庐山聚成一类,钱江源,大盘山聚成另一类. 参考文献: [1】中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第21卷)[M】.北京:科学出版社,1979.118—191. 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Keywords:Daemonoropsmargaritae;sucker;explant;tissueculture ※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※ ※※※※※※※※※※※※※※ (上接第14页) 【15】王璐,王晓,施大文.中药锁阳鞣质含量的测定【J】.上海医科大 学,1996,23(2):150. 【16】李惠芬,卢继新,张晓梅,等.五种不同产地天仙子总生物碱的含量分析【J】. 中草药,1999,30(8):582—583. 【17】庄高平,虞杏英,更生,等.银杏叶中黄酮含量的测定和提取方法【J】.中草 药,1992,23(3):122—124. 【18】陈红红,黄丽玫.德庆等地巴戟天中蒽醌及多糖的含量测定【J].广东药学 院,2002,6(2):103—105. 【19】邢俊波,李萍,温德良.不同物候期金银花中总绿原酸的积累动态研究【J].中 国中药杂志,2001,26(7):456—459. 【20】宋永良.复方乳鸽胶囊中绞股蓝总皂甙含量测定.浙江中医学 院,2002,26(3):77. 【21】张军,杨庆凯,王守义,等.大豆抗SCN3过程中总酚含量动态分析【J].大豆科 学,2002,21(1):71—74. 【22】唐启义,冯明光.实用统计分析及其DPS数据处理系统【M】.北京:科学出 版杜,2002. 【23】苏文华,张光飞,李秀华,等.植物药材次生代谢产物的积累与环境的关系【J】. 中草药,2005,36(9):1415—1418. 【24】曾波,钟章成.四川大头茶黄酮类化合物的聚酰胺薄膜层析分析【J].植物生 态,1997,21(1):90,96. AnalysisonSecondaryMetabolicContentin LeavesofCyclocaryapaliurus ?NZe—xin.LIJun—min,DINGJun—min (TaizhouCollegeInstituteofEcology,Linhai317000,China) Abstract:Determinationandanalysison7secondarymetabolitessuchastannin,alkaloid,tot alflavonoids,freeanth. ra— quinone,chlorogenicacid,saponinandtotalphenolinleavesofCyclocaryapaliurusfrom5sa mpleplotsresulted thattherewasdifferenceamongdifferentplots,thatfromHuadingMountain,Tiantai,Zhejian gprovincewerethe highest.TheorderwasthatfromHuadingMountain>Qianjiangyuan>SimingMount ain>LushanMountain>Dapan Mountain.TheSalTlesecondarymetabolitecontentfromdifferentplotshasalsodifference.TannincontentfromLushan Mountainwasthehighest.Thatofalkaloid,totalflavonoids,freeanthraquinoneandsaponinwasthehighest,thatof chlorogenicacidandtotalphenolfromHuadingMountainwasthehighest.Secondarymetabolitescontenthadnoclose relationamongdifferentplots.Systematicclusteranalysisshowedthat5plotscouldbedividedintotwogroups. Keywords:Cyclocaryapaliurus;nutrientorgan;secondarymetabolites;content