测定葡萄酒中总糖方法的探讨

测定葡萄酒中总糖方法的探讨 2011 年 第 1 期 中 国 酿 造 总第 226 期 163分析与检测 测定葡萄酒中总糖方 法的探讨 武 平，赵文婧，徐晓娇，段学强 (太原师范学院，山西 太原 030031) 摘 要: 本文分别通过35-二硝基水杨酸法、 蒽酮比色法和间接碘量法测定了葡萄 酒中总糖的含量，经过多次实验测量、 结果分析得 出蒽酮比色法更适用于测量含 糖量较少的样品， 所测得结果没有另两种方法准确。间接碘量法重现性好，操作简 单、快速、易于掌握。 而3， 5-二硝基水杨酸法更为准确性高、 简便，可作为葡 萄酒中总糖测定的常规检测方法。 关 键 词: 葡萄酒;总糖含量;35-二硝基水杨 酸法;蒽酮比色法;间接碘量法 中图分类号:TS262.6 文献标识码:A 文章编号: ) (2011 01-0163-03 0254-5071 Methods for determination of total sugar content in wine WU Ping ZHAO Wenjing XU Xiaojiao DUAN Xueqiang Taiyuan Normal University Taiyuan 030031 ChinaAbstract: The total sugar content of red wine was determined through 35-dinitrosalicylic acid method anthrone colorimetric method and indirectiodometric method. The results showed that anthrone colorimetric method was more suitable for measuring samples with lower sugar content andless accurate than the other two methods. Indirect iodometric method had good reproducibility and was simple faster and easier to master. The35-dinitrosalicylic acid method was more accurate and simple and could be a routine method for the determination of total sugar content in red wine.Key words: wine total sugar content 35-dinitrosalicylic acid method anthrone colorimetric method indirect iodometric method 葡萄酒中的总糖量是影响葡萄酒质量 和区分葡萄酒 为葡萄酒总糖的测定探索一种更简便更实用更准确的测种类的重要 指标之一1。葡萄酒的甜味感主要来自酒中的 定方法。糖类，葡萄酒中的糖是极易 被人体吸收利用的葡萄糖和果 1 材料和用品 其不但能为人体的新陈代谢提供组成 的物质和储存能糖， 1.1 实验材料 而且可以帮助消化和调解机体内脂类及与蛋白 质的新量， 天然红葡萄酒(烟台白洋河酿酒有限公司)从太原美陈代谢2。有关葡 萄酒和果酒中总糖的检测方法有高效液 特好超市购得相色谱法、 直接滴定法和间 接碘量法 3、电位滴定法 4 及 1.2 仪器设备 5-二硝基水杨酸比色法 等，3， 5 一 控恒温水浴锅: 青岛海尔特种电冰柜有的直般实验室还是采用传统 HRHS24型数 接滴定法， 但红葡萄酒酒体颜色为深红色， 特别是水 限公司;WFJ2100型分光光 度计:上海尤尼柯有限公司;电解中和后， 颜色更深，用传统的直接滴定法时存在 的缺点 子天平;800W加热器。是滴定终点很难判定， 往往影响测定结果。本实验 采用了 1.3 实验药品另外3种方法进行了葡萄酒中总糖含量的测定， 以期可以 实 验用水为蒸馏水，所用试剂均为分析纯;无水葡萄 收稿日期:2010-05-25 基金项 目:太原师范学院科技创新项目(院团字 ) ) (2010 16 作者简介:武 平(1989- ， 山西太原人， ) 女， 研究方向为生物科学;赵文婧，实验师，通讯作者。性不高， 特别是在浓度较低的溶液中， 经实验发现，长时间 2009， (10 : 响研究J. 酿 酒科技， 184 ) 29-31. 3 管敦仪. 啤酒工业手册M. 北京:中国轻工业出版社，1998. 放置后α-酸浓度下降，所以样品应当天配制当天测定完。 另 4 徐基平，张 霞， 等. 刘海英， 啤酒花的地理分布与中国野生啤酒花资外，酸度太强 ) (pH值,2 对 分析柱损伤大， 柱效下降明显， 源J.干旱区资源与环境， 22 ) 179-183. 2008， (1 : 故本法pH值选2.57。如与啤酒的光稳定性有关，可以用反- 5 ONO M KAKUDO Y YAMAMOTO Y et al. Quantitative analysis of异-葎草酮的量来评价啤酒的老化 。不 同的同系物， 8 它们 hop bittering components and its application to hop evaluation J. J Am所发挥的作用是不同的同系衍生物的特性 9和对啤酒质 Soc Brew Chem 1983 434: 167-172. 6 朱 妍，薛 华. 浅析啤酒花 α- 酸检测过程中应注意的问题J. 技术量的贡献， 对酒花酸成分的测定也提出了更高的要求。国 2006 ) 48-50. 交流， (1 :内HPLC法测定酒花酸， 主要是其同系物标准品的缺乏， 给 7 陆 豫，王远兴，吴 芬. 反相液相色谱法测定酒花浸膏中的 α- 酸和定性和定量带来了一定困难。 β- 酸J. 南昌大学学报:理科版， 26 ) 79-81. 2002， (1 :参考文献: 8 ARKI S TAKASHIO M. A new parameter for determination of the ex-1 陈家华，沈 礼.高效液相色谱法测定酒花 α- 酸含量研究J. 现代商 tent of staling in beerJ. J Am Soc Brew Chem 2002 601: 26-30. 检科技， (2 : 1998， ) 10-12. 8 9 HUGHES P. The significance of Iso-α-acids for beer qualityJ. J Inst2 张海容，李 雪， 等. 王迎进， 环糊精对啤酒花油及风味物质稳定性影 Brew 2000 1065: 271-276. 2011 No(1 164 Serial No(226 China Brewing Analysis and Examination 天津市光夏精细化研究所; 5-二硝基水杨酸试剂; 糖: 3， 蒽 定吸光度值。 酮试剂6;硫代硫酸钠 ) 硫酸溶液(15 ; ) 盐酸 2.3.3 总糖含量计算 溶液 ) 碘化(0.1mol/mL ; 钾溶液 (11 ; ) 斐林氏 A、 (200g/L ; B液;淀粉指 XA/W×1000×V1/100 ×V/100 ×1000 试剂(10g/L 。 ) 式中: g/L; X-总糖含量， A-从标准曲线上查得的葡萄糖含 量， W-样品体积， V1-样品稀释或水解用体积， mg; mL; 2 实验方法 mL;V-测定用样品体积，mL。 2.1 测定原理 2.4 蒽酮比色法 5-二硝基水杨酸试 ， 2.4.1 葡萄糖标准曲线绘制 成棕红色的氨基化合剂与还原糖溶液共热可被还原 3 物 7，在一定浓度范围内，还原糖的 编号17， 取7支干燥洁净的试管， 分别加入0mL、 0.10mL、 可用于比色 含量和红色物质颜色深浅的程度成线性关系， 0.20mL、 0.30mL、 0.40mL、 0.80mL 葡 萄 糖 标 准 液 0.60mL、 快速， 测定。操作简便， 杂质干扰少。 (100μg/mL ， ) 蒸馏水1.0mL、 0.80mL、 0.90mL、 0.60mL、 0.70mL、 蒽酮比色法是一种快速而简便的测定糖含量的方 0.40mL、 蒽酮试剂各10mL。在每管加入葡萄糖标 0.20mL， 法，糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛及其衍生物，该衍生物与 准液和水后立即混匀，迅速置于冰浴中，待各管都加入蒽 蒽酮发生反应，反应后溶液呈蓝绿色，于波长620nm处有 酮试剂后，同时置于沸水浴中，准确加热7min，立即取出 因此可用此方法测定多糖含量。 最大吸收， 试管置冰浴中迅速冷却。待各管溶液达室温后，用1cm厚 间接碘量法:被测样品与过量的斐林氏A、B液共沸， 度的比色皿，以第一管为空白，迅速测其余各管的光吸收 其中所含的还原糖将二价铜离子还原成氧化亚铜。剩余 值。 吸光度值 然后以第2管-7管溶液含糖量μg数为横坐标， 的二价铜离子在酸性条件下与碘离子反应生成定量的 ) 画出含糖量与A620nm值的相关标准曲线。 (A620nm 为纵坐标， 碘。以硫代硫酸钠标准溶液滴定生成的碘， 从而计算出样 2.4.2 测定样品的含糖量 品中总糖或还原糖的含量。 取4支试管，编号14，分别加入样品溶液0、 1.0mL、 2.2 样品处理 1.0mL， 1.0mL、 蒸馏水1.0mL、 0mL、 0mL、 0mL，蒽酮试剂各 (V 准确吸取一定量的样品 1于100mL容量瓶中，使之 10.0mL。其他操作与制作标准曲线相同。将24测出的 所含总糖量为0.2g/mL0.4g/mL，将5mL盐酸溶液 ) (11 加 根据A620nm平均值从标准曲线上查出相应的含 A620nm平均值， 水至20mL， 于 ) 摇匀， (68?1 ?水浴上水解15min，取出冷 再换算成100g样品中总糖的含量。 糖μg数， 却。 调温至20?， 用200g/L氢氧化钠溶液中和至中性， 加水 2.5 间接碘 量法 (V) 定容至刻度 2 。 2.5.1 分析步骤 5-二硝基水杨酸法 2.3 3， 在 250mL标准磨口三角瓶中， 准确加入斐林氏 A、 B液 2.3.1 葡萄糖标准曲线绘制 各 5.00mL，再加入50.00mL水、 10.00mL试样溶液，摇匀， 准确吸取葡萄糖标准溶液0mL、 0.4mL、 0.2mL、 0.6mL、 装上标准磨口回流冷凝器， 放两粒玻璃珠， 在800W加热器 0.8mL、 (相当于0mg、 1.0mL 0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、 于2min之内将溶液加热至沸。从溶液完全开始沸腾时 上， 1.0 mg葡萄糖)分别置于6支25mL的具塞比色管中，各加 准确保持沸腾2min， 计时， 在冷水浴中冷却。待 立即取下， 水至2.0mL各加3， 5-二硝基水扬酸试剂0.5mL，置于沸水浴 边摇边加入5mL碘化钾溶液和 5mL硫酸 溶液完全冷却后， 中5min，取出后立即用冷水冷却至室温，再用水将各管定 立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定， 溶液， 接近终点(溶液呈 容至刻度。显色15min后于波长520nm处，用1cm 比色皿， ) 淡黄色 时加入1mL淀粉指示液继续滴定至乳白色即为终 以试剂空白作参比，测定吸光度值。比色测定需在15min 点。 (V) 以水代替 记下硫代硫酸钠标准溶液消耗的体积 1 。 内 ) 试样做空白试验， 完成。根据测得的吸光度值绘制标准曲线或计算直线 得出 (V0 。 回归方程。 2.5.2 计算 2.3.2 样品溶液测定 (V ) X c× 0-V1 ×63.55×f 加5.0mL 准确吸取一定量样品滤液于100mL容量瓶中， ) (V2/V3 ×V4 盐酸溶液(11 ， ) 加水至20mL， 于 混匀， (68?1 ?水浴中水 ) 式中:X—总糖或还原糖的含量 (以葡萄糖计) g/L; ， c—硫代 硫酸钠标准溶液的物质的量浓度， —空白试 解15min，取出冷却，用100g/L NaOH溶液中和至中性，调 验V mol/L; 0 消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积， V1—试样滴 mL; 加水定容至刻度。吸取上述转化液与空白液各 温至20?， 定时消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积， V2—吸取 mL; 1.0mL置25mL具塞比色管中，各加水至2.0mL，各加3， 5-二 的试样体积， V3—样品稀释或水解定容的体积， mL; V mL; mL; 4—测量时吸取的试样的体积， f—铜、糖之 硝基水杨酸试剂0.5mL，在沸水浴中加热5min，取出后立 (V ) 间氧化还原比值 〔以与c× 0-V1 ×63.55值最接近的 再用水将各管定容至刻度。 即用冷水冷却至室温， 显色15min 数， 查 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1、 ; 而得〕 63.55—铜的摩尔质量， (所得结果 .