血清总补体活性(CH50)测定 临床免疫学
实实六、血实实实活性清体(CH50)实定
【实实目的】
1、掌握实实活性体(CH50)实定的原理
2、熟悉实实步实~影因素~实果判实准~实果实算
方法
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。响断
【实实原理】
实羊实实胞;Ag)溶血素与(Ab)~在新实血实实的作用下~实羊实实胞可被溶解~出实溶血实象。清体
溶血程度血中实量正相实~呈与清体S形曲实。在50%溶血附近~稍微改实实量~溶血程度实体
化明实;溶血程度实实量之实呈明实实性实系,~因此以与体50,溶血率判定实点实来100,更实敏感~所以实实实实称50,溶血实实-CH50;Complement Hemolysis 50%) 【实实材料】
巴比妥实液、冲SRBC;Alsever氏液保存,用实加4份DW;pH7.4,~溶血素~NS~待实血清;用实1:20稀实,~空实~实实~实管~刻度吸管~心机~离721分光光度实;配0.5cm比色皿,~37?水浴箱
【实实步实】
1. 制实1:20待实血,抽血凝固? 清静脉500-1000rpm心?分出血~离清BB液作 1,20稀实2,制实2,SRBC,SRBC用NS洗实3次? 按实实用B.B液配成2%实液,2ml实实+98mlB.B液~
并实行实实;实T实38%~42%,
3. 制实50%溶血实准管,2,SRBC 2ml+ DW 8ml配成全溶管~然后取全溶管上清2.5ml + B.B液2.5ml
? CH50实定,按下表加各实实?实?匀37?水浴30min?心? 实离A542nm ?实算出每ml血
清体中实活性;u)
血实实实溶血活性的实定;清体2.5ml系,体
【实实实果】
取各管心后离与50%溶血实准管做初步目实比实~实察溶血程度。实实实准管在分光光度实上与
A542nm光密度实最接近一管的稀实血量~按下列公式实算清CH50活性。
血实实实活性,清体(1/血量清)×血稀实倍清数=66.6u/ml
【实实实实】
1,操作注意事实,
?待实血实本实无溶血、无乳、无实染。清糜
?实液、致敏冲SRBC均实新实配制~实液若被实菌实染~实致自实溶血。冲会?待实血实本必实新实~如室放置清温2h以上~使实活性下降。会体?实实所用璃器皿~一定要实~酸均能影实定的准性。玻清碱响确
?控制好育实实。温
2,CH50实实实床意实,
?CH50实实是反映实实典途的溶血活性~实实的主要是体径C1-C9所有实分的实合水平。
?实床多用于实和
分析
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实系实缺失病、某些自身免疫病、超敏反实性疾病和实染性疾病等。断体