皮肤细胞掺入实验评价化妆品中有效成份对皮肤的生理作用

一。 日 用 化 学 工 业 皮肤细胞掺入实验评价化妆品中 有效成份对皮肤的生理作用 上海市 日用化学-￡业研究所 王传好 郑德芳 殷雷 金锡鹏 ‘上海 市 20005D) 摘要 ： 本文用，H—TdR、一H—i舢 的皮肤细胞接^实验评价了化妆品中，几种有技戚份对皮肤细胞的生 理作用．结果表嚼． H一 R、，H—Leu播入实验可用来评价化妆 品中有效成份对皮l#细胞的作用．筛选化妆晶 甩营养成份． 关键词：± 垫曼 { 摩壁塑堕量 Abs~act： H--th~nidine and H一1eu¨ ic epiderminal incorparation tests are t~sed to evalu— ate physiological effects of many ingredients in cosmetics on epidermlnal keratlnocytes．The results demonsrated this tests are capable of evaluating and screening nutritional ingredients for cosmetics effectively Key wordsl cosmetics；evaluate,epiderminal keratinocytes；incorparation 引 言 化妆品中所用的营养成份多种多样，加 入的营养成份对皮肤细胞是否有益．如何评 价营养成份对皮肤细胞的生理作用，尚无适 当的方法。。H—TdR、 H—Leu掺入实验是反 映细胞增殖、分化的一个较为简单、快速、且 为客观的细辩动力学指标。当外源性化学物 引入时，细胞的 DNA、蛋白质 合成就会受到 不同程度的影响，其中 DNA 复制合成尤为 突出。细胞受损伤，DNA复制台成能力下降， 可导致细胞的衰老，死亡；DNA复制台成能 力增加，致使皮肤细胞赋活，促进 DNA 自然 修复机制，延缓皮肤衰老“j。本文用 H— TdR、 H—Leu掺入实验探讨了化妆品中几 种常用成份对皮肤基底细胞的 DNA、蛋白质 合成的影响，这在国内外都是一种新的尝试。 1 实驻部分 1．1 受 试物 · 上海 医科大学 共卫 生学 院 维 甲酸(上海第六制药厂)；维生素 E醋 酸酯(上海试剂二厂)；透明质酸(中国科学院 上海生物化学研究所)；维生索 A棕榈酸酯 (瑞士 Roche公司)；Liposome(西德 Henkel 公司)；除草醚：化学纯 99．99 (上海联合化 工厂提供 ) 1．2 实验试剂 [甲基 一。HI一胸 腺 嘧 啶 核 苷 ( H— TdR)(比放射活性 34Ci／mg)，DL一[4，5一 H ]一 亮 氨酸 (。H—Leu，比放 射 活性 6 5 Ci／mg)，均 由中科院上海原子核研 究所提 供。 1．3 原代皮肤基底细胞培养法“’ 1．4 H—TdR细胞掺入实验 细胞培养达亚融合状态后 ，弃培养液 ，加 入古不同浓度受试物，培养 2O小时，再次更 换 含 H—Td 的培养液(2gci／m1)。4小时 后，弃培养液，加入 0．02 EDTA，0．2O 胰 维普资讯 http://www.cqvip.com ’ > 第 3期 日 用 化 学 工 业 蛋 白酶(1：1混合液)，30分钟后 ，加冰冻生 理盐水(1ml／dish)，终止掺入。以多头细胞收 集器抽滤，将细胞移至醋酸纤维滤漠(49型， 0．22 )上，依次用蒸馏水 ，5 TCA、98 乙 醇洗涤，凉干后将滤膜移至闪烁杯中，Beck lnan LS一3801液体 闪烁计数仪测定其放射 活性 。闪烁液的组份为：ppo4g，popop0．4g， 甲苯 1000ml。 1．5 H—Leu细胞掺入实验 实验方法阿上 2 结果与讨论 2．1 维 甲酸对皮肤基底细胞 H—TdR、 H — Leu掺入的影响 维 酸对皮肤基底细胞 DNA的合成具 有双向作用，在低浓度(0．05t~g／m1)时 ，增加 对细胞 H—TdR的掺入，即对皮肤细胞具有 生长促进作用，与对照组比较有显著差异 ；而 在较高浓度组(0．2—10．0t~g／m1)，对皮肤细 胞 DNA合成具有抑制作用； H—Leu实验 结果表明，维甲酸对皮肤基底细胞蛋白质的 合成具有明显的促进作用，尤其在较高浓度 组与对照组比差异显著(见表 1、图 1)。可认 为这是 一种 蛋 白转换 的加 速。Shapire和 Poom‘ 研究中发现，维甲酸对小肠上皮细胞 系 407具有促进糖蛋 白、糖脂 、氮基葡萄糖的 生成；Fuchs 研究发现 ，维 甲酸能抑制与皮 肤细胞终末分化有关的 67kd的蛋白质．促 进 52kd．40kd蛋白质的合成．这与本实验的 结果相一致 。维甲酸可考虑在低浓度时作为 细胞赋活剂加入化妆品中 2．2 维生素 A棕榈酸酯对皮肤基底细胞 H — TdR、 H—Leu掺入的影响 维生素 A棕捆酸酯是维生素 A类的另 一 种形式。实验结果表明．维生索 A棕榈酸 酯对皮肤细胞的双向作用不明显．和维甲酸 相 比，双向作用较弱 低剂量时对皮肤细胞 的 H—TdR的掺入有轻度促进作用．但无显 著意义；在 10．0 剂量时，出现抑制作用，且 有显著性意义；维生素A棕榈酸酯对皮肤细 胞的 H—Leu的合成具有明显的促进作用， 与对照组相比有显著性差异(见表 2)。和维 甲酸的 H—Leu掺入实验结果相似 ，这可能 与维 甲酸和维生素 A棕榈酸酯同属维生素 A类有关。维生素 A棕榈酸酯同样可作为皮 肤细胞的赋活剂加入化妆品中。 2．3 维生素 E醋酸酯对皮肤基底细胞 H— TdR、 H—LeIl掺入的影响。 表 1 维甲酸对皮肤基底细胞 H—TdR、 H—Leu掺入的影响 t t p< O Ol *p<0．1)5 T-为 喜验组 dpm C-为对 照组 dpm 下 同 维普资讯 http://www.cqvip.com 8(总114) 日 用 化 学 工 业 1993年 圉 1 维 甲酸对皮肤基底细拖 。H--TdR，。H--Leu掺^的影响 维生素 E醋酸酯对皮肤基底细胞 H TdR、。H—Leu掺 入 实 验 结 果 表 明，其 对 DNA、蛋白质的合成具有明显促进作用，在 较高浓度组与对照组相比有明显的差异(见 表 3)。这可能是由于维生素 E醋酸酯具有抑 制和终止脂质过氧化物的形成，清除游离 自 由基，延缓皮肤老化达到保护皮肤的作用，从 而在离体培养细胞的条件下，问接起到促进 DNA、蛋白质的合成作用。日本学者 认l为： 维生索 E可通过促使细胞内呼吸的活化而 达到促进细胞生长的作用。因此 ，维生索 E 醋酸酯可作为营养成份和抗皱成份加入化妆 品 中。 2．4 Liposome和透明质酸对皮肤 基底细 胞 H—TdR、 H—Leu掺入影响 表 3 维生素E醋酸酯对皮肤基底细胞。H—TdR,H--Leu掺入影响 *P< 0．05 * *P< 0 01 Liposome、透明质酸对皮肤基底细胞 H 胞的 DNA、蛋白质无 明显作用，与对照组相 TdR、。H--Leu掺入实验表明，其对皮肤细 比无显著性差异(表 4、5)。作为生物型营养 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 3制 日 用 化 学 工 业 9( 儿5) 物质加入化妆品中值得质疑 透明质酸由于 其特 定结构 ．表现 出特强的吸水性和 保水 性0 常作保湿剂加入化妆品中 L Lposome 列 H—TdR和 H —Leu掺人皮肤细胞虽无 明显促进，但由于其结构和细胞膜类似．若使 营养成份用 L[posome微胶囊化，则可有被 皮肤吸收的作用 。 2．5 除草醚对皮肤 基底细胞 H—TdR、 H ～ Leu掺入的影响 除草醚化学名 为 2，4一二氧一4一硝基 二苯醚．是一种触杀型的选择性除草剂 据文 献 报道 ：除草醚对人皮肤及眼睛有刺激作 用。为 r和前往几种化妆品有效成份对比，我 们用除草醚也作 了 H—TdR、 H—Leu掺入 实验 从表 6，图 2可见．除草醚对皮肤基底 细胞DNA合成具有明显抑制作用 ，随着给 表 4 L[posome对皮肤基底细胞 H—TdR． H ’。Leu掺入 影响 药浓度增加，抑制率随之上升，呈剂量一反应 关系；对皮肤基底细胞的蛋白质也具有抑制 作用，剂量增加．抑制作用增强。研究表明除 草醚对皮肤具有损害作用 表 5 透明质酸对皮肤基底细胞 H—TdR、。H—Leu掺入的影响 1 喜 敞盥 ~mmo]／1) 圈 2 除草醚 对皮肤基底 湘胞。H--'／aR， H—Leu掺人的禁止作用 表 6 除草醚对皮肤基底细胞 H-TdR、 H—Leu掺入的影响 *P< 0 Ol 3 结论 Leu掺人实验可用来评价化妆品中有效成份 从上述 实验可看 出． H—TdR 和 H一 对皮肤细胞的作用．筛选化妆品用营养成份 维普资讯 http://www.cqvip.com 日 用 化 学 工 f c—1] 迪恩普(DNP)新型高分子阳离子表面活 性剂在二合一香波中的应用 柚 袖 胡 一 萍 TQ掰 30022Z (爰律 市 ) 摘要 ： 车丈研究了新型高丹子阳离子表面话性利——地恩普 ppt 关于艾滋病ppt课件精益管理ppt下载地图下载ppt可编辑假如ppt教学课件下载triz基础知识ppt ication in ”two in one sham poo 0f a new kind of high molecu【e cationic surlaetant DNP(DNP— OS，81-e res6arched．A contrast appfl_ cation exDerlment with JR——400 in shampoo has been done on,compatibilrty．thickening．{oami rtg antistatic(combing) DNP--OS is safe to eyes andskin．withour,~tintulation-prefer to 1I 400 cl_ ther in perIornlance or in price DNPhas good compatibility wIrh anionic sur~aclants，may be used ll_ other fine chemical h~dustry areas too． Key words： NDP ．~ur{aetan r；shampoo 引言 阴离子表面活性剂由于具有良好的洗涤 效果而且价靡 易得，作为香波原料已有较长 的历史 。，而阳离子表面活性剂．困其对头发 有良好的吸附而使头投具有良好的抗静电、 柔软和梳理性 。所 以护发素中常使用 离子 表面活性列 景广泛使用的季铵化合物有十 八烷基苄基二 甲基氯化铵等，但许多消费者 反映该类季铵盐的手感不好，有涂料似的感 觉 。为了改善头发的梳理性 ，人们叉开发研 制出许多新型阳离子表面活性剂如胺盐型阳 离子表面活性剂 ．纤维索、蛋白质水解物 等聚 合物阳离子表面活性剂等 ， 及聚胺 衔 生 物 (也 称 假 性 阳 离 子 忡 胺 )用 作 调 理 剂”．它们微弱的阳离子性质即使重复使用 也不会在头发基杆上产生沉积 rnll~,Ted l_㈨ Ln Ker．tinocyte~ by VIt— n A．Cetl 1981． 25，61 7 625． L r,JId．o~ B Vila,,lin s ln cosmetics VE An updale，Drug ＆ Cos．11_d 19901 B．20 26 6]宫 选 F ’g⋯ c Jou rmd 1981 NO ；48 J；iol~s A Hayward ~osmelics ＆ To；lei rie Vul 1 ，· ll ．7 47． [8-1ARC Nitmfen i,t Monographs on the evaIutlon ol th (r T‘inegennic risk of rl,emlcaIs lluroans，i rtlseellaneous⋯ 一 tl⋯d Vul： ¨；Z78 ～ ～ ㈣ 一 翱 ～Ⅲ～ 一 ( ” 皮 川 _暑 ，． Ⅲ=耋 悼 ⋯ 刻 fz= 维普资讯 http://www.cqvip.com