放线菌的形态观察
姓名:俞华军 班级:09生科三班 学号:200900140157
组别:四 同组者:谢英健 张刚刚 岳永胜 余振洋 一(实验目的
1(掌握配制合成高氏一号培养基的一般方法。
2(掌握放线菌形态的基本观察方法。
3(了解并掌握放线菌的形态。
二(实验原理
1(高氏I号培养基
高氏 I 号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐
可能相互作用而产生沉淀。因此，在混合培养基成分时，一般是按
配方
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的
顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用
时再按比例混合。此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如Fe元素。
2(放线菌
放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见
放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基
表
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面或深入培养基内生长的叫基内
菌丝 ( 简称“基丝” ) ，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生
菌丝 ( 简称“气丝” ) ，并进一步分化产生孢子丝及孢子。有的放线菌
只产生基丝而无气丝。
在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝
较透明。孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。在油镜
下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。能否产生菌丝体及由
菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
3(插片法观察放线菌
将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝
沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。观察时，轻轻取
出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。这种方法可观察到放线菌自然生长状
态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
三(实验器材
1(菌种: 青色链霉菌 ( S glaucus ) ，弗氏链霉菌 ( S. fradiae ) 。
2(培养基:高氏 I号培养基(配方见后附)
3(仪器或其他用具:平皿、玻璃纸、盖玻片、玻璃涂棒，以及载玻片，
接种环，接种铲，镊子，显微镜,双层瓶，马铃薯，
酒精灯。
四(实验步骤
1(配置高氏I号培养基200ml。
2(倒平板 取融化并冷至大约 50 ? 的高氏 I 号琼脂约 20ml 倒平
板，凝固待用
3(接种 用接种环无菌操作分别由青色链霉菌(或弗氏链霉菌)菌种
斜面培养物挑取适量菌在琼脂平板上划线。 4(插片 以无菌操作用镊子将灭菌的盖玻片以大约45?插入琼脂内，
每个琼脂片插两到到三片。
5(培养 将扦片平板倒置，于28?培养3-5天。
6(镜检 用镊子小心拔出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一
面朝上放在载玻片上，直接镜检(用油镜观察)。
五(实验结果
记录
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孢
子
丝基内菌丝(透明)
气生菌丝(暗)
青色链霉菌10×100(油镜) 青色链霉菌孢子丝放大图
基内菌丝(透
明)
孢子丝(颗粒
状)
气生菌丝
(暗)
弗氏链霉菌10×100(油镜) 弗氏链霉菌局部放大图
表一 实验结果
记录表
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项目 基内菌丝形态 气生菌丝形态 孢子丝形态
较长，疏松，多分紧密螺旋形 青色链霉菌 毛状 枝
略短，较密，多分弗氏链霉菌 厚絮状 直条状 枝
六(注意事项
1.倒平板要厚一些，接种时划线要密。
2.插片时要有一定角度并与划线垂直。
3.观察时，宜用略暗光线;先用低倍镜找到适当视野，更换高倍镜观察。
4.如果用0.1%美蓝对培养后的盖玻片进行染色后观察，效果会更好。 七(思考题
1(镜检时如何区分放线菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝,
答:在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基
丝较透明。孢子丝形态各异，末端有孢子脱落。 附:高氏I号培养基配方
项目 量
可溶性淀粉 20g
KNO 1g 3
NaCl 0.5g
KHPO 0.5g 24
MgSO0.5g 4
FeSO0.01g 4
琼脂 20g
水 1000ml
PH 7.2-7.4 配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其它成分，溶化后，补足水分至1000ml。121摄氏度灭菌20min。
浙公网安备 33021202002483