[宝典]精液稀释作业指导书
精液稀释作业指导书
1、 目的
制定严格的程序以保证精液得到正确稀释,减少次品精液的发生率。 2、 范围
适用于公猪站实验室精液稀释过程。
、
职责
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3
实验室操作人员负责配制稀释液和精液的稀释工作。 4、 工作程序
4.1 精液稀释液的配制
常用稀释剂配方:
保存天数 3 3 5
类型 BTS KIVE 20rPVa
葡萄糖(g) 3.700 6.000 1.150
柠檬酸钠(g) 0.60 0.37 1.165
碳酸氢钠(g) 0.125 0.12 0.175
EDTA钠 0.125 0.37 0.235
氯化钾(g) 1 0.075
青霉素(IU/ml) 500 500 0.69
链霉素(mg/ml) 0.5 0.5 1.09
蒸馏水加至(ml) 100 100 100
配制稀释剂要用精密电子天平,不得更改稀释液的配方或将不同的稀释液随意混合。配制好后可以先贮存,液态稀释液在4?冰箱中保存不超过24小时,超过贮存期的稀释液应废弃。抗生素的添加,应在稀释精液前加入到稀释液里,太早易失去效果。稀释液的配制的具体操作步骤为:
4.1.1 所用药品
要求
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选用分析纯,对含有结晶水的试剂按摩尔浓度进行换算。
4.1.2 按稀释液配方,用称量纸和电子天平按1000ml和2000ml剂量准确称取所需药品,称
好后装于密闭袋中。
4.1.3 使用1小时前将称好的稀释剂溶于定量的双蒸水中,用磁力搅拌器加速其溶解。
4.1.4 如有杂质需要用滤纸过滤。
4.1.5 稀释液配好后及时贴上标签,标明品名、配制时间和经手人等。 4.1.6 放在水浴锅内进行预热,以备使用
4.1.7 认真检查配好的稀释液,发现问题及时纠正。
4.2 精液的稀释处理
处理精液必须在恒温环境中进行,品质检查后的精液和稀释液都要在37?恒温下预热,处理时,严禁太阳光直射精液,阳光对精子有极强的杀伤力。稀释液应在采精前准备好,并进行预热。精液采集后要尽快稀释,未经品质检查或活力在0.7以下的精液不用于稀释。具体的稀释程序为:
4.2.1 精液稀释头份的确定:
计算方法:人工授精的正常剂量一般为30,40亿个精子/头份,体积为80,100ml,假如有公猪的原精液,密度为2亿/ml,采精量为150ml,稀释后密度要求为40亿,100ml头
份。则此公猪精液可稀释150×2/40,7.5头份,需加稀释液量为(100×7.50,150)ml,600ml。同一种稀释液,若精子密度越大,精子所消耗能量越多,保存时间也就越短。
4.2.2 测量精液和稀释液的温度,调节稀释液的温度与精液一致(两者相差1?以内)。注
意:必须以精液的温度为
标准
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来调节稀释液的温度,不可逆操作。 4.2.3 将精液移至2000ml大塑料杯中,稀释液沿杯壁缓缓加入精液中,轻轻搅匀或摇匀。
4.2.4 如需高倍稀释,先进行1:1低倍稀释,1分钟后再将余下的稀释液缓慢加入。因精
子需要一个适应过程,不能将稀释液直接倒入精液。 4.2.5 精液稀释的每一步操作均要检查活力,稀释后要求静置片刻再作活力检查。活力下
降必须查明原因并加以改进。
4.2.6 用具的洗涤:精液稀释的成败,与所用仪器的清洁卫生有很大关系。所有使用过的
烧杯、玻璃棒及温度计,都要及时用蒸馏水洗涤,并进行高温消毒,以保证稀释后的精
液能适期保存和利用。
4.2.7 精液的分装:稀释好的精液,检查其活力,前后一致便可以进行分装,执行《精液
分装、保存、运输作业指导书》。稀释后的精液也可以采用大包装集中贮存。但要在包装
上贴好标签,注明公猪的品种、耳号以及采精的日期和时间。 4.2.8 记录:精液稀释记录见附
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
。
5、 相关文件
《精液分装、保存、运输作业指导书》
、 质量记录 6
《精液稀释记录》