激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定
1 石烽
1. 武汉科技大学医学院临床1105班 湖北 武汉 430065
[摘要]
目的:掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义;
熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。 方法:家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其;
进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。
结果:注射肾上腺素后的家兔血糖水平较注射前有明显上升。最
终得出注射肾上腺素前血糖浓度=88.9mg%,注射后血糖浓
度=156.7mg%。同样,注射胰岛素后的家兔血糖水平较注
射前则有明显下降。注射胰岛素前家兔空腹血糖含量为
89.3mg%,注射胰岛素后为72.0mg%。 结论:调节血糖类激素对血糖水平有显著地影响。
[关键词] 胰岛素;肾上腺素;血糖(
实验采取前后对照的方法,对家兔注射肾上腺素,并通过耳缘静
脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯胺法处理样
本,最终与标品比色得出结论。
原理:
1.调节血糖的激素有:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺
皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖
降低的激素,其他激素均使血糖升高。
2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体,通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶,同时抑制糖原合成酶,导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平,从而抑制肝磷酸化酶,激活糖原合成酶,促进肝糖原的合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成,阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散,促进糖的利用。
3.血液中的葡萄糖,在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛(或称羟甲基糠醛)。后者在与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色,即可求得待测血液中葡萄糖的含量。
1 材料与方法
1.1材料:空腹状态下的2.3Kg家兔一只,空腹状态下的2.6Kg家兔
一只,刀片,草酸钠,小烧杯.
试剂:?肾上腺素(1mg,lml)
?胰岛素(5 单位,ml)
?碘酒、消毒酒精
?饱和硼酸溶液
?邻甲苯胺-硼酸
?5, 三氯醋酸溶液
?饱和苯甲酸溶液
?标准葡萄糖贮存液(1ml=10 mg 葡萄糖)
?标准葡萄糖应用液(1ml=0.1mg 葡萄糖)
1.2方法(注射肾上腺素):
取健康正常家兔一只,实验前饥饿14~16h左右,称体重。 1.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。 刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。
2.给家兔注射肾上腺素(0.5mg/只),半小时后同样方法采得血液。 3.抗凝血0.4ml,缓缓放入洁净试管内,加5%三氯醋酸3.6ml,同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。
4.取四支试管,分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。
5.混匀后沸水加热8min,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。
1.3表加试剂
如下表:
ml 空白标准待测管甲(药待测管乙(药
管 管 前) 后)
1.0 蒸馏水 ― , ,
1.0 标准葡萄糖应用, , , 液
1.0 无蛋白血滤液(药, , , 前)
1.0 无蛋白血滤液(药, , ,
后)
2.5 2.5 2.5 2.5 邻甲苯胺试剂
同理,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为5单位/公斤体重)并进行
上述步骤,最终得出结果
2 结果
2.1测量值
标准管光密度=0.4102 胰前光密度=0.3665
胰后光密度=0.2951
标准管光密度=0.5614 肾前光密度=0.4991
肾后光密度=0.8795
2.2计算:血糖(mg,),0.D测定/0.D标准*0.1*1/0.1*100
,0.D测定/0.D标准*100。
即血糖(mg%)= 测定/标准x100
2.2.数据代入
注射胰岛素前的血糖=0.3665/0.4102*100=89.3mg%
注射胰岛素后的血糖=0.2951/0.4102*100=72.0mg%
注射肾上腺素前的血糖=0.4991/0.5614*100=88.9mg%
注射肾上腺素后的血糖=0.8795/0.5614*100=156.7mg% 即:注射胰岛素可降低血糖,而注射肾上腺素则有相反的作用。
3 讨论
激素对血糖浓度的影响是显著的。由实验可知,即使是很少剂量的激
素即可使血糖浓度在短时间内有显著地变化。在注射肾上腺素后的半
个小时内,血糖的浓度即升高了67.8%,家兔的表观反应也很明显,
注射激素后,其活动量明显增多,较注射前亦有很大不同。需要注意
的是为什么在饥饿15h之后家兔的血糖浓度依然在正常值范围内,
这说明一段较长时间无法摄入足够糖类物质作为能量供给时,动物体
内仍然可以通过糖异生等途径维持血糖浓度,从而保证了其正常的生
命活动。正是这种激素之间的协同或者拮抗作用,使得生物能够在逆
境中得以生存较长时间。
参考文献:
1. 查锡良《生物化学(第七版)》 第四章糖代谢 第八节血糖及其调
节。
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