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激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定

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激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定 1 石烽 1. 武汉科技大学医学院临床1105班 湖北 武汉 430065 [摘要] 目的:掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义; 熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。 方法:家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其; 进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。 结果:注射肾上腺素后的家兔血糖水平较注射前有明显上升。最 终得出注射肾上腺素前血糖浓度=88.9mg%,注射后血糖浓 度=156.7mg%。同样,注射胰岛素后的家兔血糖水平较注 射前则有明...

激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定
激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定 1 石烽 1. 武汉科技大学医学院临床1105班 湖北 武汉 430065 [摘要] 目的:掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义; 熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。 方法:家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其; 进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。 结果:注射肾上腺素后的家兔血糖水平较注射前有明显上升。最 终得出注射肾上腺素前血糖浓度=88.9mg%,注射后血糖浓 度=156.7mg%。同样,注射胰岛素后的家兔血糖水平较注 射前则有明显下降。注射胰岛素前家兔空腹血糖含量为 89.3mg%,注射胰岛素后为72.0mg%。 结论:调节血糖类激素对血糖水平有显著地影响。 [关键词] 胰岛素;肾上腺素;血糖( 实验采取前后对照的方法,对家兔注射肾上腺素,并通过耳缘静 脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯胺法处理样 本,最终与标品比色得出结论。 原理: 1.调节血糖的激素有:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺 皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖 降低的激素,其他激素均使血糖升高。 2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体,通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶,同时抑制糖原合成酶,导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平,从而抑制肝磷酸化酶,激活糖原合成酶,促进肝糖原的合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成,阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散,促进糖的利用。 3.血液中的葡萄糖,在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛(或称羟甲基糠醛)。后者在与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色,即可求得待测血液中葡萄糖的含量。 1 材料与方法 1.1材料:空腹状态下的2.3Kg家兔一只,空腹状态下的2.6Kg家兔 一只,刀片,草酸钠,小烧杯. 试剂:?肾上腺素(1mg,lml) ?胰岛素(5 单位,ml) ?碘酒、消毒酒精 ?饱和硼酸溶液 ?邻甲苯胺-硼酸 ?5, 三氯醋酸溶液 ?饱和苯甲酸溶液 ?标准葡萄糖贮存液(1ml=10 mg 葡萄糖) ?标准葡萄糖应用液(1ml=0.1mg 葡萄糖) 1.2方法(注射肾上腺素): 取健康正常家兔一只,实验前饥饿14~16h左右,称体重。 1.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。 刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。 2.给家兔注射肾上腺素(0.5mg/只),半小时后同样方法采得血液。 3.抗凝血0.4ml,缓缓放入洁净试管内,加5%三氯醋酸3.6ml,同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。 4.取四支试管,分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。 5.混匀后沸水加热8min,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。 1.3表加试剂 如下表: ml 空白标准待测管甲(药待测管乙(药 管 管 前) 后) 1.0 蒸馏水 ― , , 1.0 标准葡萄糖应用, , , 液 1.0 无蛋白血滤液(药, , , 前) 1.0 无蛋白血滤液(药, , , 后) 2.5 2.5 2.5 2.5 邻甲苯胺试剂 同理,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为5单位/公斤体重)并进行 上述步骤,最终得出结果 2 结果 2.1测量值 标准管光密度=0.4102 胰前光密度=0.3665 胰后光密度=0.2951 标准管光密度=0.5614 肾前光密度=0.4991 肾后光密度=0.8795 2.2计算:血糖(mg,),0.D测定/0.D标准*0.1*1/0.1*100 ,0.D测定/0.D标准*100。 即血糖(mg%)= 测定/标准x100 2.2.数据代入 注射胰岛素前的血糖=0.3665/0.4102*100=89.3mg% 注射胰岛素后的血糖=0.2951/0.4102*100=72.0mg% 注射肾上腺素前的血糖=0.4991/0.5614*100=88.9mg% 注射肾上腺素后的血糖=0.8795/0.5614*100=156.7mg% 即:注射胰岛素可降低血糖,而注射肾上腺素则有相反的作用。 3 讨论 激素对血糖浓度的影响是显著的。由实验可知,即使是很少剂量的激 素即可使血糖浓度在短时间内有显著地变化。在注射肾上腺素后的半 个小时内,血糖的浓度即升高了67.8%,家兔的表观反应也很明显, 注射激素后,其活动量明显增多,较注射前亦有很大不同。需要注意 的是为什么在饥饿15h之后家兔的血糖浓度依然在正常值范围内, 这说明一段较长时间无法摄入足够糖类物质作为能量供给时,动物体 内仍然可以通过糖异生等途径维持血糖浓度,从而保证了其正常的生 命活动。正是这种激素之间的协同或者拮抗作用,使得生物能够在逆 境中得以生存较长时间。 参考文献: 1. 查锡良《生物化学(第七版)》 第四章糖代谢 第八节血糖及其调 节。
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上传时间:2017-11-14
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